博湖葦蘑人工料袋栽培模式的建立的制作方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及新疆特有食用菌栽料袋培技術，更確切地說，涉及博湖葦蘑人工料袋栽培模式的建立。
【背景技術】
[0002]博湖葦蘑是在新疆博斯騰湖區(qū)特殊環(huán)境條件下形成的一種珍稀食用菌。野生葦蘑生長在沙土內腐爛的蘆葦根上。菌柄為紡錘形，基部杵狀，肉質，中生，柄上有不明顯的鱗片，空心，有膜狀菌環(huán)。菌蓋厚5cm左右，直徑15cm左右，肉質具有濃郁的蘑菇香味。博湖葦蘑蛋白質含量豐富，氨基酸配比合理，營養(yǎng)成分優(yōu)于雙孢蘑菇、香菇、平菇及草菇，加之博湖葦蘑具有生長快、個體大、子實體形態(tài)好、質地緊密、味道鮮美等特點，是一種極為珍貴的食用菌資源。正是其優(yōu)良的品質和較高的營養(yǎng)價值，廣受當?shù)厝讼矏?。目前，尚未有利用料袋栽培模式人工培育博湖葦蘑的報道。本發(fā)明的目的在于提供博湖葦蘑料袋人工培養(yǎng)方法，包括菌種分離鑒定、母種擴繁、填料配方、培養(yǎng)條件、菌絲體轉化子實體條件的建立。通過本發(fā)明所述栽培方法生產所培育的博湖葦蘑栽培周期為90天左右，生物產量極高，子實體呈淡黃色或白色，肉質緊實，蛋白質含量高，味道鮮美，營養(yǎng)成分與野生蘑菇無顯著差異，具有較強的抗氧化和抗衰老的功能，是一種極具市場開發(fā)價值的食用菌。

【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明涉及博湖葦蘑人工料袋栽培模式的建立，包括菌種分離鑒定、母種擴繁、料袋填料配方、培養(yǎng)條件、菌絲體轉化子實體條件的建立。該方法培育的博湖葦蘑栽培周期為90天左右，生物產量極高，子實體呈淡黃色或白色，肉質緊實，蛋白質含量高，味道鮮美，營養(yǎng)成分與野生蘑菇無顯著差異，具有較強的抗氧化和抗衰老的功能，是一種極具市場開發(fā)價值的食用菌。該方法具有設備要求低，易于操作等特點，方便大規(guī)模推廣。
[0004]本發(fā)明通過以下措施實現(xiàn):
博湖葦蘑人工栽培菌種，它是蘑菇科；傘菌屬的一個菌株，其特征在于:它是采集新疆博斯騰湖周邊蘆葦灘野生蘑菇做標本，采用組織分離法，經馴化，提純而成，其生物學特性為菌蓋表面光滑，白色或乳白色，生長初期呈半球形，成熟后圓形，中央平展或稍突，邊緣光滑，直徑達30 -30 mm，厚5 - 30 mm，屬大型食用真菌。菌柄中生，短粗圓柱狀，上端表面有少量鱗片，下端基本光滑?？招模赓|，有雙層菌環(huán)，無菌托，孢子為深棕色；母種培養(yǎng)基上菌絲呈乳白色，在20°C -25°C培養(yǎng)15天左右長滿試管。
[0005]1.菌種的分離與鑒定
采用PDA培養(yǎng)基，組織分離法從野生博湖葦蘑的菌蓋中部分離，然后取菌塊接種于培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)溫度25°C培養(yǎng)10天左右獲得白色原種；
利用ITS進行菌種鑒定，其測序結果經NCBI數(shù)據(jù)庫比對，博湖葦蘑為真菌界；雙核亞界；擔子菌門；傘菌亞門；傘菌綱；傘菌亞綱；傘菌目；蘑菇科；傘菌屬的一個菌種。
