一種促進蟲黃藻有效植入硨磲貝人工繁育苗種的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種促進蟲黃藻有效植入硨磲貝人工繁育苗種的方法。本發(fā)明將蟲黃藻與餌料一起投喂，時間上從開始攝食之日起到完全變態(tài)并成功形成共生關(guān)系止，避免了傳統(tǒng)方法采用高濃度蟲黃藻抽提液形成的對幼體高強度脅迫產(chǎn)生劇烈應急反應；同時，通過與餌料一起投喂(自3日齡后)，極大增加了幼蟲接觸并獲得蟲黃藻的機會，部分還原了自然海區(qū)硨磲幼蟲捕獲蟲黃藻并成功與之共生的生境條件，大大提高硨磲幼蟲到稚貝的變態(tài)效率。
【專利說明】
_種促進蟲黃藻有效植入碎碟貝人工繁育苗種的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于海洋水產(chǎn)行業(yè)中硨磲貝類繁育、生態(tài)資源恢復領(lǐng)域，具體涉及一種促 進蟲黃藻有效植入硨磲貝人工繁育苗種的方法。
【背景技術(shù)】：
[0002] 硨磲貝，是一種重要海洋經(jīng)濟貝類，其肉鮮甜脆爽、有報道具備滋陰催陽功效，同 時，其貝殼可雕刻加工成極具價值的工藝品。我國南海曾經(jīng)有大量分布，有數(shù)據(jù)表明，我國 南海主要分布有長硨磲、番紅硨磲、鱗硨磲、硨蠔等種類。目前庫式硨磲在我國已近絕跡，其 它硨磲種類也面臨盜采盜挖以及生態(tài)環(huán)境變化等不利局面，當前國際（美國華盛頓公約）規(guī) 定了系列硨磲種類野生個體為禁止采賣種類，我國將庫式硨磲列為國家一級保護動物，無 磷硨磲列為二級保護動物。因此開展硨磲貝類的人工繁育技術(shù)對于恢復我國南海資源，保 護南海生態(tài)環(huán)境具有十分重要的意義，而蟲黃藻與硨磲苗成功形成共生關(guān)系，構(gòu)成了硨磲 苗種繁育成敗的關(guān)鍵因素。
[0003] 硨磲的人工繁育在新加坡、澳大利亞以及菲律賓等國家早在20世紀80年代就做了 大量工作，并就某些種類成功培育出了硨磲稚貝，但人工繁育技術(shù)依然不成熟，表現(xiàn)在繁育 成功率低，繁育效率不高，無法形成穩(wěn)定的繁育技術(shù)體系，嚴重制約了硨磲產(chǎn)業(yè)化苗種生產(chǎn) 和人工協(xié)助硨磲資源恢復的進程。其中重要原因之一是硨磲人工繁育幼體與蟲黃藻形成共 生的效率較低，致使硨磲人工繁育的稚貝變態(tài)率太低。因此需要對傳統(tǒng)上采用蟲黃藻溶液 浸泡幼蟲的方法重新審視。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0004] 本發(fā)明的目的是提供是提供一種大大提高硨磲幼蟲到稚貝的變態(tài)效率的促進蟲 黃藻有效植入硨磲貝人工繁育苗種的方法。
[0005] 本發(fā)明方法是與植入蟲黃藻的傳統(tǒng)方法完全不同，最大區(qū)別是本方法將蟲黃藻與 重要餌料一起投喂，時間上從開始攝食之日起到完全變態(tài)并成功形成共生關(guān)系止，避免了 傳統(tǒng)方法采用高濃度蟲黃藻抽提液形成的對幼體高強度脅迫產(chǎn)生劇烈應急反應；同時，通 過與餌料一起投喂（自3日齡后），極大增加了幼蟲接觸并獲得蟲黃藻的機會，部分還原了自 然海區(qū)硨磲幼蟲捕獲蟲黃藻并成功與之共生的生境條件，大大提高硨磲幼蟲到稚貝的變態(tài) 效率，實現(xiàn)了本發(fā)明的目的。
