專利名稱:含有白莖性狀的植物的制作方法
含有白莖性狀的植物
發(fā)明背景
本申請要求于2010年4月20日提交的美國臨時(shí)申請系列號61/326，036的優(yōu)先權(quán)，該臨時(shí)申請的全部公開內(nèi)容通過 弓I用并入本文。
I.摶術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及植物育種領(lǐng)域,更具體地涉及甘藍(lán)(Brassica oleracea)植物中白莖性狀的開發(fā)。本發(fā)明還提供了產(chǎn)生包含這種性狀的植物的方法。
2.相關(guān)技術(shù)描述
蔬菜育種的目的是在單個(gè)品種/雜種中組合各種所需性狀。這些所需性狀可以包括栽培者和/或消費(fèi)者認(rèn)為有益的任何性狀，包括更高的產(chǎn)率、對昆蟲或病害的抗性、對環(huán)境脅迫的耐受性和營養(yǎng)價(jià)值。
育種技術(shù)利用植物的授粉方法。有兩種常用的授粉方法如果花粉從一朵花轉(zhuǎn)移至相同植物或相同植物品種的同一朵花或另一朵花，則植物自花授粉。如果花粉從不同植物品種的花轉(zhuǎn)移而來，則植物異花授粉。
已多代經(jīng)自花授粉且針對類型進(jìn)行過選擇的植物在幾乎所有基因座處均成為純合的，并且產(chǎn)生純育后代即純合植物的均一群體。不同基因型的兩個(gè)這樣的純合植物之間的雜交產(chǎn)生對于許多基因座而言為雜合的雜種植物的均一群體。相反，各自在許多基因座處為雜合的兩個(gè)植物的雜交產(chǎn)生在遺傳上不同并且非均一的雜種植物群體。得到的非均一性使其表現(xiàn)不可預(yù)測。
均一品種的開發(fā)需要對純合的近交植物的開發(fā)、這些近交植物的雜交以及對雜交的評價(jià)。譜系育種和輪回選擇是已經(jīng)用來從育種群體開發(fā)近交植物的育種方法的例子。這些育種方法將來自兩種或更多種植物或各種其它廣泛來源的遺傳背景組合到育種池中，通過自交和選擇所需表型從該育種池開發(fā)新的品系和由該品系衍生的雜種。對新的品系和雜種進(jìn)行評估以確定其中哪些具有商業(yè)潛力。
盡管迄今為止的育種工作已經(jīng)提供了大量有用的具有有益性狀的植物品系，但是本領(lǐng)域仍然十分需要具有進(jìn)一步改進(jìn)的性狀的新的品系。這樣的植物將通過改善作物產(chǎn)率和/或質(zhì)量而類似地有益于農(nóng)民和消費(fèi)者。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明通過提供包含白莖性狀的植物克服了現(xiàn)有技術(shù)的限制。這樣的植物可以是甘藍(lán)的亞種、變種或栽培種，如西蘭花(broccoli)、花椰菜(cauliflower)、卷心菜(cabbage)、羽衣甘藍(lán)(collard greens)、抱子甘藍(lán)(Brussels sprouts)、芥藍(lán)(Chinesebroccoli)或無頭甘藍(lán)(kale)。在特定實(shí)施方案中,植物是西蘭花或花椰菜植物。在某些方面，包含白莖性狀的植物可以被定義為包含基本為白色到奶油色的莖。在其它方面，包含白莖性狀的植物可以被定義為包含比不含白莖性狀的等基因植物的莖明顯更白的莖。在一些方面，莖的顏色可以在皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡上的顏色155A到15 所涵蓋的范圍內(nèi)，包括中間色。在一些方面，莖的顏色可以是皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡上的大約155C。在一些方面，莖的顏色可以是皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡上的155C。