[0006]2.母種的液體擴繁: 液體搖瓶培養(yǎng)，液體培養(yǎng)基為:馬鈴薯200克，葡萄糖20克，磷酸氫二鉀0.75克，硫酸鎂0.75克，紅糖5克，水1000克。培養(yǎng)溫度25°C，180rmp，培養(yǎng)10天獲得母種。
[0007]3.料袋培養(yǎng)基制作:
(O將收割蘆葦?shù)臅窀珊蠓鬯槌?.5厘米左右的顆粒與小麥質量比4:1進行混合，放入2%的石灰水中浸泡24小時，撈出控干，裝袋，控制料袋中水分為40%左右，121°C高壓滅菌30分鐘。
[0008](2)將玉米芯40%-50%，牛糞35%-40%，玉米桿10%，過磷酸鈣1%_1.5%，石膏1%_1.5%混合發(fā)酵后，裝袋。
[0009]4.菌絲培養(yǎng)
將步驟2母種接入步驟3栽培培養(yǎng)基中，然后將菌袋放入暗培養(yǎng)室中25°C培養(yǎng)60天，菌絲長滿料袋。
[0010]5.誘導菌絲體轉化子實體
變溫刺激步驟4中的菌袋，變溫設計為15°C 8小時和25V 16小時變溫培養(yǎng)處理一周，分化出子實體，原基分化后25°C暗培養(yǎng)3天獲得傘蓋直徑為15厘米左右的子實體。
[0011]本發(fā)明所用PDA培養(yǎng)基為馬鈴薯200g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂12g/L、水1L。
【附圖說明】
[0012]圖1為本發(fā)明博湖葦蘑出菇圖片。
【具體實施方式】
[0013]實施例一:菌種的分離
組織分離法:在無菌室接種箱內或超凈工作臺上進行。選用好的博湖葦蘑子實體，表面用無菌水沖洗兩次，隨后用無菌干凈紗布或濾紙將表面的水吸去，最后用無菌手術剪刀或鑷子切取子座頂端部分或菌核內的組織塊0.2-0.4cm接種于無菌PDA培養(yǎng)基上，放在25°C條件下培養(yǎng)，長出菌絲體備用。
[0014]實施例二:菌種的制備
利用液體搖瓶培養(yǎng)，液體培養(yǎng)基為:馬鈴薯200克，葡萄糖20克，磷酸氫二鉀0.75克，硫酸鎂0.75克，紅糖5克，水1000克。從長滿菌絲的PDA培養(yǎng)基上挑取直徑0.5厘米左右大小菌塊，放入液體培養(yǎng)基中對博湖葦蘑進行液體培養(yǎng)。接菌后置于往復式震蕩機中，每分鐘震蕩180次，28°C培養(yǎng)10天后，獲得液體母種菌液。液體培養(yǎng)具有:第一，菌絲生長速度快，菌絲體產量高；第二，利用液體培養(yǎng)制備液體菌種時能有效減少污染；第三，利用液體菌接種固體料袋培養(yǎng)基質效率高。
[0015]實施例三:菌種鑒定
利用CTAB法提取博湖葦蘑菌絲的DNA，利用ITS2和ITS4引物，進行擴增，測序，結果經NCBI數(shù)據(jù)庫比對，博湖葦蘑為真菌界；雙核亞界；擔子菌門；傘菌亞門；傘菌綱；傘菌亞綱；傘菌目；蘑菇科;傘菌屬的一個菌種。
[0016]實施例四:料袋培養(yǎng)基制作
(O將收割蘆葦?shù)臅窀珊蠓鬯槌?.5厘米左右的顆粒與小麥質量比4:1進行混合，放入2%的石灰水中浸泡24小時，撈出控干，裝袋，控制料袋中水分為40%左右，121°C高壓滅菌30分鐘。
[0017](2)將玉米芯40%-50%，牛糞35%-40%，玉米桿10%，過磷酸鈣1%_1.5%，石膏1%_1.5%混合發(fā)酵后，裝袋。
