專(zhuān)利名稱(chēng)：：一種微生物復(fù)合菌劑及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種微生物復(fù)合菌劑及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：秸稈是成熟農(nóng)作物莖葉(穗)部分的總稱(chēng)。通常指小麥、水稻、玉米、薯類(lèi)、油料、棉花、甘蔗或其它農(nóng)作物在收獲籽實(shí)后的剩余部分。農(nóng)作物光合作用的產(chǎn)物有一半以上存在于秸稈中，秸稈中富含氮、磷、鉀、鈣、鎂和有機(jī)質(zhì)等，是一種具有多用途的可再生生物資源。我國(guó)對(duì)作物秸稈的利用歷史悠久，但由于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)水平低、農(nóng)作物產(chǎn)量低，因此秸稈數(shù)量少，秸稈除少量用于墊圈、喂養(yǎng)牲畜、部分用于堆漚肥外，大部分都作為生活燃料燒掉了。隨著我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展，自20世紀(jì)80年代以來(lái)，糧食產(chǎn)量大幅提高，秸稈數(shù)量也迅速增多，加之農(nóng)村中省柴節(jié)煤技術(shù)的推廣，以及燒煤和液化氣的普及，使農(nóng)村中有大量剩余的秸稈。面對(duì)逐年增加的秸稈，目前還沒(méi)有特別有效的利用方法。尤其是我國(guó)南方的廣大農(nóng)村地區(qū)，每當(dāng)"雙搶"季節(jié)，當(dāng)季產(chǎn)生的農(nóng)作物秸稈由于在短時(shí)間內(nèi)不能在田間腐解，從而影響下一茬作物的種植，許多農(nóng)民將秸稈在田中燒掉。雖然我國(guó)明令禁止燃燒秸稈，但因缺乏有效的秸稈利用方法，燃燒秸稈的現(xiàn)象仍時(shí)有發(fā)生。在農(nóng)田中燃燒秸稈不僅會(huì)破壞土壤、浪費(fèi)資源、還會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。沒(méi)有燃燒的秸稈因不能及時(shí)還田而堆積起來(lái)，這樣也會(huì)造成環(huán)境的污染，同時(shí)還會(huì)造成因秸稈不能有效還田引起的土壤有機(jī)質(zhì)含量降低。近年來(lái)，隨著化肥的廣泛使用，種植業(yè)產(chǎn)量大大增加，但是連續(xù)多年大量使用化肥，也給土壤帶來(lái)嚴(yán)重的副作用因土壤有機(jī)質(zhì)含量降低，土壤的微生態(tài)平衡遭到破壞，成分比例嚴(yán)重失調(diào)；土壤硬化板結(jié)，地力逐年退化，保肥保水性大大降低；土傳病害加劇，使農(nóng)藥用量增加，農(nóng)業(yè)投入成本加大；作物的品質(zhì)大幅降低；農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境遭到破壞，致使農(nóng)產(chǎn)品中有害殘留物超標(biāo)，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康。因而世界范圍內(nèi)開(kāi)始研究解決土壤改良的問(wèn)題，于是生物肥料進(jìn)入了人們的視野。因而制備一種能利用植物秸稈這一自然資源，通過(guò)腐解使之轉(zhuǎn)化為植物所需營(yíng)養(yǎng)，從而改善土壤結(jié)構(gòu)的微生物菌劑，成為目前生物肥料研制的熱點(diǎn)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種微生物復(fù)合菌劑及其應(yīng)用。本發(fā)明所提供的微生物復(fù)合菌劑，它的活性成分包括芽孢桿菌、土壤放線(xiàn)菌、酵母菌、霉菌和光合菌。上述菌劑中，所述芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌(^7"7/^^6似/力，所述土壤放線(xiàn)菌為細(xì)黃鏈霉菌CSVre/^o附y(tǒng)c"w/cray7av附)，所述酵母菌為釀酒酵母(SoccAflra附;^"cereWWae)，所述霉菌為米曲霉Us/^g///i^o^zae)，所述光合菌為沼澤紅假單胞菌所述枯草芽抱桿菌(5ac/〃uss"6"/Zs)、細(xì)黃鏈毒菌(iS^-e/7tomycesm/cra^7avuy)、釀酒酵母CS"acc/wr。