一種蘭屬雜交蘭的創(chuàng)制方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物育種領(lǐng)域，具體涉及一種蘭屬雜交蘭的創(chuàng)制方法。
【背景技術(shù)】
[0002]大花蕙蘭(CymbidiumHybrid)為蘭科蘭屬植物中部分大花型附生種的雜交種，大花蕙蘭的雜交育種已有一百多年的歷史了，它們的親本主要是大花型的熱帶附生蘭類，常常要經(jīng)過多次反復(fù)的雜交，才能形成有價(jià)值的品種，是世界上銷量最高的洋蘭之一。盡管大花蕙蘭花色鮮艷、花期長(zhǎng)，觀賞性極高，深受世界蘭花愛好者的歡迎，但由于大花蕙蘭多無香味，因此其觀賞性狀仍可以改進(jìn)。而蘭科蘭屬植物種類豐富，約有68-70余種。除熱帶附生種外，還具有大量的溫帶地生種，如傳統(tǒng)國(guó)蘭中的春蘭、蕙蘭、建蘭、墨蘭、蓮瓣蘭、寒蘭等，目前已有部分溫帶地生蘭與大花蕙蘭等材料雜交，培育出觀賞性介于大花蕙蘭和國(guó)蘭中間類型的雜交蘭，具有花色鮮艷，具香味等特征。
[0003]但目前所培育的雜交蘭品種多為大花蕙蘭與建蘭和墨蘭等雜交后選育的品種，而蕙蘭為溫帶地生蘭中的重要類型，具有優(yōu)良的觀賞性，香味濃郁，而由于與大花蕙蘭等品種花期時(shí)間不一致，目前尚無蕙蘭雜交蘭品種培育出。

【發(fā)明內(nèi)容】

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[0004]本發(fā)明的目的是提供一種蘭屬雜交蘭的創(chuàng)制方法，采用適當(dāng)技術(shù)控制大花蕙蘭開花與蕙蘭進(jìn)行雜交，培育新型雜交蘭品種，可以豐富蘭屬雜交蘭的品種類型，提高雜交蘭的觀賞性。
[0005]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0006]—種新型蘭屬雜交蘭的創(chuàng)建方法，包括親本大花蕙蘭、雜交蘭及蕙蘭材料的溫室培養(yǎng)及開花調(diào)控的步驟:
[0007]a)母本材料的培養(yǎng):以大花蕙蘭和雜交蘭品種為母本，生長(zhǎng)4-5年的成熟植株種植于溫室中，冬春季節(jié)控制營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)，控制N、P、K營(yíng)養(yǎng)水平，降低氮素，提高磷鉀肥濃度，前期適當(dāng)控制溫度，3-4月份提高溫度，控制其在春季開花；
[0008]b)父本材料的培養(yǎng):選擇多年生的蕙蘭為母本，通過N、P、K營(yíng)養(yǎng)及光照和溫度控制，促進(jìn)蕙蘭于3-4月份開花；
[0009]c)雜交授粉:從父本蕙蘭開花株上用鑷子分離花粉塊，母本大花蕙蘭或雜交蘭開花株上的單花開放后去掉花粉塊，授以父本蕙蘭的花粉塊，每朵花授以蕙蘭花粉塊4-6個(gè)，以確保授粉；
[0010]d)子房和種子發(fā)育:授粉后的大花蕙蘭一周后花瓣萎蔫，兩周后能觀察到子房明顯膨大，剪去干枯花瓣和萼片，防止細(xì)菌和真菌的滋生;生長(zhǎng)210-270天后，果莢變黃開裂前可以采收果莢。
[0011]所述親本大花蕙蘭、雜交蘭及蕙蘭材料的溫室培養(yǎng)及開花調(diào)控的步驟之后還包括雜交后代種子無菌播種的步驟:
[0012]e)無菌萌發(fā)培養(yǎng)基:以1/2MS或MS為基本培養(yǎng)基添加6-BA 0.5-2.0mg.L—1和NAA0.5-2.0mg.L—1 ；
