專利名稱：生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑及其配制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物殺蟲(chóng)劑及其配制方法，特別是利用高毒力的昆蟲(chóng)桿狀病毒與蘇云金桿菌(Bt)及其它輔料混合配制成的生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑。它屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域，也屬于農(nóng)業(yè)生物防治技術(shù)領(lǐng)域。
根據(jù)調(diào)查，目前國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)上廣泛使用的殺蟲(chóng)劑有兩類，一類是化學(xué)殺蟲(chóng)劑，另一類是生物殺蟲(chóng)劑?；瘜W(xué)殺蟲(chóng)劑的使用會(huì)造成環(huán)境污染，特別是在蔬菜、果樹(shù)等方面，使用后殘留物不易清除，給人類健康、自然環(huán)境和農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)帶來(lái)巨大的危害，而且長(zhǎng)期使用后，害蟲(chóng)易產(chǎn)生抗藥性。生物殺蟲(chóng)劑一般無(wú)污染，不破壞生態(tài)平衡，對(duì)人畜無(wú)害，但目前已公開(kāi)的生物殺蟲(chóng)劑的效果短暫，無(wú)繼代傳播的后效作用，因此使用效果不理想。同時(shí)，單獨(dú)用蘇云金桿菌(Bt)殺蟲(chóng)劑已有實(shí)驗(yàn)報(bào)告，長(zhǎng)期用Bt有抗性產(chǎn)生。國(guó)內(nèi)外研究病毒殺蟲(chóng)劑多年，至今未見(jiàn)有抗性產(chǎn)生。
本發(fā)明的目的在于選擇經(jīng)分離篩選的高毒力的昆蟲(chóng)桿狀病毒與蘇云桿菌(Bt)及其它輔料配制成一利既有協(xié)同作用，又有自然傳播的后效作用的高效、廣譜、安全無(wú)毒的生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑。本發(fā)明是由發(fā)明人曾凡濟(jì)負(fù)責(zé)的1983年國(guó)家自然科學(xué)基金資助的“復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑”科研項(xiàng)目(項(xiàng)目號(hào)83107054)。
為實(shí)現(xiàn)上述目的所采取的技術(shù)措施是一、病毒毒株的選擇本發(fā)明選擇三利昆蟲(chóng)桿狀病毒毒株粘蟲(chóng)核型多角體病毒831株、菜青蟲(chóng)顆粒體病毒943株和小菜蛾顆粒體病毒。其中，前兩種為發(fā)明人分離、篩選的高毒力毒株。
1.粘蟲(chóng)核型多角體病毒831株，Leucania separata Nuclear PolyhedrosisVirus 831 strain，代號(hào)LsNPV-831，保藏單位及保藏號(hào)為CCTCC V 96002。
主要特征病毒核酸為dsDNA、超螺旋、松弛環(huán)狀、線狀分子，平均分子量為76.2～93×106daltons，病毒包涵體含多角體蛋白，只有一種結(jié)構(gòu)多肽，分子量為29500daltons。
2.菜青蟲(chóng)顆粒體病毒943株，Pieris rapae Granulosis Virus 943 strain，代號(hào)PrGV-943，保藏單位及保藏號(hào)為CCTCC V 96003。
主要特征病毒核酸為dsDNA、超螺施、松施環(huán)狀、線狀分子，平均分子量為71×106daltons。病毒包涵體含顆粒體蛋白，只有一種結(jié)構(gòu)多肽，分子量為28×103daltons。
