專利名稱：一種厭氧微生物轉移裝置的制作方法
技術領域：
本實用新型涉及一種微生物轉移裝置，特別是一種厭氧微生物的轉移裝置。
背景技術：
厭氧微生物資源的保藏與好氧微生物相比，整個操作過程不僅需要保持無菌狀 態(tài)，更要保持無氧狀態(tài)，特別保藏嚴格厭氧微生物如產甲烷古菌，對無氧狀態(tài)要求更高。因 此，厭氧微生物的保藏技術要求異常的苛刻，目前只有DSMZ、ATCC、JCM等少數(shù)幾個菌種保 藏機構可以大規(guī)模保藏厭氧微生物資源。厭氧微生物保藏的方法主要有低溫定期移植法、真空冷凍干燥法、低溫冷凍保藏 法。低溫定期移植法一般是通過把保藏在4°C左右的菌種轉接到5-20ml新鮮培養(yǎng)基中，厭 氧培養(yǎng)至對數(shù)生長期，向厭氧管或血清瓶中補加惰性氣體，4°C條件下可保藏1-6個月。低 溫定期移植法操作簡單，但是保藏時間短，菌種易變異退化。運用真空冷凍干燥法可以保藏 部分厭氧微生物，甚至可以保藏10年以上，但這種方法不適用于所有的厭氧微生物(Hippe and Tilly，1982)。傳統(tǒng)的低溫冷凍保藏法也可以長期保藏厭氧微生物，例如在_196°C下 部分菌種的保藏期長達15年，在-80°C中期也可可以保藏1年以上，這種保藏方法操作簡 單，但是在低溫條件下，氧氣容易通過塞子空隙進入培養(yǎng)物而使菌種失活，從而降低菌種的 復活率。若把菌種轉到安瓿瓶或毛細管中，高溫加熱完全把菌種密封在安瓿瓶或毛細管中 則可以避免氧氣滲入。特別是采用毛細管法低溫保藏厭氧微生物，具有體積小、密封性好等 特點而備受國外菌種保藏機構青睞。目前國外主要的厭氧微生物保藏機構都采用毛細管液 氮法保藏嚴格厭氧微生物(如產甲烷古菌)。但是采用毛細管法的操作過程非常繁瑣，而且 必須保持無氧操作。由于密封毛細管需要高溫火焰，這就不能在厭氧操作箱中進行。所以， 傳統(tǒng)的毛細管法都是直接暴露在空氣中，這又容易導致菌種污染。

實用新型內容本實用新型要解決的技術問題是提供一種既可以保證無氧操作，又可以進行無 菌操作的厭氧微生物轉移裝置。為解決上述技術問題，本實用新型采用的技術方案是一種厭氧微生物轉移裝置， 該裝置包含火焰發(fā)生裝置，無菌無氧氣體發(fā)生裝置和無菌操作裝置，無菌發(fā)體發(fā)生裝置的 氣體出口和火焰發(fā)生裝置的火焰出口都設置在無菌操作裝置中。為了能同時進行多個轉移操作，本實用新型的厭氧微生物轉移裝置的無菌發(fā)體發(fā) 生裝置的氣體出口可以是一個或者多個。本實用新型的火焰發(fā)生裝置可以通過儲氣瓶儲藏的氫氣和氧氣混合產生火焰，也 可以通過其他方式產生火焰，儲氣瓶可以通過管道與火焰噴出口連接，當然也可以用其他 方法產生火焰。無菌無氧氣體發(fā)生裝置可以產生無菌無氧的氣體，無菌無氧的氣體通過管 道與無菌無氧氣體的出口連接，無菌無氧氣體產生的方式是可以按公知技術進行。在無菌操作裝置內進行厭氧微生物操作，將含有厭氧微生物的菌液置于容器中，將無菌無氧氣體發(fā)生器的出口伸入該容器中，往容器中通入無菌無氧氣體，使容器內保持 無菌無氧的狀態(tài)，取一個毛細管，將毛細管一端伸入容器中，另一端用洗耳球反復吹打，排 除其中的氧氣，打開高溫火焰發(fā)生器，吸取容器中的菌液轉移到毛細管中，然后，用高溫火 焰使毛細管兩端的玻璃迅速熔解后又迅速凝固，從而封住毛細管的兩端，如此，即將厭氧微 生物由血清瓶中轉移到了毛細管中。