w;/c"cwev^/ae)、米曲霉Uj/erg〃/w禾口沼澤紅假單胞菌0Ao必;weM^mo"aspa/"欲&)的集落形成單位數(shù)目比為(2-8):(1-6):(2-8):(4-7):(2-5)，具體可為(4-6):(2-4):(4-6):(5-6):(4-5)。上述菌劑中，所述枯草芽孢桿菌(Bac///^s"Z^7/"具體可為枯草芽孢桿菌(5a"'〃"^^Z7"7/"ACCC11089;所述細(xì)黃鏈霉菌CS^e/7/o/^cejw/croyZ。v"》具體可為細(xì)黃鏈霉菌(Sfr印tomyce:ym/crq/7avw"ACCC40027;所述酉良酒酵母(5^cc/kwomyce5cerew;s7'"e)具體可為釀酒酵母(^flcc/^w^c^cerev&^e)ACCC20063;所述米曲霉04^erg/〃ws07zae)具體可為米曲霉(v4印wg/〃w07z"e)ACCC30155;所述沼澤紅假單胞菌(及Ao^/o/je^/""o"ajp"/w5^/j)具體可為沼澤紅假單胞菌(i/2c^o/weMfi^r"o""j;a/她/"ACCC10649。本發(fā)明所提供的微生物復(fù)合菌劑的菌種組成也可僅有由所述枯草芽孢桿菌(5ac/〃wsswZ"7&)、細(xì)黃,連霉菌(5^印tom;;cesw/crq/7avws)、酉良酒酵母(5Wcc/zaramycesce"ev/j/—、米曲霉(Ji"/e,gi〃iAyWTzag)禾口沼澤紅假單胞菌(i/20^/o/wewc/""o"^xy上述菌劑中，所述枯草芽孢桿菌CSflc///^jmZ^7&)、細(xì)黃鏈霉菌0^re/tow;;c"w/croy7avws)、酉良酒酵母(Sacc/w^omycescerev/57'ae)、米曲霄(Js;erg/〃w5o;jzae)禾口沼澤紅假單胞菌(及/2^/o/7jew^womw/a/wWn'力可以分別獨(dú)立包裝，也可以混合在一起。本發(fā)明的微生物復(fù)合菌劑可以為液體菌劑，也可以為固體菌劑，在液體菌劑中加入吸附載體即可獲得固體菌劑。上述固體菌劑中，所述液體菌劑中的活性成分和所述吸附載體的配比為(1X108-2X108)CFU孢子:lg吸附載體。種秸稈有機(jī)肥料及其制備方法。本發(fā)明所提供的秸稈有機(jī)肥料的制備方法，是用上述微生物復(fù)合菌劑發(fā)酵秸稈得到秸稈有機(jī)肥料。采用上述方法制備的秸稈有機(jī)肥料也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明的菌劑可以使秸稈迅速腐解，轉(zhuǎn)化成植物生長(zhǎng)所需的有機(jī)肥料，從而增加土壤腐殖質(zhì)的含量，提高土壤中微生物的含量和微量元素的含量，進(jìn)而達(dá)到改善土壤理化性質(zhì)、增加土壤保水、保肥的能力，還可以提高土壤通透性，抑制作物病蟲(chóng)害的發(fā)生，提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)。本發(fā)明的菌劑使用方便、成本低、效果明顯。具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例中所述實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法；所述試劑和生物材料，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑獲得。實(shí)施例1、微生物復(fù)合菌劑的制備1、菌種的轉(zhuǎn)接培養(yǎng)將枯草芽孢桿菌(萬(wàn)ac/〃wACCC11089接種于pH7.0的枯草芽孢桿菌轉(zhuǎn)接培養(yǎng)基中，30"C培養(yǎng)24-48小時(shí)。枯草芽孢桿菌CBac/〃ww^7&)ACCC11089轉(zhuǎn)接培養(yǎng)基的組成為蛋白胨5.0g/L，NaC15.0g/L，牛肉膏3.0g/L，瓊脂15.0g/L，其余為水。將釀酒酵母(Sflcc/^rowj;c^cerev/w'ae)ACCC20063接種于麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基(WortAgar)(購(gòu)自上海安譜科學(xué)儀器有限公司，貨號(hào)CFAH-1-05448-0500)中，30'C培養(yǎng)48-72小時(shí)。