二、生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑的配制本發(fā)明的生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑是由病毒干粉、蘇云金桿菌(Bt)原粉、濕潤(rùn)劑、粘著劑、穩(wěn)定劑、填充劑和輕質(zhì)碳酸鈣按一定比例混合配制而成。具體的配比如下①蘇云金桿菌原粉根據(jù)檢測(cè)的毒力效價(jià)計(jì)算，使最終所配的生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑毒力效價(jià)為16000～32000IU/mg。
②病毒干粉根據(jù)檢測(cè)的生物毒力和病毒含量計(jì)算，使最終所配的生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑中病毒含量為0.1×103～15×103OB/mg(OB為病毒包涵體)；③濕潤(rùn)劑含量為8～25％；④粘著劑0.2～6％；⑤穩(wěn)定劑0.01～0.05％；⑥填充劑10～30％；余量為輕質(zhì)碳酸鈣。
其中，病毒干粉是用上述昆蟲(chóng)桿狀病毒毒株(根據(jù)應(yīng)用對(duì)象的不同，可選擇粘蟲(chóng)核型多角體病毒831株，或菜青蟲(chóng)顆粒體病毒943株或小菜蛾顆粒體病毒，也可以是其中的兩種或三種病毒毒株的組合。)添食、感染幼蟲(chóng)，收集感病的幼蟲(chóng)，經(jīng)勻漿、差速離心、提取純化病毒，按一定比例加入穩(wěn)定劑、填充劑等，然后經(jīng)冷凍干燥制成病毒干粉。
蘇云金桿菌(Bt)原粉是由蘇云金桿菌菌種經(jīng)斜面及搖瓶培養(yǎng)，然后接種到種子罐擴(kuò)增，再在發(fā)酵罐發(fā)酵，所得發(fā)酵液經(jīng)酸化、離心、濃縮處理，得到的濃縮物的pH值調(diào)至5.0～6.0，然后在噴霧干燥塔中干燥即制成蘇云金桿菌原粉。
與已有技術(shù)相比較，采用本發(fā)明的技術(shù)措施所達(dá)到的有益效果本發(fā)明的生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑系選用高毒力的昆蟲(chóng)桿狀病毒、Bt及其它輔料復(fù)合配制而成，具有高效、廣譜、安全無(wú)毒的特點(diǎn)，該生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑既有桿狀病毒的專一特異殺蟲(chóng)效果，繼代傳播的后效作用，又有Bt的廣譜殺蟲(chóng)、速效的協(xié)同作用的特點(diǎn)，對(duì)糧食、蔬菜、茶棉、果樹(shù)、林業(yè)等作物的鱗翅目害蟲(chóng)等都有良好的防治效果。
本發(fā)明的質(zhì)量保證系統(tǒng)及產(chǎn)品質(zhì)量應(yīng)用經(jīng)農(nóng)業(yè)部藥檢所批準(zhǔn)的企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)Q/NB01-94，按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB1604農(nóng)藥驗(yàn)收規(guī)。
本發(fā)明的成果1995年被列為“九五”國(guó)家科技成果重點(diǎn)推廣項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)96110202A)和“國(guó)家環(huán)境保護(hù)最佳實(shí)用推廣A類項(xiàng)目”(項(xiàng)目編號(hào)96-A-E-025)。經(jīng)有關(guān)部門(mén)組織示范推廣，已防治蔬菜、糧食、果樹(shù)等的害蟲(chóng)達(dá)14萬(wàn)多畝，效果一致良好。
下面結(jié)合具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明實(shí)施例1先按前述方法分別制備病毒干粉和蘇云金桿菌原粉，然后按下面的配比將各組分混合配制即成生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑蘇云金桿菌原粉18000IU/mg，病毒原粉0.1×103OB/mg，濕潤(rùn)劑10.8％，粘著劑6.0％，穩(wěn)定劑0.01％，填充劑10％，余量為輕質(zhì)碳酸鈣，加至總量為100％。經(jīng)農(nóng)業(yè)部植?？傉窘M織在12省市推廣示范應(yīng)用，效果一致良好。
