專利名稱：醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水糞大腸菌群快檢紙片的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水糞大腸菌群快檢紙片，是一種專門用于醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水的消毒效果，快速檢測指示菌一糞大腸菌群的鑒定試劑。其主要成分是蛋白胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀、乳糖、瓊脂糖、靛基質(zhì)、硫代硫酸鈉、1.6％溴甲酚紫溶液、4％TTC溶液、蒸餾水按比例混合后經(jīng)滅菌浸漬于中速定性濾紙上烘干，包裝于印有污水中糞大腸菌群最大可能數(shù)(MPN)檢索表(污水樣品接種量為5份1ml水樣，5份0.1ml水樣和5份0.01ml水樣)的外包裝袋內(nèi)，封口后放冰箱保存?zhèn)溆?。污水糞大腸菌群快檢紙片可用于醫(yī)療、衛(wèi)生、防疫、科研、教學(xué)、環(huán)保、食品、海洋生物、畜牧、水產(chǎn)、生物工程、檢疫、等各個(gè)領(lǐng)域的污水消毒效果的鑒定試劑，已有糞大腸菌群試劑很多，性能單一；需要特殊培養(yǎng)條件；成本及價(jià)格高；操作方法復(fù)雜，檢測步驟達(dá)不到快速一步法，檢測時(shí)間長；敏感性差、特異性弱、準(zhǔn)確性低；糞大腸菌群的檢測結(jié)果無法定量分析；不含有中和劑，在檢測中易受干擾因素影響等缺點(diǎn)。因此，各行業(yè)一直希望能有一種能克服已有產(chǎn)品不足的糞大腸菌群快檢紙片。
背景技術(shù)：
糞大腸菌群是人類糞便中的主要細(xì)菌，具有作為指示菌的一般特性，因而被用來作為反映污水中有否糞便污染的指示菌。糞大腸菌群數(shù)的高低，表明了糞便污染的程度，也反映了對(duì)人體健康危害性的大小。目前糞大腸菌群作為評(píng)價(jià)污水衛(wèi)生質(zhì)量的主要指標(biāo)之一，已被國內(nèi)外廣泛應(yīng)用。本發(fā)明的目的在于提供一種能克服已有產(chǎn)品不足的專用于監(jiān)督醫(yī)院污水的消毒效果，快速檢測糞大腸菌群的鑒定試劑。具有可適合于各種場合污水的糞大腸菌群的培養(yǎng)檢測；不需要特殊培養(yǎng)條件；成本及價(jià)格低；操作方法簡便易行，檢測步驟達(dá)到快速一步法，檢測時(shí)間短；敏感性好、特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確性高；包裝袋表面印有污水中糞大腸菌群最大可能數(shù)(MPN)檢索表，糞大腸菌群的檢測結(jié)果可直接在包裝袋檢索，進(jìn)行定量分析；含有中和劑，在檢測中不易受干擾因素影響等特點(diǎn)的糞大腸菌群的鑒定試劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的要點(diǎn)在于選擇合適的組分，并進(jìn)行合理混配，經(jīng)一系列現(xiàn)代生物技術(shù)溶解、校正PH、高溫滅菌、冷卻、加指示劑、浸漬紙片、恒溫烘干、無菌包裝等工藝而成一種專業(yè)的糞大腸菌群快檢紙片。
本發(fā)明選擇的配方如下(組分及其重量百分比％)蛋白胨(0.8-1.5)；氯化鈉(0.4-0.6)；靛基質(zhì)(0.05-015)；磷酸氫二鉀(0.3-0.5)；乳糖(1.2-1.7)；瓊脂糖(0.08-0.12)；硫代硫酸鈉(0.3-0.5)；1.6％溴甲酚紫溶液(0.4-0.8)；4％TTC溶液(2.3-2.8)；蒸餾水加至100。蛋白胨作為主要的組分，該組分為細(xì)菌的氮源，為培養(yǎng)糞大腸菌群提供其生長所需要的營養(yǎng)和能量；氯化鈉作為主要的組分，該組分為無機(jī)鹽，為培養(yǎng)糞大腸菌群提供其生長所需要的滲透壓；靛基質(zhì)作為主要的組分，該組分為鑒別劑，用于區(qū)別培養(yǎng)糞大腸菌群和大腸桿菌；磷酸氫二鉀作為主要的組分，該組分為緩沖劑，為培養(yǎng)糞大腸菌群提供其生長所需要一定的氫離子濃度，以保持較穩(wěn)定的pH環(huán)境；乳糖作為主要的組分，該組分為細(xì)菌的碳源，為培養(yǎng)糞大腸菌群提供其生長所需要的新陳代謝的能源，同時(shí)糞大腸菌群能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣；瓊脂糖作為主要的組分，該組分為培養(yǎng)基的賦形劑，溶解冷卻后可將培養(yǎng)基中的有效成分凝固并掛載于紙片上；硫代硫酸鈉作為主要的組分，該組分為中和劑，其作用是中和祛除污水采樣液殘留的干擾因素；1.6％溴甲酚紫溶液、4％TTC溶液為指示劑，利用糞大腸菌群能分解乳糖產(chǎn)酸使指示劑顏色變化來鑒別糞大腸菌群是否生存，從而推導(dǎo)污水的消毒效果。