[0006] 本發(fā)明的促進蟲黃藻有效植入硨磲貝人工繁育苗種的方法，其特征在于，包括以 下步驟：
[0007] 收集蟲黃藻，將蟲黃藻與金藻混勻一起投喂，投放于多3日齡的、在苗種培養(yǎng)池中 的硨磲貝幼蟲，蟲黃藻濃度控制在〇. 5-1.5ppm，投喂頻率1次/天，直到完全變態(tài)為稚貝，停 止投喂；
[0008] 自硨磲貝幼蟲發(fā)育到第三天后，往苗種培養(yǎng)池的水體中添加0.4ppm氯化銨和 0.5ppm硝酸鈉，自8日齡后，往苗種培養(yǎng)池的水體中添加 lppm氯化銨和lppm硝酸鈉。
[0009] 所述的收集蟲黃藻是從硨磲貝外套膜上剝離下來蟲黃藻溶液，通過10微米過濾網(wǎng) 過濾，然后再對濾液離心，去除上清液，收集沉降下來的高純度蟲黃藻。
[0010] 所述的收集蟲黃藻優(yōu)選步驟為：將硨磲外套膜從活體硨磲新鮮剪下，制成3-5mm 寬，10-20mm長的外套膜條;將外套膜條與粒徑0.5-1.0mm的海砂混合，連同適量海水裝入勻 漿機勻漿，勻漿后倒出，先用100目過濾網(wǎng)濾出較大組織塊，再用10微米過濾網(wǎng)濾出小的組 織塊，濾液經(jīng)3000rpm離心，獲得沉降下來的正常、健康的蟲黃藻藻體。
[0011] 所述將蟲黃藻與金藻混勻一起投喂，其投喂方式為:3-5日齡，投喂蟲黃藻0.5ppm+ 金藻2000cell/ml ;6-9日齡投喂蟲黃藻lppm+金藻5000cell/ml; 10-15日齡(變成稚貝）投喂 蟲黃藻1.5ppm+金藻8000cell/ml，以上投喂頻次1次/天。
[0012]所述的自硨磲貝幼蟲發(fā)育到第三天后，往苗種培養(yǎng)池的水體中添加〇. 4PPm氯化銨 和0.5ppm硝酸鈉，其頻率為1次/兩天，培養(yǎng)池每天換水1/2，自然光照，上午9點前打開培養(yǎng) 池上方的遮光網(wǎng)，其余時間需要遮光網(wǎng)遮光至光照強度3001ux左右，8日齡后往苗種培養(yǎng)池 的水體中添加 lppm氯化銨+lppm硝酸鈉，其頻率為1次/兩天，培養(yǎng)池每天換水1/2,光照增加 至Ij100 0-30001ux，稚貝規(guī)格l-2mm時，增加光照30001ux以上，但依然避免正午陽光直射。
[0013] 本發(fā)明將蟲黃藻與餌料一起投喂，時間上從開始攝食之日起到完全變態(tài)并成功形 成共生關(guān)系止，避免了傳統(tǒng)方法采用高濃度蟲黃藻抽提液形成的對幼體高強度脅迫產(chǎn)生劇 烈應急反應；同時，通過與餌料一起投喂（自3日齡后），極大增加了幼蟲接觸并獲得蟲黃藻 的機會，部分還原了自然海區(qū)硨磲幼蟲捕獲蟲黃藻并成功與之共生的生境條件，大大提高 硨磲幼蟲到稚貝的變態(tài)效率。
【具體實施方式】：
[0014] 以下實施例是對本發(fā)明的進一步說明，而不是對本發(fā)明的限制。
[0015] 實施例1:長硨磲幼蟲與蟲黃藻共生：
[0016] 2016年初，我們于中國科學院海南三亞綜合試驗站開展了長硨磲（Tridacna maxima)全人工育苗技術(shù)研究，人工催產(chǎn)方法催產(chǎn)硨磲貝4個，分別獲得精卵后，交叉受精受 精率達到95%，人工孵化48小時后，開始投喂金藻和蟲黃藻混合液。所有培養(yǎng)過程均在 1.5m3的玻璃鋼池，共4個玻璃鋼池，具體操作如下：