實(shí)施例2按前述方法分別制備病毒干粉和蘇云金桿菌原粉，殺蟲(chóng)劑的配比如下病毒干粉10×103OB/mg，蘇云金桿菌原粉32000IU/mg，粘著劑用十二烷基磺酸鈉5％和蛋白粉1％，濕潤(rùn)劑為紙漿粉15％，穩(wěn)定劑0.02％，填充劑用鈣粉8％和淀粉2％，用輕質(zhì)碳酸鈣加至總量為100％，將上述各組分混合配制即成。在廣西南寧市示范推廣應(yīng)用2000多畝，防治蔬菜、糧食作物鱗翅目害蟲(chóng)，效果良好。
權(quán)利要求
1.一種高毒力的昆蟲(chóng)桿狀病毒粘蟲(chóng)核型多角體病毒831株(Leucaniaseparata Nuclear Polyhedrosis Virus 831 strain)，LsNPV-831，(CCTCC.V96002)。
2.一種高毒力的昆蟲(chóng)桿狀病毒菜青蟲(chóng)顆粒體病毒943株(Pieris rapaeGranulosis Virus 943 strain)，PrGV-943，(CCTCC.V96003)。
3.一種生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑，其特征在于它是由病毒干粉、蘇云金桿菌原粉、粘著劑、穩(wěn)定劑、濕潤(rùn)劑、填充劑按一定配比混合配制而成。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑，其特征在于所述的病毒干粉是用昆蟲(chóng)桿狀病毒毒株添食、感染幼蟲(chóng)，收集感病的膿腫幼蟲(chóng)，經(jīng)勻漿，差速離心，提取純化昆蟲(chóng)桿狀病毒，按一定配比加入穩(wěn)定劑、填充劑，然后經(jīng)冷凍干燥而制成干粉。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑，其特征在于所述的昆蟲(chóng)桿狀病毒毒株為粘蟲(chóng)核型多角體病毒831株，或?yàn)樾〔硕觐w粒體病毒，或?yàn)椴饲嘞x(chóng)顆粒體病毒943株，或?yàn)槠渲械膬煞N病毒的組合，或?yàn)樯鲜鋈N病毒的組合。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑，其特征在于所述的蘇云金桿菌原粉是蘇云金桿菌菌種經(jīng)斜而培養(yǎng)和搖瓶培養(yǎng)，再接種到種子罐擴(kuò)增，然后轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐發(fā)酵，最后將發(fā)酵液經(jīng)酸化、離心、濃縮處理，將濃縮液的pH值調(diào)到5.O～6.0，過(guò)濾，在噴霧干燥塔中干燥而成。
7.根據(jù)權(quán)利要求3～6中任意一項(xiàng)所述的生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑，其特征在于該殺蟲(chóng)劑的組成配比為蘇云金桿菌原粉16000～32000 IU/mg病毒干粉 0.1×103～15×103OB/mg濕潤(rùn)劑8～25％粘著劑0.2～6％穩(wěn)定劑0.01～0.05％填充劑10～30％余量為輕質(zhì)碳酸鈣
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種生物復(fù)合病毒殺蟲(chóng)劑及其配制方法。它是由粘蟲(chóng)核型多角體病毒831株、不菜蛾顆粒體病毒、菜青蟲(chóng)顆粒體病毒943株、上述兩種或三種毒種組合病毒的干粉與Bt原粉、濕潤(rùn)劑、粘著劑、穩(wěn)定劑、填充劑等組分按一定配比混合配制而成。該殺蟲(chóng)劑高效、廣譜、安全無(wú)毒，對(duì)糧食、蔬菜、茶棉、果樹(shù)、林業(yè)等作物的鱗翅目等害蟲(chóng)具有良好的防治作用。經(jīng)有關(guān)部門(mén)組織的大田示范使用，該殺蟲(chóng)劑防治蔬菜、糧食、果樹(shù)害蟲(chóng)效果良好。
文檔編號(hào)A01N63/00GK1152612SQ96119700
公開(kāi)日1997年6月25日 申請(qǐng)日期1996年12月13日 優(yōu)先權(quán)日1996年12月13日
發(fā)明者曾凡濟(jì) 申請(qǐng)人:武漢大學(xué)