在進(jìn)一步的方面，包含白莖性狀的植物可以另外包含其顏色被定義為基本為白色到奶油色的葉柄和/或葉脈。在其它方面，包含白莖性狀的植物可以包含其顏色比不含白莖性狀的等基因(isogenic)植物的葉柄和/或葉脈明顯更白的葉柄和/或葉脈。在一些方面，葉柄和/或葉脈的顏色可以在皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡上的顏色155A到15 所涵蓋的范圍內(nèi)，包括中間色。在一些方面，葉柄和/或葉脈的顏色可以是皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡上的大約155C。在一些方面，葉柄和/或葉脈的顏色可以是皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡上的155C。
在其它方面，包含白莖性狀的植物可以包含基本上為黃色到橙色的花球(curd)。在另外的方面，包含白莖性狀的植物可以包含為黃色到橙色(包括中間色)的花球。在一些方面，花球的顏色可以在皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡上的顏色13A到22D所涵蓋的范圍內(nèi)。在一些方面，花球的顏色可以是皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡上的大約16B。在一些方面，花球的顏色可以是皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡上的16B。
在一些實(shí)施方案中，包含本發(fā)明的白莖性狀的植物可以是雜種植物或近交植物。在本發(fā)明進(jìn)一步的實(shí)施方案中，提供了本發(fā)明的植物的植物部分。在一個(gè)方面，植物部分可以是頭部(head)或花球(curd)。在其它方面，植物部分可以是葉、小花、胚珠、花粉或細(xì)胞。在特定方面，提供了包含白莖性狀的植物的種子。
在本發(fā)明的另一方面，提供了包含能夠表達(dá)白莖性狀的可再生細(xì)胞的組織培養(yǎng)物。組織培養(yǎng)物能夠再生為表達(dá)包含白莖性狀的植物的所有生理學(xué)和形態(tài)學(xué)特征的植物。這樣的組織培養(yǎng)物中的可再生細(xì)胞可以來源于例如胚、分生組織、子葉、花粉、葉、花藥、根、根尖、雌蕊、花、小花、種子和柄。
在一些實(shí)施方案中，在本文中定義為白莖性狀的表型性狀的組合可以被定義為由單基因隱性等位基因所控制。
在再進(jìn)一步的實(shí)施方案中，提供了將白莖性狀滲入甘藍(lán)的種、亞種、栽培種和/或變種內(nèi)的方法。白莖性狀可以滲入包括西蘭花、花椰菜、卷心菜、羽衣甘藍(lán)、抱子甘藍(lán)、芥藍(lán)或無頭甘藍(lán)在內(nèi)的甘藍(lán)的任何亞種、栽培種和/或變種內(nèi)。在特定實(shí)施方案中，白莖性狀可以滲入花椰菜內(nèi)，特別是滲入具有如美國專利申請公開號2008-0127362(Boon等人)所述的持久白色性狀的花椰菜變種內(nèi)。
在另外的方面，提供了根據(jù)本發(fā)明產(chǎn)生包含白莖性狀的植物的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法包括將包含賦予白莖性狀的至少第一等位基因的植物與第二植物雜交。在一些方面，第二植物可以包含至少一種所需性狀。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，“雜交”的第一步包括種植第一和第二親本植物的種子，通常彼此靠近地種植，以使得將會(huì)發(fā)生授粉，例如由昆蟲媒介介導(dǎo)?；蛘?，可以手工傳遞花粉。
第二步可以包括使第一和第二親本植物的種子栽培或生長成開花植物。第三步可以包括防止植物的自花授粉，例如通過將花朵的雄性部分去雄(即，處理或操作花朵以產(chǎn)生去雄的親本植物)。自交不親和性系統(tǒng)也可以用于同一目的。自交不親和植物脫落可育的花粉且具有能育的胚珠，并且能夠給其它品種的植物授粉或被其它品種的植物授粉，但是不能給自身或同一品系的其它植物授粉。Fl后代可以由雜交產(chǎn)生。