[0017] 1)將長硨磲外套膜組織從活體長硨磲剪下，獲得長約10-20mm，寬2-4mm的外套膜 條，與事先準備好的干凈海砂(粒徑:〇. 5-1.0mm)混合，連同適量海水裝入簡易勻漿機勻漿 約1分鐘，然后倒出，先100目（150微米)過濾網(wǎng)濾出較大組織塊，再用10微米過濾網(wǎng)濾出小 的組織塊，最后將濾液裝上離心機，3000rpm離心1分鐘，去除上清液，獲得與組織液分離的 蟲黃藻藻體(沉淀）。
[0018] 2)蟲黃藻與湛江等鞭金藻的混合投喂：在養(yǎng)殖長硨磲幼蟲的苗種培養(yǎng)池進入投 喂，長硨磲幼蟲3-5日齡，投喂0.5ppm(蟲黃藻)+2000cell/ml(金藻）；長硨磲幼蟲6-9日齡投 喂lppm(蟲黃藻)+5000cell/ml (金藻）；長硨磲幼蟲10-15日齡(變成稚貝）投喂1.5ppm(蟲黃 藻)+8000cell/ml(金藻），以上投喂頻次1次/天；
[0019] 3)自幼蟲發(fā)育到第三天后，往苗種培養(yǎng)池的水體中添加0.4ppm氯化銨(終濃度)和 0.5ppm硝酸鈉(終濃度）：培養(yǎng)池每天換水1/2，自然光照，上午9點前打開培養(yǎng)池或缸上方的 遮光網(wǎng)，其余時間用致密遮光網(wǎng)遮光使其光強為3001ux左右;8日齡后往苗種培養(yǎng)池的水體 中添加 lppm氯化銨(終濃度)和lppm硝酸鈉(終濃度），其頻率為1次/兩天，培養(yǎng)池每天換水 1/2,光照增加到1000-30001ux;稚貝規(guī)格l-2mm時，增加光照30001ux以上，但依然避免正午 陽光直射。
[0020] 試驗結(jié)果如表1所示：
[0021] 表1
[0022]
[0023] 最后獲得了最后2.5萬個變態(tài)成功的稚貝。
[0024] 實施例2鱗硨磲幼蟲與蟲黃藻共生：
[0025] 2016年初，開展了鱗硨磲(Tridacna squamosa)的人工繁育工作。人工催產(chǎn)方法催 產(chǎn)鱗硨磲貝4個，分別獲得精卵后，交叉受精受精率達到95 %，人工孵化48小時后，開始投喂 金藻和蟲黃藻混合液。所有培養(yǎng)過程均在1.5m3的玻璃鋼池，共4個玻璃鋼池，具體操作如 下：
[0026] 1)剪取鱗硨磲外套膜組織，獲得長約10-20mm，寬2-4_的外套膜條，將外套膜條與 事先準備好的干凈海砂(粒徑:0.5-1.0mm)混合，連同適量海水裝入簡易勻漿機勻漿約1分 鐘，然后倒出，先100目（150微米)過濾網(wǎng)濾出較大組織塊，再用10微米過濾網(wǎng)濾出小的組織 塊;最后將蟲黃藻溶液(濾液)裝上離心機，3000rpm離心1分鐘，去除上清液，獲得與組織液 分離的蟲黃藻藻體。
[0027] 2)蟲黃藻與湛江等鞭金藻的混合投喂：在養(yǎng)殖鱗硨磲幼蟲的苗種培養(yǎng)池進入投 喂，鱗硨磲3-5日齡，投喂0.5ppm(蟲黃藻)+2000cell/ml(金藻）；鱗硨磲6-9日齡投喂lppm (蟲黃藻）+ 5000〇611/1111(金藻）；鱗硨磲10-15日齡（變成稚貝）投喂1.5。。111(蟲黃藻）+ 8000cell/ml(金藻），以上投喂頻次1次/天；
[0028] 3)自鱗硨磲幼蟲發(fā)育到第三天后，往玻璃鋼苗種培養(yǎng)池添加0.4ppm氯化銨(終濃 度)+0.5ppm硝酸鈉(終濃度），苗種培養(yǎng)池每天換水1/2,上午9點前打開培養(yǎng)池遮光網(wǎng)，其余 時間用致密遮光網(wǎng)遮光使其光強為3001ux左右;8日齡后往玻璃鋼苗種培養(yǎng)池添加 lppm氯 化銨(終濃度)+lppm硝酸鈉(終濃度），其頻率為1次/兩天，培養(yǎng)池每天換水1/2,光照增加到 1000-30001ux;稚貝規(guī)格l-2mm時，增加光照30001ux以上，但依然避免正午陽光直射。