將米曲霉(^^erg/〃wo^zae)ACCC30155接種于察氏培養(yǎng)基中，3(TC培養(yǎng)48-72小時(shí)。察氏培養(yǎng)基的組成為蔗糖30g/L，MgS04'7H200.5g/L，F(xiàn)eS04-4H200.01g/L，NaN033g/L，KC10.5g/L，K2HP04lg/L，瓊脂15g/L，其余為水。將沼澤紅假單胞菌(及/zo^o;weWamowas/7fl/w欣的ACCC10649按10%的體積比接種于pH6.8-7.0的如下培養(yǎng)基中，30-32°C、光照強(qiáng)度為800-1000LX條件下培養(yǎng)3-5天，得到發(fā)酵液。此時(shí)發(fā)酵液變紅，每毫升發(fā)酵液中含有沼澤紅假單胞菌(/tofito/wracfawo"氾；G/wWn'力ACCC10649的孢子數(shù)大于5X108CFU。培養(yǎng)沼澤紅假單胞菌(i^oJo;^eM^mo"asACCC10649的培養(yǎng)基的組成為蛋白胨3.0g/L，酵母膏3.0g/L，硫酸銨0.5g/L，氯化鈣0.3g/L，其余為水。6將細(xì)黃鏈霉菌0^印tom少c"m/crcj/7amy)ACCC40027按10%的體積比接種于pH7.2-7.4的如下培養(yǎng)基中，28-30'C振蕩培養(yǎng)72-96小時(shí)，搖床轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)/分鐘，得到發(fā)酵液。培養(yǎng)細(xì)黃鏈霉菌CS^印to/^c^ym/crq/7m^y)ACCC40027的培養(yǎng)基的組成為KN03lg/L，可溶性淀粉20.0g/L，K2HP040.5g/L，MgS04'7H200.5g/L，NaCl0.5g/L，F(xiàn)eSO4'7H2O0.01g/L，其余為水。2、菌種的培養(yǎng)將上述步驟1的枯草芽孢桿菌(5ac/〃wwW/^)ACCC11089按10%的體積比接種于葡萄糖終濃度為20g/L的pH7.4的PD培養(yǎng)基中，3(TC振蕩培養(yǎng)48-72小時(shí)，搖床轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)/分鐘，得到發(fā)酵液。將上述步驟1的釀酒酵母OSflcc/zaTOmycesce"w;y/ae)ACCC20063和米曲霉(As/^g/〃wo^zae)ACCC30155分別按10%的體積比接種于自然pH的PD培養(yǎng)基中，3(TC振蕩培養(yǎng)48-72小時(shí)，搖床轉(zhuǎn)速140轉(zhuǎn)/分鐘，得到發(fā)酵液。將上述步驟1的沼澤紅假單胞菌CR/wdo戸ez^amomw;a/wWnX)ACCC10649按100/o的體積比接種于pH6.8-7.0的如下培養(yǎng)基中，30-32°C、光照強(qiáng)度為800-1000LX條件下培養(yǎng)3-5天，得到發(fā)酵液。此時(shí)發(fā)酵液變紅，每毫升發(fā)酵液中含有沼澤紅假單胞菌大于5X1()8CFU。培養(yǎng)沼澤紅假單胞菌CR/w^o;wew^m卵w;fl/w^s)ACCC10649的培養(yǎng)基的組成為蛋白胨3.0g/L，酵母粉3.0g/L，硫酸錳0.5g/L，氯化鈣0.3g/L，其余為水。將上述步驟1的細(xì)黃鏈霉菌0^eptom^Mw/crq/7m^)ACCC4OO27按10%的體積比接種于pH7.2-7.4的如下培養(yǎng)基中，28-30'C振蕩培養(yǎng)72-96小時(shí)，搖床轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)/分鐘，得到發(fā)酵液。培養(yǎng)細(xì)黃鏈霉菌(&r印towycesm/cTO/7avw力ACCC40027的培養(yǎng)基的組成為KN03lg/L，可溶性淀粉20.0g/L，K2HP040.5g/L，MgS04'7H200.5g/L，NaCl0.5g/L，F(xiàn)eSO4'7H2O0.01g/L，其余為水。