一種毛棉杜鵑的組培快繁方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種花丼繁殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種毛棉杜鵑的組織培養(yǎng)、快速繁殖方法。
【背景技術(shù)】
[0002]毛棉杜Rhododendron moulmainense為杜|$花科常綠小喬木，自然分布于中國(guó)、印度、印尼、馬來(lái)西亞和緬甸，在我國(guó)主要分布在長(zhǎng)江流域以南海拔400-1500m的森林和灌叢中。毛棉杜鵑花朵艷麗、新葉紅嫩，是營(yíng)造花叢和花群景觀的優(yōu)良樹種。但其實(shí)生苗在常規(guī)條件下生長(zhǎng)緩慢，幼苗變異大。扦插擴(kuò)繁的研宄雖已有報(bào)道，但其擴(kuò)繁量受母株材料和繁殖季節(jié)的影響，且難以達(dá)到規(guī)?；焖俜敝车囊蟆＝M織培養(yǎng)繁育技術(shù)具有繁殖系數(shù)高、繁殖速度快、不受季節(jié)影響和易于產(chǎn)業(yè)化等優(yōu)點(diǎn)，為了更好地保護(hù)、開發(fā)與利用毛棉杜鵑資源，研宄毛棉杜鵑的組織培養(yǎng)技術(shù)具有重要意義。
[0003]因此，本申請(qǐng)針對(duì)毛棉杜鵑組培快繁技術(shù)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，開展了基本培養(yǎng)基、蔗糖、生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、煉苗等關(guān)鍵技術(shù)篩選研宄，建立了一套毛棉杜鵑植物組織培養(yǎng)體系。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于:提供一種培養(yǎng)周期短、不受季節(jié)影響、產(chǎn)量較高的毛棉杜鵑的組培快繁方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，促進(jìn)毛棉杜鵑的大規(guī)模應(yīng)用。
[0005]本發(fā)明的技術(shù)方案是:一種毛棉杜鵑的組培快繁方法，其特征在于:包括如下步驟:
[0006]A.無(wú)菌苗的獲得:選取飽滿種子包在紗布中，先置于自來(lái)水下沖洗2h，用75%酒精浸泡2min，無(wú)菌水沖洗5遍，再用0.1 %升未加吐溫2滴消毒90s，無(wú)菌水沖洗5次，用滅菌濾紙吸干種子表面的殘留水分，接種于僅添加了 0.6%瓊脂、25%蔗糖，pH為5.8的基本培養(yǎng)基中。
[0007]B.增殖培養(yǎng):將外植體叢生芽接種于以Read培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基的增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)，每60d繼代一次。
[0008]C.生根培養(yǎng):將增殖培養(yǎng)得到的健壯幼苗切段，接種于以1/2WPM培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基的生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)誘導(dǎo)生根。
[0009]優(yōu)選地，所述增殖培養(yǎng)基為Read+L Omg/L ZT+0.02mg/L IBA+2.5% -3.5%蔗糖，其增殖倍數(shù)達(dá)4.5。
[0010]優(yōu)選地，所述生根培養(yǎng)基為1/2WPM+1.5mg/L IBA，其生根率可達(dá)80.17% ;添加活性炭0.1 %可促進(jìn)生根數(shù)和根長(zhǎng)生長(zhǎng)。。
[0011]此外，還包括煉苗與移栽步驟，具體方法為:生根培養(yǎng)15d后，將培養(yǎng)瓶移至室溫環(huán)境、自然光照環(huán)境下培養(yǎng)3-5d后，將培養(yǎng)瓶蓋子抒松，7d后移苗；在流水下洗去植株根部培養(yǎng)基，將洗凈的植株根部浸泡于一定濃度的藥劑內(nèi)2-2.5h，以泥炭土和珍珠巖體積比3:1為移栽基質(zhì)，移栽于32穴的穴盤中，移栽后的前1d內(nèi)，遮膜保濕，控制相對(duì)濕度75% -85%，第1d后，逐漸撤膜。所述藥劑為:5_氨基乙酰丙酸溶液，其濃度為5ppm。
[0012]撤膜15d后，澆灌濃度為50ppm的5-氨基乙酰丙酸的溶液，此后，每隔15d重復(fù)澆灌一次，直至下次換盆移苗。
【附圖說(shuō)明】
[0013]圖1為Read培養(yǎng)基處理組。
[0014]圖2為煉苗處理組。
[0015]圖3為不添加細(xì)胞生長(zhǎng)素處理組。
[0016]圖4為添加細(xì)胞生長(zhǎng)素處理組。
[0017]圖5為生根處理組。
[0018]圖6為活性炭處理組。
【具體實(shí)施方式】
[0019]以下結(jié)合附圖實(shí)對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。
[0020]A.無(wú)菌苗的獲得:選取飽滿種子包在紗布中，先置于自來(lái)水下沖洗2h，用75%酒精浸泡2min，無(wú)菌水沖洗5遍，再用0.1 %升汞加吐溫2滴消毒90s，無(wú)菌水沖洗5次，用滅菌濾紙吸干種子表面的殘留水分，將滅菌后的種子接種于添加1/4MS、0.6%瓊脂、25%蔗糖，pH 5.8的基本培養(yǎng)基中。
[0021]B.增殖培養(yǎng):將外植體叢生芽接種于Read+1.0mg/L ZT+0.02mg/LIBA+2.5% -3.5%蔗糖的增殖培養(yǎng)基中，每60d繼代一次，增殖倍數(shù)達(dá)4.5。
[0022]C.生根培養(yǎng):將增殖培養(yǎng)得到的健壯幼苗切段，接種于為1/2WPM+1.5mg/L IBA的生根培養(yǎng)基中，其生根率可達(dá)80.17%，添加活性炭0.1 %可促進(jìn)生根數(shù)和根長(zhǎng)生長(zhǎng)。