培育包含白莖性狀的植物的第三步可包括選擇包含賦予白莖性狀的等位基因的Fl后代。培育具有白莖性狀的植物的第四步可包括使選定的Fl后代或其以后的后代自交，以重獲對于所述等位基因而言為純合的并且表達(dá)白莖性狀的后代植物。本發(fā)明還提供通過這樣的方法產(chǎn)生的植物。
在另外的方面，提供了將所需性狀引入本發(fā)明的植物中的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，引入所需性狀的第一步包括將包含賦予白莖性狀的至少第一等位基因的植物與能夠與包含第一等位基因的植物雜交的第二植物雜交。第二步可包括選擇包含所述等位基因的Fl后代。第三步可包括將選定的Fl后代植物與其自身或另一植物雜交。在特定實(shí)施方案中，可以利用回交重獲已滲入白莖性狀的具有所需基因型的植物。因此，第四步可包括選擇對于所述等位基因而言為純合的并且包含回交中使用的輪回親本的基本上全部性狀的回交后代。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案提供了一種無性繁殖包含和/或表達(dá)白莖性狀的植物的方法。植物的無性繁殖可包括從包含和/或表達(dá)白莖性狀的植物收集能夠繁殖的組織。植物的無性繁殖可進(jìn)一步包括培養(yǎng)所述組織以獲得增殖的幼苗。這樣的植物的無性繁殖另外還可包括使所述增殖的幼苗生根以獲得生根的小植物(Plantlets)。任選地，生根的小植物 可以長成植物。
在本發(fā)明的另一方面，提供了包含白莖性狀和增加的可遺傳性狀的植物。可遺傳性狀可包含例如為顯性或隱性等位基因的遺傳基因座。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，包含白莖性狀的植物被定義為包含單基因座轉(zhuǎn)換。在本發(fā)明的特定實(shí)施方案中，增加的遺傳基因座賦予一種或多種性狀，例如除草劑耐受性、昆蟲抗性、抗病性、雄性不育性和改變的碳水化合物代謝。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，性狀可以由通過回交引入品系基因組內(nèi)的天然存在的基因、天然或誘導(dǎo)的突變或通過遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)引入植物或其以前任一代的祖先內(nèi)的轉(zhuǎn)基因所賦予。當(dāng)通過轉(zhuǎn)化引入時(shí)，遺傳基因座可包含在單染色體位置整合的一個(gè)或多個(gè)基因。
本發(fā)明還提供通過下述方法產(chǎn)生的種子和植物，所述方法包括將第一親本植物與第二親本植物雜交，其中第一或第二親本植物中的至少一個(gè)為包含白莖性狀的植物。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，通過該方法產(chǎn)生的種子和植物是通過將本發(fā)明的植物與另一不同的植物雜交而產(chǎn)生的第一代(F1)雜種種子和植物。本發(fā)明進(jìn)一步涉及這樣的F1雜種植物的植物部分及其使用方法。因此，本發(fā)明的某些示例性實(shí)施方案提供匕雜種植物及其種子。在再一方面，本發(fā)明提供一種產(chǎn)生由包含白莖性狀的植物衍生的植物的方法，該方法包括以下步驟(a)準(zhǔn)備由包含白莖性狀的植物衍生的后代植物，其中所述準(zhǔn)備包括將包含白莖性狀的植物的植物與第二植物雜交；和(b)將該后代植物與其自身或第二植物雜交以產(chǎn)生下一代的后代植物的種子。在某些實(shí)施方案中，包含白莖性狀的植物是雌性親本。在其它實(shí)施方案中，包含白莖性狀的植物是雄性親本。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，該方法另外還可包括(C)由所述下一代的后代植物的種子生長下一代的后代植物，并且將該下一代的后代植物與其自身或第二植物雜交；并重復(fù)該步驟另外3-10代以產(chǎn)生由包含白莖性狀的植物衍生的植物。