本發(fā)明產(chǎn)品的制備方法1)切紙將新華中速定性濾紙，切成10×12厘米，疊成5×6厘米大小的雙層紙片十五份，經(jīng)干烤或高壓滅菌(高壓后于37℃溫箱烘干)后備用；2)滅菌將耐高溫的聚丙塑料薄膜袋，可按實(shí)驗(yàn)要求壓合成一定規(guī)格的袋，100℃15分滅菌后備用；3)制備培養(yǎng)基將蛋白胨、氯化鈉、靛基質(zhì)、磷酸氫二鉀、乳糖、瓊脂糖、硫代硫酸鈉、蒸餾水按比例混合加熱溶解，冷后調(diào)pH7.0-7.2，再按量加入1.6％溴甲酚紫溶液，混勻100℃15分滅菌，冷至60℃左右按量 加入4％TTC溶液，混勻；4)浸漬紙片用無菌鑷子將紙片排放于消毒的大搪瓷盤內(nèi)，放40℃左右恒溫室或37℃溫箱烘干；5)包裝將溫箱烘干的浸漬紙片，無菌操作裝入消毒的塑料袋內(nèi)，再裝入包裝袋表面印有污水中糞大腸菌群最大可能數(shù)(MPN)檢索表(污水樣品接種量為5份1ml水樣，5份0.1ml水樣和5份0.01ml水樣)的外包裝袋內(nèi)，封口后放冰箱保存?zhèn)溆谩?br> 本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)1).糞大腸菌群快檢紙片適合于醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水糞大腸菌群的培養(yǎng)檢測。2).不需特殊培養(yǎng)條件。3).成本及價(jià)格低廉。4).操作方法簡便易行，檢測步驟達(dá)到快速一步法，檢測時(shí)間比生物生化鑒定法縮短了四天，使高深的生物培養(yǎng)技術(shù)簡化到一般人員都能掌握操作。5).產(chǎn)品的敏感性好、特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確性高。6).紙片有一定的規(guī)格，包裝袋表面印有污水中糞大腸菌群最大可能數(shù)(MPN)檢索表，糞大腸菌群的檢測結(jié)果可直接在包裝袋檢索，使糞大腸菌群的檢測達(dá)到快速準(zhǔn)確定量分析。7).糞大腸菌群快檢紙片含有中和劑，在檢測中不受干擾因素影響。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明按照下表所列數(shù)據(jù)(重量百分比％)及其所述步驟進(jìn)行配置配方一優(yōu)質(zhì)蛋白胨 (0.8-1.5)氯化鈉 (0.4-0.6)靛基質(zhì) (0.05-015)磷酸氫二鉀 (0.3-0.5)乳糖(1.2-1.7)瓊脂糖 (0.08-0.12)硫代硫酸鈉 (0.3-0.5)1.6％溴甲酚紫溶液 (0.4-0.8)4％TTC溶液 (2.3-2.8)蒸餾水 加至100
配方二
氯化鈉 (0.5-0.6)靛基質(zhì) (0.10-013)磷酸氫二鉀 (0.4-0.5)乳糖(1.4-1.7)瓊脂糖 (0.08-0.1)硫代硫酸鈉 (0.31-0.5)1.6％溴甲酚紫溶液 (0.4-0.7)4％TTC溶液 (2.3-2.8)蒸餾水 加至100
配方三優(yōu)質(zhì)蛋白胨 (1.1-1.4)氯化鈉 (0.5-0.6)靛基質(zhì) (0.11-013)磷酸氫二鉀 (0.35-0.5)乳糖 (1.3-1.7)瓊脂糖 (0.07-0.1)硫代硫酸鈉 (0.35-0.5)1.6％溴甲酚紫溶液 (0.5-0.7)4％TTC溶液 (2.3-2.7)蒸餾水 加至100
配方四優(yōu)質(zhì)蛋白胨 (0.9-1.3)氯化鈉 (0.5-0.6)靛基質(zhì) (0.07-013)磷酸氫二鉀 (0.4-0.5)乳糖 (1.2-1.6)瓊脂糖 (0.08-0.1)硫代硫酸鈉 (0.4-0.5)1.6％溴甲酚紫溶液 (0.4-0.7)4％TTC溶液 (2.2-2.8)蒸餾水 加至 100
包裝袋表面印有污水中糞大腸菌群最大可能數(shù)(MPN)檢索表，糞大腸菌群的檢測結(jié)果可直接在包裝袋檢索，使糞大腸菌群的檢測達(dá)到快速準(zhǔn)確定量分析污水中糞大腸菌群最大可能數(shù)(MPN)檢索表(污水樣品接種量為5份1ml水樣，5份0.1ml水樣和5份0.01ml水樣)