[0013]f)無菌播種和萌發(fā):采收成熟果莢，自來水沖洗后，在超凈工作臺(tái)進(jìn)行表面滅菌處理，先用75%的乙醇處理I分鐘，再用I %的次氯酸鈉處理30-40分鐘，無菌水沖洗3-4次，在無菌濾紙上切開果莢，取出種子，播種于萌發(fā)培養(yǎng)基；
[0014]g)雜交后代植株再生:以MS為基本培養(yǎng)基添加NAA 0.5-1.0mg.L—1和1.0-2.0mg.L一1適宜原球莖發(fā)育和植株再生；
[0015]h)生根植株移栽:生根植株打開瓶口馴化3-5d，洗凈培養(yǎng)基后以800-1000倍的百菌清處理l_3h，采用水苔為基質(zhì)移栽于2.5寸營(yíng)養(yǎng)缽，移栽后控制溫室溫度在25°C，空氣相對(duì)濕度80 %，20天以后長(zhǎng)出新根成活，生長(zhǎng)6個(gè)月后植株進(jìn)一步移栽至較大營(yíng)養(yǎng)缽進(jìn)一步生長(zhǎng)。
[0016]所述步驟e)、步驟g)和步驟h)中的培養(yǎng)基中均分別添加3%的鹿糖和100-150ml.L一1椰子汁，活性炭1-2%，pH值調(diào)至5.4-5.6，培養(yǎng)條件為光照100lx，16h光周期，25°C培養(yǎng)。
[0017]本發(fā)明的有益效果是:
[0018]由于大花蕙蘭與蘭屬其他種材料雜交后代形成的種子發(fā)育不完全，無胚乳，常規(guī)情況下極難萌發(fā)，需要采用無菌播種技術(shù)才能萌發(fā)，加之種間遠(yuǎn)緣雜交后代生活力弱，因而后代萌發(fā)和繁殖困難，而無菌播種技術(shù)可以通過培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑促進(jìn)雜交后代種子發(fā)育和成熟萌發(fā)。萌發(fā)植株進(jìn)一步生長(zhǎng)和成苗后可以在后代群體中篩選出優(yōu)良株系，進(jìn)行大量繁殖和推廣應(yīng)用。
[0019]本發(fā)明方法是以蘭屬地生蘭中的蕙蘭為父本，通過與母本大花蕙蘭或雜交蘭雜交，雜交后代種子無菌播種，萌發(fā)成苗后在后代群體中篩選出具有蕙蘭和大花蕙蘭特征的新型蘭屬雜交蘭，蕙蘭雜交蘭可以將蕙蘭的香味濃、抗逆性強(qiáng)等性狀轉(zhuǎn)移到花色鮮艷，生長(zhǎng)速度快的大花蕙蘭和其他雜交蘭中。
[0020]本發(fā)明方法可以用于培育具有蕙蘭特征的優(yōu)良雜交蘭后代材料，與現(xiàn)有大花蕙蘭和其他墨蘭雜交蘭及建蘭雜交蘭等在形態(tài)特征和生長(zhǎng)特征及抗逆性等方面不同，具備蕙蘭的優(yōu)良性狀，可以豐富蘭屬雜交蘭的品種類型。
【具體實(shí)施方式】
[0021]下面對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述:
[0022]實(shí)施例1:
[0023]1.以雜交蘭‘韓國(guó)桃花’為母本，蕙蘭為父本進(jìn)行雜交，雜交后代無菌播種；
[0024]a.母本材料的培養(yǎng):選擇雜交蘭品種‘韓國(guó)桃花’為母本，生長(zhǎng)4-5年的成熟植株種植于溫室中，冬春季節(jié)控制營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)，采用低氮，高磷、鉀的花多多2號(hào)營(yíng)養(yǎng)液每周澆灌I次，前期適當(dāng)控制溫度，后期提高溫度，促使其3-4月份開花；
[0025]b.父本材料的培養(yǎng):選擇多年生的蕙蘭為母本，通過N、P、K營(yíng)養(yǎng)及光照和溫度控制，促進(jìn)蕙蘭于3-4月份開花；