由包含白莖性狀的植物衍生的植物可以是近交系，并且上述重復(fù)雜交步驟可以被定義為包括充分的近交以產(chǎn)生近交系。在該方法中，可能希望選擇由步驟(C)獲得的特定植物，以根據(jù)步驟(b)和(C)繼續(xù)雜交。通過選擇具有一種或多種所需性狀的植物，獲得由包含白莖性狀的植物衍生的植物，該植物具有該品系的某些所需性狀以及可能的其它所選性狀。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種產(chǎn)生包含白莖性狀和增加的所需性狀的植物的方法。該方法可以包括將賦予所需性狀的轉(zhuǎn)基因引入包含白莖性狀的植物內(nèi)。在一些方面，本發(fā)明提供包含白莖性狀和至少一種轉(zhuǎn)基因的植物。
在又一方面，本發(fā)明提供一種確定包含白莖性狀的植物的基因型的方法，所述方法包括檢測植物基因組中的至少第一多態(tài)性。本發(fā)明進(jìn)一步提供一種確定包含白莖性狀的植物的第一代后代的基因型的方法，包括檢測植物基因組中的至少第一多態(tài)性。在某些實(shí)施方案中，該方法可以包括檢測植物基因組中的多種多態(tài)性。該方法可以進(jìn)一步包括在計(jì)算機(jī)可讀介質(zhì)上存儲(chǔ)檢測多種多態(tài) 性的步驟的結(jié)果。本發(fā)明進(jìn)一步提供通過這樣的方法產(chǎn)生的計(jì)算機(jī)可讀介質(zhì)。
在本發(fā)明的特定實(shí)施方案中，此處提供的包含白莖性狀的植物是西蘭花品系BCH971-4的植物。在特定方面，西蘭花品系BCH 971-4的植物包含基本上為白色到奶油色的莖。在進(jìn)一步的方面，西蘭花品系BCH 971-4的植物包含黃色到橙色的花球。
在本發(fā)明再進(jìn)一步的方面，提供了西蘭花品系BCH 971-4的植物，該植物具有比西蘭花品種Sibsey (RS05950001，Bellaverde )的莖、葉柄和/或葉脈明顯更白的莖、葉柄和/或葉脈顏色。在一些實(shí)施方案中，莖、葉柄和/或葉脈的顏色可以在皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡上的顏色155A到15 所涵蓋的范圍內(nèi)。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，西蘭花品系BCH971-4的植物可以包含被定義為具有根據(jù)皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡為大約155C的莖和葉脈顏色的莖、葉柄和/或葉脈。在本發(fā)明再進(jìn)一步的實(shí)施方案中，提供了顯示黃色到橙色(包括中間色)花球的西蘭花植物。在一些實(shí)施方案中，花球的顏色可以在皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡上的顏色13A到22D所涵蓋的范圍內(nèi)。在特定實(shí)施方案中，通過用皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡測量，花球的顏色可以被定義為16B。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，西蘭花品系BCH 971-4的植物可以被定義為具有在收獲時(shí)外部基本為白色而內(nèi)部為淺綠色的莖。莖在烹調(diào)后外部可以保持白色。在本發(fā)明再進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明的植物的葉柄為白色或基本為白色。在一些方面，在植物具有第一片真葉的發(fā)育階段之時(shí)或之前存在白色或基本為白色的葉柄。在進(jìn)一步的方面，子葉的葉柄為白色或基本為白色。