權(quán)利要求
1.一種醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水糞大腸菌群快檢紙片，是以乳糖靛基質(zhì)培養(yǎng)基為基礎(chǔ)液，硫代硫酸鈉為中和劑，溴甲酚紫、TTC為指示劑，新華中速定性濾紙為載體，經(jīng)一系列現(xiàn)代生物技術(shù)溶解、校正PH、高溫滅菌、冷卻、加指示劑、浸漬紙片、恒溫烘干、無菌包裝等工藝而成一種專業(yè)的糞大腸桿菌中和快檢紙片；其特征在于具有如下配方(組分及其重量百分比％)蛋白胨(0.8-1.5)；氯化鈉(0.4-0.6)；靛基質(zhì)(0.05-015)；磷酸氫二鉀(0.3-0.5)；乳糖(1.2-1.7)；瓊脂糖(0.08-0.12)；硫代硫酸鈉(0.3-0.5)；1.6％溴甲酚紫溶液(0.4-0.8)；4％TTC溶液(2.3-2.8)；蒸餾水加至100。
2.一種權(quán)利要求1所述醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水糞大腸菌群的制備方法，其特征在于具有如下的步驟1)切紙將新華中速定性濾紙，切成10×12厘米，疊成5×6厘米大小的雙層紙片十五份，經(jīng)干烤或高壓滅菌(高壓后于37℃溫箱烘干)后備用；2)滅菌將耐高溫的聚丙塑料薄膜袋，可按實(shí)驗(yàn)要求壓合成一定規(guī)格的袋，100℃15分滅菌后備用；3)制備培養(yǎng)基將蛋白胨、氯化鈉、靛基質(zhì)、磷酸氫二鉀、乳糖、瓊脂糖、硫代硫酸鈉、蒸餾水按比例混合加熱溶解，冷后調(diào)pH7.0-7.2，再按量加入1.6％溴甲酚紫溶液，混勻100℃15分滅菌，冷至60℃左右按量 加入4％TTC溶液，混勻；4)浸漬紙片用無菌鑷子將紙片排放于消毒的大搪瓷盤內(nèi)，放40℃左右恒溫室或37℃溫箱烘干；5)包裝將溫箱烘干的浸漬紙片，無菌操作裝入消毒的塑料袋內(nèi)，再裝入包裝袋表面印有污水中糞大腸菌群最大可能數(shù)(MPN)檢索表(污水樣品接種量為5份1ml水樣，5份0.1ml水樣和5份0.01ml水樣)的外包裝袋內(nèi)，封口后放冰箱保存?zhèn)溆谩?br> 全文摘要
本發(fā)明涉及一種醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水糞大腸菌群快檢紙片，是一種專門用于醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水的消毒效果，快速檢測指示菌—糞大腸菌群的鑒定試劑。其主要成分是蛋白胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀、乳糖、瓊脂糖、靛基質(zhì)、硫代硫酸鈉、1.6％溴甲酚紫溶液、4％TTC溶液、蒸餾水按比例混合后經(jīng)滅菌浸漬于中速定性濾紙上烘干，包裝于印有污水中糞大腸菌群最大可能數(shù)(MPN)檢索表(污水樣品接種量為5份1ml水樣，5份0.1ml水樣和5份0.01ml水樣)的外包裝袋內(nèi)，封口后放冰箱保存?zhèn)溆谩１景l(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)1.糞大腸菌群快檢紙片適合于醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水糞大腸菌群的培養(yǎng)檢測。2.不需特殊培養(yǎng)條件。3.成本及價(jià)格低廉。4.操作方法簡便易行，檢測步驟達(dá)到快速一步法，檢測時(shí)間比生物生化鑒定法縮短了四天，使高深的生物培養(yǎng)技術(shù)簡化到一般人員都能掌握操作。5.產(chǎn)品的敏感性好、特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確性高。6.紙片有一定的規(guī)格，包裝袋表面印有污水中糞大腸菌群最大可能數(shù)(MPN)檢索表，糞大腸菌群的檢測結(jié)果可直接在包裝袋檢索，使糞大腸菌群的檢測達(dá)到快速準(zhǔn)確定量分析。7.糞大腸菌群快檢紙片含有中和劑，在檢測中不受干擾因素影響。
文檔編號(hào)C12Q1/10GK101089193SQ200610044848
公開日2007年12月19日 申請日期2006年6月16日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月16日
發(fā)明者權(quán)力敏, 曲奕 申請人:權(quán)力敏, 曲奕