本實用新型的毛細管法保藏厭氧微生物的裝置的技術效果為用毛細管吸取菌液 等過程也需要用無氧氣體保護，在保藏厭氧微生物，特別像產甲烷古菌這類對氧氣特別敏 感的微生物時，對無氧的要求更為嚴格，操作就需要特別小心。保藏的菌種都是經(jīng)過分離純 化的單一菌株，因此在保藏過程中，必須避免菌種被污染。使用高溫火焰來封閉毛細管會釋 放熱量，這需要在一個能夠及時散熱的環(huán)境中進行。本裝置通過將無氧氣體出口和高溫火 焰噴出口設置在無菌操作臺中，使得整個厭氧微生物保藏可以在無菌無氧的環(huán)境中進行， 同時可以方便的用高溫火焰來封閉毛細管。作為對本實用新型的毛細管法保藏厭氧微生物的裝置的一種改進，可以將無菌無 氧氣體發(fā)生器通過管道與氣體分流器連接，在氣體分流器上設置至少兩個無菌無氧氣體的 出口，這樣就可以很方便的一次進行多種厭氧微生物的保藏，提高工作效率。

圖1是本實用新型的毛細管法保藏厭氧微生物裝置。高溫火焰發(fā)生器1 ；無菌無氧氣體發(fā)生器2 ；無菌操作裝置3 ；氣體分流器4 ；無菌 無氧氣體的出口 5 ；高溫火焰發(fā)生器的火焰噴出口 6 ；；容器9。
具體實施方式
本實用新型的毛細管法保藏厭氧微生物的裝置包含高溫火焰發(fā)生器1，無菌無氧 氣體發(fā)生器2和無菌操作裝置3，高溫火焰發(fā)生器1通過管道與火焰噴出口 6連接，火焰噴 出口 6設置在無菌操作裝置3中，無菌無氧氣體發(fā)生器2通過管道與氣體分流器4連接，氣 體分流器4分出了 5個無菌無氧氣體的出口 5，氣體分流器4和無菌無氧氣體的出口 5設置 在無菌操作的裝置3中。在轉移厭氧微生物時，在無菌操作裝置3內進行操作，將濃縮后的含有厭氧微生 物的菌液置于容器9中，將無菌無氧氣體發(fā)生器的出口 5伸入該容器中，往容器9中通入無 菌無氧氣體，使容器9內保持無菌無氧的狀態(tài)，取一個毛細管，將毛細管一端伸入容器9中， 另一端用洗耳球反復吹打，盡量排除其中的氧氣，打開高溫火焰發(fā)生器6，吸取容器9中的 菌液轉移到毛細管中，然后，用高溫火焰使毛細管兩端的玻璃迅速熔解后又迅速凝固，從而 封住毛細管的兩端，如此，即將厭氧微生物由血清瓶中轉移到了毛細管中。本領域的普通技術人員將會意識到，這里所述的毛細管法保藏厭氧微生物的裝置 的實施例是為了幫助讀者理解本實用新型的原理，應被理解為本實用新型的保護范圍并不 局限于這樣的特別陳述和實施例。
權利要求一種厭氧微生物轉移裝置，該裝置包含火焰發(fā)生裝置(1)，無菌無氧氣體發(fā)生裝置(2)和無菌操作裝置(3)，無菌無氧氣體發(fā)生裝置(2)的氣體出口(5)和火焰發(fā)生裝置(1)的火焰出口(6)設置在無菌操作裝置(3)中。
專利摘要本實用新型公開了一種厭氧微生物轉移裝置，該裝置包含火焰發(fā)生器(1)，無菌無氧氣體發(fā)生器(2)和無菌操作裝置(3)，無菌發(fā)體發(fā)生器(2)的氣體出口(5)和火焰發(fā)生器(1)的火焰出口(6)設置在無菌操作裝置中。
文檔編號C12M1/00GK201605264SQ20102010919
公開日2010年10月13日 申請日期2010年2月5日 優(yōu)先權日2010年2月5日
發(fā)明者代莉蓉, 承磊, 鄧宇 申請人:農業(yè)部沼氣科學研究所