在再進(jìn)一步的實(shí)施方案中，西蘭花品系BCH 971-4的植物產(chǎn)生綠色或淺綠色的葉。在一些方面，在植物具有第一片真葉的發(fā)育階段之時(shí)或之前存在綠色或淺綠色的葉顏色。在特定方面，根據(jù)本發(fā)明的植物的葉脈為白色或基本為白色。在另外的方面，在植物具有第一片真葉的發(fā)育階段之時(shí)或之前存在白色葉脈。在一些方面，子葉中存在白色或基本為白色的葉脈。
在另一方面，本發(fā)明提供西蘭花品系BCH 971-4的植物，其顯示出下述性狀的組合，所述組合包含在收獲時(shí)外部為白色而內(nèi)部為淺綠色的莖；烹調(diào)后莖的外部仍然保持白色的植物；具有黃色到橙色花球的植物；和具有包含白色葉脈和葉柄的綠色或淺綠色葉的植物。在一些實(shí)施方案中，表型性狀的組合可以被定義為由單基因隱性等位基因所控制。
在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，包含白莖性狀的西蘭花植物可以是西蘭花品系BCH971-4，所述西蘭花品系BCH 971-4的種子樣品已經(jīng)以ATCC保藏號PTA-10298保藏。在一些實(shí)施方案中，包含白莖性狀的植物可以是西蘭花品系BCH 971-4的后代，包括由BCH 971-4衍生的西蘭花和花椰菜植物，如小花花椰菜植物。
在各個(gè)方面，西蘭花品系BCH 971-4的植物可以作為任何祖先世代的親本品系用于培育包含白莖性狀的西蘭花或花椰菜植物。在一些方面，西蘭花品系BCH 971-4的后代可以作為西蘭花或花椰菜植物用于培育包含白莖性狀的西蘭花或花椰菜植物，如小花花椰菜植物。另外，可以利用本發(fā)明的方法將所需性狀引入西蘭花品系BCH 971-4或其后代中。
在又一方面，本發(fā)明提供長成如本文所述的包含白莖性狀的西蘭花或花椰菜植物的種子。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含白莖性狀和亮白性狀的花椰菜植物，它進(jìn)一步可以是小花花椰菜。在本發(fā)明進(jìn)一步的實(shí)施方案中，提供了本發(fā)明的植物的植物部分。在一個(gè)方面，該植物部分可以是西蘭花或花椰菜的頭部。在其它方面，該植物部分可以是葉、小花、胚珠、花粉、花球或細(xì)胞。在各個(gè)方面，提供了西蘭花品系BCH 971-4的種子或其后代。西蘭花品系BCH 971-4的植物可以用于產(chǎn)生種子，并且在一些實(shí)施方案中，由西蘭花品系BCH 971-4產(chǎn)生的種子可以是雜種。
在某些實(shí)施方案中，表現(xiàn)出白莖性狀的甘藍(lán)植物是還包含亮白(brilliant·white, BW)性狀的花椰菜(Brassica oleracea var. botrytis)植物。在另外其它的實(shí)施方案中，該花椰菜植物可以進(jìn)一步包含小花性狀。
本發(fā)明的另一方面提供一種產(chǎn)生種子的方法，包括以下步驟(a)將根據(jù)權(quán)利要求
I的植物與其自身或與能夠與之雜交的第二植物雜交；和(b)使種子形成，其中根據(jù)權(quán)利要求
I的植物是西蘭花品系BCH 971-4的植物，所述西蘭花品系的種子樣品已經(jīng)以ATCC保藏號PTA-10298保藏，并且進(jìn)一步地其中所述第二植物是包含亮白(BW)性狀的花椰菜品系植物。在該方法的特定實(shí)施方案中，第二植物是以NCIMB保藏號41430保藏的花椰菜品系CLP/NY6633 (02 :310-2)的植物。本發(fā)明的進(jìn)一步的方面提供一種產(chǎn)生具有白莖的小花花椰菜植物的方法，所述方法包括(a)將包含當(dāng)純合態(tài)時(shí)賦予白莖的至少第一等位基因的西蘭花植物與包含小花性狀和亮白性狀的花椰菜植物雜交，產(chǎn)生Fl后代；(b)選擇包含該等位基因的至少第一 Fl后代；(c)使所述后代或其以后的后代自交，以重獲對于所述等位基因而言為純合的并且包含所述白莖和小花花椰菜表型的后代花椰菜植物。
本發(fā)明的另一方面提供一種產(chǎn)生花椰菜的方法，包括(a)獲得表現(xiàn)出白莖性狀的甘藍(lán)植物，其中該植物是花椰菜植物；和(b)從該植物收集花椰菜。