[0026]c.雜交授粉:從父本蕙蘭開花株上用鑷子分離花粉快，母本雜交蘭開花株上的單花開放后去掉花粉塊，授以父本蕙蘭的花粉塊，每朵花授以蕙蘭花粉塊4-6個(gè)，以確保授粉；
[0027]d.子房和種子發(fā)育:授粉后的雜交蘭I周后花瓣萎蔫，2周后能觀察到子房明顯膨大，剪去干枯花瓣和萼片，防止細(xì)菌和真菌的滋生;生長(zhǎng)240天后，果莢成熟，變黃開裂前采收果夾。
[0028]2雜交后代種子無菌播種:
[0029]a.無菌萌發(fā)培養(yǎng)基:以MS為基本培養(yǎng)基，添加6-BA 0.5mg.L—1和NAA2.0mg.L一S
[0030]b.無菌播種和萌發(fā):采收成熟果莢，自來水沖洗后，在超凈工作臺(tái)進(jìn)行表面滅菌處理，先用75%的乙醇處理I分鐘，再用I %的次氯酸鈉處理30分鐘，無菌水沖洗4次，在無菌濾紙上切開果莢，取出種子，播種于萌發(fā)培養(yǎng)基;播種60天后雜交后代種子陸續(xù)萌發(fā)；
[0031 ] c.雜交后代植株再生:將萌發(fā)至5.0mm左右的原球莖及根狀莖接種于MS培養(yǎng)基添加NAA 0.5mg.L—1和6_BA 1.0mg.L—1培養(yǎng)基，促進(jìn)原球莖發(fā)育和植株再生，30-60天后原球莖陸續(xù)萌發(fā)成苗，并具有不定根；
[0032]d.生根植株移栽:生根植株打開瓶口馴化3-5d，洗凈培養(yǎng)基后以1000倍的百菌清處理2h，以水苔為基質(zhì)定植于2.5寸營(yíng)養(yǎng)缽，移栽后控制溫室溫度在25°C，空氣相對(duì)濕度80%，20天以后長(zhǎng)出新根成活，生長(zhǎng)6個(gè)月后植株進(jìn)一步移栽到3寸營(yíng)養(yǎng)缽進(jìn)一步生長(zhǎng)，所獲得植株均表現(xiàn)為附生蘭和溫帶地生蘭的特征，可以進(jìn)一步篩選優(yōu)良株系作為新材料加以推廣。
[0033]以上條件所用培養(yǎng)基除注明外，均添加3%的蔗糖和100-150ml.L—1椰子汁，活性炭I %，pH值調(diào)至5.6，培養(yǎng)條件為光照1000Ix，16h光周期，25°C培養(yǎng)。
[0034]上面所述的實(shí)施例僅僅是對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式進(jìn)行描述，并非對(duì)本發(fā)明的構(gòu)思和范圍進(jìn)行限定，在不脫離本發(fā)明設(shè)計(jì)構(gòu)思前提下，本領(lǐng)域中普通工程技術(shù)人員對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做出的各種變型和改進(jìn)，均應(yīng)落入本發(fā)明的保護(hù)范圍，本發(fā)明請(qǐng)求保護(hù)的技術(shù)內(nèi)容已經(jīng)全部記載在權(quán)利要求書中。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種蘭屬雜交蘭的創(chuàng)建方法，其特征是包括親本大花蕙蘭、雜交蘭及蕙蘭材料的溫室培養(yǎng)及開花調(diào)控的步驟: a)母本材料的培養(yǎng):以大花蕙蘭和雜交蘭品種為母本，生長(zhǎng)4-5年的成熟植株種植于溫室中，冬春季節(jié)控制營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)，控制N、P、K營(yíng)養(yǎng)水平，降低氮素，提高磷鉀肥濃度，前期適當(dāng)控制溫度，3-4月份提高溫度，促進(jìn)其在春季開花； b)父本材料的培養(yǎng):選擇多年生的蕙蘭為母本，通過N、P、K營(yíng)養(yǎng)及光照和溫度控制，促進(jìn)蕙蘭于3-4月份開花； c)雜交授粉:從父本蕙蘭開花株上用鑷子分離花粉塊，母本大花蕙蘭或雜交蘭開花株上的單花開放后去掉花粉塊，授以父本蕙蘭的花粉塊，每朵花授以蕙蘭花粉塊4-6個(gè)，以確保授粉； d)子房和種子發(fā)育:授粉后的大花蕙蘭或雜交蘭一周后花瓣萎蔫，兩周后能觀察到子房明顯膨大，剪去干枯花瓣和萼片，防止細(xì)菌和真菌的滋生;生長(zhǎng)210-270天后，果莢變黃開裂前可以采收果莢。2.根據(jù)權(quán)利要求書I所述蘭屬雜交蘭的創(chuàng)制方法，其特征在于所述親本大花蕙蘭、雜交蘭及蕙蘭材料的溫室培養(yǎng)及開花調(diào)控的步驟之后還包括雜交后代種子無菌播種的步驟: e)無菌萌發(fā)培養(yǎng)基:以1/2MS或MS為基本培養(yǎng)基添加6-BA0.5-2.0mg.L—1和NAA0.5-.2.0mg.L—S f)無菌播種和萌發(fā):采收成熟果莢，自來水沖洗后，在超凈工作臺(tái)進(jìn)行表面滅菌處理，先用75%的乙醇處理I分鐘，再用I %的次氯酸鈉處理30-40分鐘，無菌水沖洗3-4次，在無菌濾紙上切開果莢，取出種子，播種于萌發(fā)培養(yǎng)基； g)雜交后代植株再生:以MS為基本培養(yǎng)基添加NAA0.5-1.0mg.L—1和1.0-2.0mg.L—1適宜原球莖發(fā)育和植株再生； h)生根植株移栽:生根植株打開瓶口馴化3-5d，洗凈培養(yǎng)基后以800-1000倍的百菌清處理l-3h，采用水苔為基質(zhì)移栽于2.5寸營(yíng)養(yǎng)缽，移栽后控制溫室溫度在25°C，空氣相對(duì)濕度80%，20-30天以后長(zhǎng)出新根成活，生長(zhǎng)6個(gè)月后植株進(jìn)一步移栽至較大營(yíng)養(yǎng)缽進(jìn)一步生長(zhǎng)。3.根據(jù)權(quán)利要求書2所述蘭屬雜交蘭的創(chuàng)制方法，其特征在于所述步驟e)、步驟g)和步驟h)中的培養(yǎng)基中均分別添加3%的蔗糖和100-150ml.L—1椰子汁，活性炭1_2%，pH值調(diào)至.5.4-5.6,培養(yǎng)條件為光照10001X，16h光周期，25 °C培養(yǎng)。
【專利摘要】一種蘭屬雜交蘭的創(chuàng)建方法，其特征是包括親本大花蕙蘭、雜交蘭及蕙蘭材料的溫室培養(yǎng)及開花調(diào)控的步驟：a)母本材料的培養(yǎng)；b)父本材料的培養(yǎng)；c)雜交授粉；d)子房和種子發(fā)育；e)無菌播種等。本發(fā)明方法可以用于培育具有蕙蘭特征的優(yōu)良雜交蘭后代材料，與現(xiàn)有大花蕙蘭和其他墨蘭雜交蘭及建蘭雜交蘭等在形態(tài)特征和生長(zhǎng)特征及抗逆性等方面不同，具備蕙蘭的優(yōu)良性狀，可以豐富蘭屬雜交蘭的品種類型。
【IPC分類】A01H1/02
【公開號(hào)】CN105580729
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610053360
【發(fā)明人】王廣東, 陳瑤瑤, 張景華
【申請(qǐng)人】南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2016年5月18日
【申請(qǐng)日】2016年1月26日