3、微生物復(fù)合菌劑的制備將上述枯草芽孢桿菌(5ac/〃w5w6"to)ACCC11089、細(xì)黃鏈霉菌(&reptomyce5w/croy7m^力ACCC40027、釀酒酵母(&7cc/wra附;^ejcerew'j/oe)ACCC20063、米曲霉(^5perg77/船ACCC30155禾口沼澤紅假單胞菌(iAot/o/wewcfe"o朋s/a/w"n力ACCC10649的發(fā)酵液按照一定體積比混合，使混合液中枯草芽孢桿菌(5a"7/wswZ"7&)ACCC11089、細(xì)黃鏈霉菌(S的W0m3;cMm/crq/Zav^)ACCC40027、釀酒酵母(iSacc/wro，c&scerev/w'ae)ACCC20063、米曲霉(y4，rg〃/wo，—ACCC30155和沼澤紅假單胞菌(i/zocfo;wewc/a"owwACCC10649的集落形成單位數(shù)目比為(4-6):(2-4):(4-6):(5-6):(4-5);然后按照每(lX108-2X108)CFU孢子的量加入lg吸附載體-麥麩，得到微生物復(fù)合菌劑。實(shí)施例2、利用微生物復(fù)合菌劑制備秸稈有機(jī)肥料并促進(jìn)水稻增產(chǎn)試驗(yàn)2007年，在安徽省繁昌縣利用上述實(shí)施例1制備的微生物復(fù)合菌劑制備秸稈有機(jī)肥料并促進(jìn)水稻增產(chǎn)的試驗(yàn)。該縣的水稻田普遍為中低產(chǎn)田，歷年施用化肥使土壤有機(jī)質(zhì)含量連年降低，影響水稻產(chǎn)量和質(zhì)量。選用地力均勻、肥力中等，前茬作物為水稻，種植制度為"水稻一水稻"的地塊作為實(shí)驗(yàn)田，水稻品種為II優(yōu)129。試驗(yàn)采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，分為3個(gè)處理，分別為秸稈+菌劑組、秸稈組和對(duì)照組；每個(gè)處理設(shè)3個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)面積O.l畝。各處理組除施肥不同外，其他田間管理均相同。水稻收割后將秸稈鋪放于試驗(yàn)田中，秸稈+菌劑組每畝試驗(yàn)田施用2kg上述實(shí)施例l制備的微生物復(fù)合菌劑和3kg尿素，秸稈組每畝試驗(yàn)田施用3kg尿素，對(duì)照組則不用微生物復(fù)合菌劑和尿素。然后灌水浸田，水深7-10厘米。不同時(shí)間點(diǎn)觀察秸稈的腐熟情況，從水色、稈色、手感、拉力和氣味等方面比較秸稈+菌劑組和秸稈組的秸稈腐解變化情況，結(jié)果如表l所示。表l不同處理的秸稈腐熟情況<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>結(jié)果表明，兩周后經(jīng)上述實(shí)施例1的菌劑處理的秸稈腐解較明顯，且腐解速度較快。上述各處理組的試驗(yàn)田再每畝施用35kg碳酸銨、25kg普鈣和7.5kg氯化鉀作為追肥，追肥施用兩周后種植下茬水稻，記錄水稻的生長(zhǎng)狀況，比較產(chǎn)量。各處理組水稻的生長(zhǎng)狀況和產(chǎn)量如表2所示。表2各處理組水稻的生長(zhǎng)狀況及產(chǎn)量<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由表2可以看出，秸稈還田對(duì)水稻生長(zhǎng)具有很大的促進(jìn)作用，可以增加水稻的產(chǎn)量；上述實(shí)施例1制備的微生物復(fù)合菌劑能夠加速稻稈腐解，因而可以改變土壤中各種養(yǎng)分的狀況，施用上述實(shí)施例1制備的微生物復(fù)合菌劑對(duì)水稻的促生長(zhǎng)和增產(chǎn)作用更加明顯；同時(shí)還處理了大量的剩余秸稈，因此，上述實(shí)施例1制備的微生物復(fù)合菌劑特別適用于雙夏時(shí)間短、季節(jié)緊的地區(qū)使用。權(quán)利要求1、一種微生物復(fù)合菌劑，它的活性成分包括芽孢桿菌、土壤放線(xiàn)菌、酵母菌、霉菌和光合菌。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌劑，其特征在于所述芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌(5ac/〃wssw6"7&)，所述土壤方文線(xiàn)菌為細(xì)黃鏈霉菌(5^epto附j(luò);ce51m/croy7avws)，所述酵母菌為釀酒酵母C9flcc/wrom;/c^scewv/Wae)，所述霉菌為米曲霉C4，rg/〃wso，ae)，所述光合菌為沼澤紅假單胞菌(朋octo;wew(ifl7wo"(xy;a/組Wj0。