[0018]實施例五:菌絲培養(yǎng)
將適量加入液體母種菌液至已滅菌的料袋中，反復倒置數(shù)次使菌液均勻滲入填料中，封口，然后將菌袋開口朝上依次并排放入培養(yǎng)架中，250C暗培養(yǎng)60天，菌絲長滿料袋，在此期間控制室內濕度在50%左右。
[0019]實施例六:誘導菌絲體轉化子實體
將長滿菌絲的菌袋15°C暗處理8小時，然后迅速升高溫度至24°C暗處理16小時，反復處理3次，分化出子實體，25°C暗培養(yǎng)7天獲得傘蓋直徑為15厘米左右的子實體，生物學效率為65%以上(生物學效率=鮮菇重量/培養(yǎng)干重X 100%)ο
【主權項】
1.野生博湖葦蘑菌種分離及料袋栽培方法，包括菌種分離鑒定、母種擴繁、填料配方、菌絲培養(yǎng)條件、菌絲體轉化子實體條件步驟。
2.權利要求1所述的博湖葦蘑人工栽培菌種，它是蘑菇科；傘菌屬的一個菌株，其特征在于:它是采集新疆博斯騰湖周邊蘆葦灘野生蘑菇做標本，采用組織分離法，經馴化，提純而成，其生物學特性為菌蓋表面光滑，白色或乳白色，生長初期呈半球形，成熟后圓形，中央平展或稍突，邊緣光滑，直徑達30 -30 mm，厚5 - 30 mm，屬大型食用真菌。
3.菌柄中生，短粗圓柱狀，上端表面有少量鱗片，下端基本光滑。
4.空心，肉質，有雙層菌環(huán)，無菌托，孢子為深棕色；母種培養(yǎng)基上菌絲呈乳白色，在200C -25°C培養(yǎng)15天左右長滿試管。
5.權利要求1所述的博湖葦蘑的母種擴繁，其特征在于:液體搖瓶培養(yǎng)，液體培養(yǎng)基為馬鈴薯200克，葡萄糖20克，磷酸氫二鉀0.75克，硫酸鎂0.75克，紅糖5克，水1000克。
6.權利要求1所述的博湖葦蘑料袋培養(yǎng)填料配方，其特征在于:(I)蘆葦:小麥質量比為 8:2。
7.(2)發(fā)酵料:玉米芯40%-50%，牛糞35%-40%，玉米桿10%，過磷酸鈣1%_1.5%，石膏1%-1.5%。
8.權利要求1所述的博湖葦蘑料袋培養(yǎng)菌絲體轉化子實體條件，其特征在于:將長滿菌絲的菌袋15°C培養(yǎng)8小時和25°C培養(yǎng)16小時變溫培養(yǎng)處理3天，誘導子實體的產生。
【專利摘要】本發(fā)明涉及博湖葦蘑人工料袋栽培模式的建立，包括菌種分離鑒定、母種擴繁、填料配方、培養(yǎng)條件、菌絲體轉化子實體條件的建立。利用本發(fā)明所述方法可進行生產化栽培具有生產成本低、操作簡單，出菇率高等優(yōu)點。新疆特有蘑菇品種博湖葦蘑料袋栽培模式的建立對新疆特有食用菌具有極高的開發(fā)、推廣價值。本發(fā)明所涉及栽培方法所培育的博湖葦蘑栽培周期為90天左右，生物產量極高，子實體呈淡黃色或白色，肉質緊實，蛋白質含量高，味道鮮美，營養(yǎng)成分與野生蘑菇無顯著差異，具有較強的抗氧化和抗衰老的功能，是一種極具市場開發(fā)價值的食用菌。
【IPC分類】A01G1-04, C05G3-00
【公開號】CN104686190
【申請?zhí)枴緾N201410778270
【發(fā)明人】沈海濤, 林翠, 馬歡, 姚華, 陳慶寬, 祝建波, 王愛英, 焦天奇
【申請人】石河子大學, 瑪納斯縣農業(yè)技術推廣中心
【公開日】2015年6月10日
【申請日】2014年12月17日