[0023]D.煉苗與移栽:生根培養(yǎng)15d后，將培養(yǎng)瓶移至室溫環(huán)境、自然光照環(huán)境下培養(yǎng)3-5d后，將培養(yǎng)瓶蓋子抒松，抒松，7d后移苗；在流水下洗去植株根部培養(yǎng)基，將洗凈的植株根部浸泡于濃度為5ppm的5-氨基乙酰丙酸溶液內(nèi)2.5h，以泥炭土和珍珠巖體積比3: I為移栽基質(zhì)，移栽于32穴的穴盤中，移栽后的前1d內(nèi)，遮膜保濕，控制相對(duì)濕度80 %，第1d后，逐漸撤膜。撤膜15d后，澆灌濃度為50ppm的5-氨基乙酰丙酸的溶液，此后，每隔15d重復(fù)澆灌一次，直至下次換盆移苗。
[0024]該組培技術(shù)體系提供了一套適合毛棉杜鵑快速繁殖，解決毛棉杜鵑實(shí)生苗生長(zhǎng)緩慢、繁殖周期長(zhǎng)，幼苗生長(zhǎng)狀態(tài)較差等問(wèn)題，可大規(guī)模培養(yǎng)出健壯的苗木。
[0025]截止目前，對(duì)毛棉杜鵑的組織培養(yǎng)技術(shù)的研宄尚未見(jiàn)報(bào)道，本發(fā)明首次報(bào)道了適合毛棉杜鵑組織培養(yǎng)快速繁殖的技術(shù)體系。
[0026]最后所應(yīng)當(dāng)說(shuō)明的是，以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案而非對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種毛棉杜鵑的組培快繁方法，其特征在于:包括如下步驟: A.無(wú)菌苗的獲得:選取飽滿種子包在紗布中，先置于自來(lái)水下沖洗2h，用75%酒精浸泡2min，無(wú)菌水沖洗5遍，再用0.1 %升未加吐溫2滴消毒90s，無(wú)菌水沖洗5次，用滅菌濾紙吸干種子表面的殘留水分，接種于僅添加了 0.6%瓊脂、25%蔗糖，pH為5.8的基本培養(yǎng)基中； B.增殖培養(yǎng):將外植體叢生芽接種于以Read培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基的增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)，每60d繼代一次； C.生根培養(yǎng):將增殖培養(yǎng)得到的健壯幼苗切段，接種于以1/2WPM培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基的生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)誘導(dǎo)生根。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種毛棉杜鵑的組培快繁方法，其特征在于:所述增殖培養(yǎng)基為 Read+1.0mg/LZT+0.02mg/L IBA+2.5% -3.5%蔗糖，其增殖倍數(shù)達(dá) 4.5。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種毛棉杜鵑的組培快繁方法，其特征在于:所述生根培養(yǎng)基為1/2WPM+IBA 1.5mg/L，其生根率可達(dá)80.17% ;添加活性炭0.1 %可促進(jìn)生根數(shù)和根長(zhǎng)生長(zhǎng)。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種毛棉杜鵑的組培快繁方法，其特征在于:還包括煉苗與移栽步驟，具體方法為:生根培養(yǎng)60d后，將培養(yǎng)瓶移至室溫環(huán)境、自然光照環(huán)境下培養(yǎng)3-5d后，將培養(yǎng)瓶蓋子抒松，7d后移苗；在水下洗去植株根部培養(yǎng)基，將洗凈的植株根部浸泡于一定濃度的藥劑內(nèi)2-2.5h，以泥炭土和珍珠巖體積比3: I為移栽基質(zhì)，移栽于32穴的穴盤中，移栽后的前1d內(nèi)，遮膜保濕，控制相對(duì)濕度75% -85%，第1d后，逐漸撤膜。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種毛棉杜鵑的組培快繁方法，其特征在于:所述藥劑為:5-氨基乙酰丙酸溶液，其濃度為5ppm。6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種毛棉杜鵑的組培快繁方法，其特征在于:撤膜15d后，澆灌濃度為50ppm的5-氨基乙酰丙酸的溶液，此后，每隔15d重復(fù)澆灌一次，直至下次換盆移苗。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種最適合毛棉杜鵑的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，依次經(jīng)過(guò)無(wú)菌苗的獲得、外植體的獲得和不定芽誘導(dǎo)分化、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)后得到完整植株，并通過(guò)煉苗與移栽，提高了苗木的成活率。本發(fā)明的有益效果是：(1)建立了一種毛棉杜鵑組培快繁體系，填補(bǔ)了現(xiàn)有技術(shù)中毛棉杜鵑組培技術(shù)的空白；(2)篩選出最適增殖培養(yǎng)基為Read+1.0mg/L ZT+0.02mg/L IBA+2.5％-3.5％蔗糖，生根培養(yǎng)基為1/2 WPM+1.5mg/L IBA；(3)研究出了合適的毛棉杜鵑煉苗移栽方法。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號(hào)】CN104885932
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410795987
【發(fā)明人】莊雪影, 孫朝輝, 趙富群, 洪文君
【申請(qǐng)人】華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2015年9月9日
【申請(qǐng)日】2014年12月11日