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的菌劑，其特征在于所述枯草芽孢桿菌(^^7/^sm6"/W、細(xì)黃鏈霉菌(iS^e/tom_ycesm/cray/avz^)、酉良酒酵母(5"accAflramyc^、米曲霉C4，rgf〃wso，cre)禾口沼澤紅假單胞菌(7/zodo/wewc鍾o"ay戸/"欲/j)的集落形成單位數(shù)目比為(2-8):(1-6):(2-8):(4-7):(2-5)，優(yōu)選為(4-6》(2陽(yáng)4):(4-6):(5-6):(4-5)。4、根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述的菌劑，其特征在于所述枯草芽孢桿菌(5ac〃/wsw6"7/s)為枯草芽孢桿菌CSac〃/ws^^//^)ACCC11089;所述細(xì)黃鏈霉菌(Sfreptomycesm〖cro/7avi^)為細(xì)黃專(zhuān)連霉菌(Sf;-epto附y(tǒng)ce51m/crq/7avus)ACCC40027;所述酉良酒酵母OSacc/wrom少cescerev/s/ae)為酉良酒酵母(Sacc/zarow[ycescerev/s/ae)ACCC20063;所述米曲霉0^/^^7/附oryzae)為米曲霉0^;erg/〃1^07zae)ACCC30155;所述沼澤紅假單胞菌(i/20i/o/wewc/flwomw;a/wWW"為沼澤紅假單胞菌(i/ofifc;/weMt/謹(jǐn)o"aw/a/wW一ACCC10649。5、根據(jù)權(quán)利要求l-4中任一所述的菌劑，其特征在于所述菌劑中包括吸附載體，所述菌劑中活性成分和所述吸附載體的配比為(1X108-2X108)CFU孢子lg吸附載體。6、根據(jù)權(quán)利要求l-5中任一所述的菌劑，其特征在于所述菌劑中，所述枯草芽孢桿菌C5flc/〃"ss"6"7&)、細(xì)黃鏈霉菌CS^e戶(hù)to/wyc"附/cray7avuy)、釀酒酵母(iSacc/w^omycescerev/s/ae)、米曲霉0^;erg/〃wj1w7zae)禾口沼澤紅假單胞菌(i/zoctoj!weMt/awowas/w/wWn's)分另U3蟲(chóng)立包裝。7、根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一所述的菌劑，其特征在于所述菌劑中，所述枯草芽孢桿菌(5a"7/wsw6"7&)、細(xì)黃鏈霉菌(5^eptomyc^m/crq/7avw力、酉良酒酵母(5"cc/"ra輝cey、米曲霉(jj/erg〃/wo，"e)禾口沼澤紅假單胞菌(7/zocto/weMt/，o"ay/7fl/w敗/S)混合在一起。8、權(quán)利要求1-7中任一所述的菌劑在制備秸稈有機(jī)肥料中的應(yīng)用。9、一種制備秸稈有機(jī)肥料的方法，是用權(quán)利要求1-7中任一所述的菌劑發(fā)酵秸稈，得到有機(jī)肥料。10、由權(quán)利要求9所述的方法制備的秸稈有機(jī)肥料。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種微生物復(fù)合菌劑，它的菌種組成包括芽孢桿菌、土壤放線(xiàn)菌、酵母菌、霉菌和光合菌。采用本發(fā)明的菌劑進(jìn)行秸稈發(fā)酵，結(jié)果表明，本發(fā)明的菌劑可以使秸稈迅速腐解，轉(zhuǎn)化成植物生長(zhǎng)所需的有機(jī)肥料，從而增加土壤腐殖質(zhì)的含量，提高土壤中微生物的含量和微量元素的含量，進(jìn)而達(dá)到改善土壤理化性質(zhì)、增加土壤保水、保肥的能力，還可以提高土壤通透性，抑制作物病蟲(chóng)害的發(fā)生，提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)。本發(fā)明的菌劑使用方便、成本低、效果明顯。文檔編號(hào)C12R1/465GK101497870SQ20091007871公開(kāi)日2009年8月5日申請(qǐng)日期2009年3月2日優(yōu)先權(quán)日2009年3月2日發(fā)明者寧國(guó)贊,宙禹,蔣金鵬,趙海艷申請(qǐng)人:北京市京圃園生物工程有限公司