[0029]試驗結(jié)果如表2所示：
[0030]表 2
[0031]
[0032] 獲得了最后2.5萬個變態(tài)成功的稚貝。
【主權(quán)項】
1. 一種促進蟲黃藻有效植入硨磲貝人工繁育苗種的方法，其特征在于，包括以下步驟： 收集蟲黃藻，將蟲黃藻與金藻混勻一起投喂，投放于多3日齡的、在苗種培養(yǎng)池中的硨 磲貝幼蟲，蟲黃藻濃度控制在0.5-1.5ppm，投喂頻率1次/天，直到完全變態(tài)為稚貝，停止投 喂； 自硨磲貝幼蟲發(fā)育到第三天后，往苗種培養(yǎng)池的水體中添加〇. 4ppm氯化銨和0.5ppm硝 酸鈉，自8日齡后，往苗種培養(yǎng)池的水體中添加 lppm氯化銨和lppm硝酸鈉。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進蟲黃藻有效植入硨磲貝人工繁育苗種的方法，其特征在 于，所述的收集蟲黃藻是從硨磲貝外套膜上剝離下來蟲黃藻溶液，通過10微米過濾網(wǎng)過濾， 然后再對濾液離心，去除上清液，收集沉降下來的蟲黃藻。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的促進蟲黃藻有效植入硨磲貝人工繁育苗種的方法，其特征在 于，所述的收集蟲黃藻為:將硨磲外套膜從活體硨磲新鮮剪下，制成3_5mm寬，10-20mm長的 外套膜條;將外套膜條與粒徑〇. 5-1.0mm的海砂混合，連同適量海水裝入勻漿機勻漿，勻漿 后倒出，先用100目過濾網(wǎng)濾出較大組織塊，再用10微米過濾網(wǎng)濾出小的組織塊，濾液經(jīng) 3000rpm離心，獲得沉降下來的正常、健康的蟲黃藻。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進蟲黃藻有效植入硨磲貝人工繁育苗種的方法，其特征在 于，所述將蟲黃藻與金藻混勻一起投喂，其投喂方式為:3-5日齡，投喂蟲黃藻0.5ppm+金藻 2000cell/ml ;6_9日齡投喂蟲黃藻lppm+金藻5000cell/ml; 10-15日齡投喂蟲黃藻1 · 5ppm+ 金藻8000cell/ml，以上投喂頻次1次/天。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進蟲黃藻有效植入硨磲貝人工繁育苗種的方法，其特征在 于，所述的自硨磲貝幼蟲發(fā)育到第三天后，往苗種培養(yǎng)池的水體中添加〇.4ppm氯化銨和 0.5ppm硝酸鈉，其頻率為1次/兩天，培養(yǎng)池每天換水1/2，自然光照，上午9點前打開培養(yǎng)池 上方的遮光網(wǎng)，其余時間需要遮光網(wǎng)遮光至光照強度3001ux，8日齡后往苗種培養(yǎng)池的水體 中添加 lppm氯化銨+lppm硝酸鈉，其頻率為1次/兩天，培養(yǎng)池每天換水1/2,光照增加到 1000-30001ux，稚貝規(guī)格l-2mm時，增加光照30001ux以上，但依然避免正午陽光直射。
【文檔編號】A01K61/00GK106035165SQ201610454182
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年6月20日
【發(fā)明人】肖述, 張躍環(huán), 喻子牛, 向志明, 馬海濤
【申請人】中國科學院南海海洋研究所