除非特別指出，此處對于本發(fā)明一個(gè)方面討論的任意實(shí)施方案也適用于本發(fā)明的其它方面。
術(shù)語“大約”用來表示一個(gè)值包括用來確定該值的裝置或方法的標(biāo)準(zhǔn)誤差。在權(quán)利要求
中術(shù)語“或”的使用用來表示“和/或”，除非明確指出僅指備選物或者備選物互相排斥，盡管該公開內(nèi)容支持僅指代備選物以及指代“和/或”的定義。當(dāng)在權(quán)利要求
中與用語“包含”或其它開放式用語一起使用時(shí)，除非特別指出，用語“一個(gè)”和“一種”表示“一個(gè)或多個(gè)/ 一種或多種”。術(shù)語“包含”、“具有”和“包括”是開放式的連系動(dòng)詞。這些動(dòng)詞中的一種或多種的任何形式或時(shí)態(tài)，如“包含”、“具有”、“包括”也是開放式的。例如，任何“包含”、“具有”或“包括”一個(gè)或多個(gè)步驟的方法不限于僅具有這一個(gè)或多個(gè)步驟，也涵蓋其它未列出的步驟。類似地，任何“包含”、“具有”或“包括” 一種或多種性狀的植物不限于僅具有這一種或多種性狀，也涵蓋其它未列出的性狀。
在本發(fā)明的特定實(shí)施方案中，可以按照皇家園藝學(xué)會(huì)(RHS)比色卡上的色值描述植物或其任何性狀。該比色卡及其應(yīng)用是本領(lǐng)域公知的。本領(lǐng)域技術(shù)人員進(jìn)一步周知，其它顏色評價(jià)系統(tǒng)可以獲得，并可用來描述關(guān)于任何特定植物或其性狀的顏色，包括本文描述的那些。
通過以下詳細(xì)描述，本發(fā)明的其它目的、特征和優(yōu)點(diǎn)將是顯然的。然而應(yīng)當(dāng)理解，詳細(xì)的描述和提供的任何具體實(shí)例盡管指明了本發(fā)明的具體實(shí)施方案，但是它們只是通過舉例說明給出的，因?yàn)楦鶕?jù)該詳細(xì)描述，在本發(fā)明宗旨和范圍內(nèi)的各種變化和變更對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說將是顯而易見的。


該專利或申請文件包含至少一幅彩色附圖或照片。具有彩色附圖的該專利或?qū)＠暾埞_文本的復(fù)制品將在請求并支付必要的費(fèi)用后由專利局提供。
圖I是表達(dá)白莖性狀的植物的表型的代表性照片。示出了西蘭花品系BCH971-4(在左側(cè)，有四個(gè)柄)和對照品種Sibsey (RS05950001, Bellaverde ，在右側(cè)，有四 個(gè)柄)。該照片顯示西蘭花品系BCH 971-4具有白莖，而葉子具有白色葉柄和綠色的葉脈間組織。在西蘭花品系BCH 971-4的一些柄上，可見黃色花球。在Sibsey (RS05950001，Bellaverde )中，莖、花球、葉和葉脈均為綠色。該照片還顯示西蘭花品系BCH 971_4的葉子的綠色組織比Sibsey葉子的綠色組織具有更淺的綠色明暗度。
圖2是表達(dá)白莖性狀的植物的莖、葉和幼花球(young curd)的代表性照片。該照片顯示西蘭花品系BCH 971-4的莖、葉柄和葉脈為白色。該照片還顯示西蘭花品系BCH971-4的葉的葉脈間組織為綠色。該照片進(jìn)一步顯示西蘭花品系BCH 971-4的幼花球?yàn)槌赛S色。
圖3是表達(dá)白莖性狀的幼小西蘭花植物的照片。該照片顯示了西蘭花品系BCH971-4(四行幼苗，在空單元行的右側(cè))和除了不含白莖性狀外與BCH 971-4等基因的近交西蘭花品系(四行幼苗，在空單元行的左側(cè))。該照片顯示品系BCH 971-4的幼苗比等基因品系具有更黃的綠色明暗度。
圖4是表達(dá)白莖性狀的幼小花椰菜植物的照片。左側(cè)為通過BCH971-4與表現(xiàn)亮白性狀的花椰菜品系雜交，隨后針對花椰菜表型進(jìn)行選擇而產(chǎn)生的F2花椰菜植物。右側(cè)為正常的花椰菜。
發(fā)明詳述
本發(fā)明提供了具有白莖性狀的甘藍(lán)的亞種、栽培種和變種。本文所述的白莖性狀由單基因隱性等位基因所控制。
A.培育包含白苯件狀的棺物
本發(fā)明的一方面涉及產(chǎn)生具有白莖性狀的植物的方法。這些方法可以用于繁殖包含白莖性狀的植物，或者可以用來產(chǎn)生由這樣的植物衍生的植物。在某些實(shí)施方案中，由具有白莖性狀的植物衍生的植物可以用于開發(fā)西蘭花、花椰菜、卷心菜、羽衣甘藍(lán)、抱子甘藍(lán)、芥藍(lán)或無頭甘藍(lán)的新品種，或甘藍(lán)的任何其它亞種、栽培種或變種。
使用一種或多種起始品種開發(fā)新品種是本領(lǐng)域公知的。根據(jù)本發(fā)明，可以通過將具有白莖性狀的植物雜交，隨后根據(jù)這些公知方法進(jìn)行多代培育而創(chuàng)造新品種?？梢酝ㄟ^與任何第二植物雜交來創(chuàng)造新品種。在為了開發(fā)新品系而選擇這樣的第二植物進(jìn)行雜交時(shí)，可能希望選擇那些本身表現(xiàn)出一種或多種選定的所需特征或在雜種組合時(shí)表現(xiàn)出所需特征的植物。一旦進(jìn)行了初始雜交，則進(jìn)行近交和選擇以產(chǎn)生新品種。為了開發(fā)均一的品系，通常包括五代或更多代自交和選擇。
也可以通過雙單倍體的方式開發(fā)新品種的均一品系。該技術(shù)允許創(chuàng)造純育品系而不需要多代自交和選擇。以這種方式，可以在少至一代內(nèi)產(chǎn)生純育品系?？梢杂尚℃咦?、花粉、花藥培養(yǎng)物或子房培養(yǎng)物產(chǎn)生單倍體胚。單倍體胚然后可以自主加倍，或者通過化學(xué)處理(例如秋水仙堿處理)加倍。或者，單倍體胚可以長成單倍體植物并且進(jìn)行處理以誘導(dǎo)染色體加倍。在任一情況下，均獲得能育的純合植物。根據(jù)本發(fā)明，這些技術(shù)中的任一種均可用于本發(fā)明的植物及其后代以獲得純合品系。
也可以利用回交改良近交植物?；亟粚⑻囟ㄋ栊誀顝囊粋€(gè)近交或非近交來源轉(zhuǎn)移到缺乏該性狀的近交種。這可以如下實(shí)現(xiàn)例如，首先將優(yōu)良近交種(A)(輪回親本)與供體近交種(非輪回親本)雜交，后者攜帶針對目的性狀的一個(gè)或多個(gè)適當(dāng)?shù)幕蜃Ｔ撾s交的后代然后與該優(yōu)良輪回親本(A)回交，隨后在得到的后代中針對將從非輪回親本轉(zhuǎn)移的所需性狀進(jìn)行選擇。在包括針對所需性狀的選擇的5個(gè)或更多個(gè)回交代后，后代具有所轉(zhuǎn)移的特征，但是大多數(shù)或幾乎全部其它基因座類似于優(yōu)良親本。最后一個(gè)回交代將自交，從而得到對于所轉(zhuǎn)移的性狀而言的純育后代。
本發(fā)明的植物尤其適用于基于植物遺傳背景的優(yōu)良性質(zhì)開發(fā)新品系。在為了與包含白莖性狀的植物雜交而選擇第二植物時(shí)，一般優(yōu)選地選擇那些其本身表現(xiàn)出一種或多種選定的所需特征或在雜種組合時(shí)表現(xiàn)出所需特征的植物。在特定實(shí)施方案中，所需性狀的例子可以包括高頭部重量、小花尺寸、形狀和均勻性、小頭部尺寸、高圓頂頭部、密實(shí)頭部、光滑頭部、大頭部、早熟、高種子產(chǎn)率、高種子發(fā)芽、幼苗活力、高產(chǎn)率、病害耐受性或抗性以及對土壤和氣候條件的適應(yīng)性。消費(fèi)者驅(qū)動(dòng)的性狀，如營養(yǎng)價(jià)值和味道，是可以引入根據(jù)本發(fā)明開發(fā)的新植物中的其它性狀。
B.本發(fā)明講一步的實(shí)施方案
本發(fā)明提供經(jīng)改良包括至少第一所需可遺傳性狀的植物。在一個(gè)實(shí)施方案中，這樣的植物可以通過被稱為回交的植物育種技術(shù)而開發(fā)，其中除了通過回交技術(shù)轉(zhuǎn)移到植物中的遺傳基因座外，還恢復(fù)了品種的基本上全部所需形態(tài)學(xué)和生理學(xué)特征。本文使用的術(shù)語單基因座轉(zhuǎn)換的植物是指那些通過被稱為回交的植物育種技術(shù)開發(fā)的植物，其中除了通過回交技術(shù)轉(zhuǎn)移到植物中的單基因座外，還恢復(fù)了品種的基本上全部所需形態(tài)學(xué)和生理學(xué) 特征?；旧先克栊螒B(tài)學(xué)和生理學(xué)特征的意思是，在相同環(huán)境中比較時(shí)以其它方式存在的植物的這些特征得到恢復(fù)，而不是回交或直接引入轉(zhuǎn)基因過程中可能出現(xiàn)的偶然變異性狀。
回交方法可以用于本發(fā)明以改善特征或?qū)⑻卣饕氍F(xiàn)有的品種，例如將特征引入具有白莖性狀的植物?；亟环椒ㄒ仓豢梢杂脕韺浊o性狀滲入甘藍(lán)的不同亞種、栽培種或變種。貢獻(xiàn)所需特征的基因座的親本植物被稱為非輪回或供體親本。該術(shù)語是指非輪回親本在回交方案中使用一次并因此不再使用的事實(shí)。來自非輪回親本的一個(gè)或多個(gè)基因座被轉(zhuǎn)移至的親本植物被稱為輪回親本，因?yàn)樗诨亟环桨钢惺褂脭?shù)輪。
在典型的回交方案中，原目標(biāo)品種(輪回親本)與攜帶待轉(zhuǎn)移的單目標(biāo)基因座的第二品種(非輪回親本)雜交。該雜交得到的后代然后再次與輪回親本雜交，重復(fù)該過程直到獲得其中除了來自非輪回親本的單轉(zhuǎn)移基因座以外在轉(zhuǎn)換的植物中還恢復(fù)了輪回親本的基本全部所需形態(tài)學(xué)和生理學(xué)特征的植物。
合適的輪回親本的選擇是成功的回交程序的重要步驟?；亟环桨傅哪康氖歉淖兓蛑脫Q原品種中的單一性狀或特征。為了實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)，用來自非輪回親本的所需基因座修飾或替換輪回品種的單基因座，同時(shí)保留原品種的基本上全部的其余所需遺傳組成，因此保留原品種的所需生理學(xué)和形態(tài)學(xué)組成。具體的非輪回親本的選擇將取決于回交的目的；一個(gè)主要目的是給植物增加一些商業(yè)上期望的性狀。確切的回交方案將取決于所改變的特征或性狀以及輪回和非輪回親本之間的遺傳距離。盡管當(dāng)所轉(zhuǎn)移的特征是顯性等位基因時(shí)回交方法得到簡化，但是也可以轉(zhuǎn)移隱性等位基因或加性等位基因(在隱性和顯性之間)。在這一情況下，可能必須引入對后代的檢測，來確定所需特征是否已經(jīng)成功轉(zhuǎn)移。
也可以對包含白莖性狀的植物使用改良回交(modified backcrossing)。該技術(shù)在回交期間使用不同的輪回親本?？梢岳酶牧蓟亟粚⒃驾喕赜H本替換為具有某些更期望的特征的品種，或者可以使用多個(gè)親本來獲得來自每一個(gè)親本的不同的所需特性。
已經(jīng)鑒定了許多單基因座性狀，它們在新近交種的開發(fā)中不被常規(guī)地·(regularly)選擇，但是可以通過回交技術(shù)被改進(jìn)。單基因座性狀可以是或者可以不是轉(zhuǎn)基因的；這些性狀的例子包括但不限于除草劑抗性，對細(xì)菌、真菌或病毒病的抗性，昆蟲抗性，改變的脂肪酸或碳水化合物代謝，以及改變的營養(yǎng)質(zhì)量。這些包括通常通過細(xì)胞核遺傳的基因。
在單基因座作為顯性性狀時(shí)可以應(yīng)用直接選擇。對于該選擇過程，在回交之前對初始雜交的后代檢測其病毒抗性和/或相應(yīng)基因的存在。選擇消除了任何不具有所需基因和抗性性狀的植物，只有那些具有該性狀的植物在后續(xù)回交中使用。然后在全部另外的回交世代中重復(fù)該過程。
用于育種的西蘭花植物的選擇不一定依賴于植物的表型，而是可以基于遺傳調(diào)查。例如，人們可以利用與目標(biāo)性狀緊密遺傳連鎖的合適的遺傳標(biāo)記。這些標(biāo)記之一可以用來鑒定特定雜交后代中性狀的存在或缺乏，并且可以在用于連續(xù)育種的后代的選擇中使用。該技術(shù)通常被稱為標(biāo)記輔助的選擇。任何其它類型的遺傳標(biāo)記或其它能夠確定植物中目標(biāo)性狀的相對存在或缺失的試驗(yàn)也可用于育種目的。標(biāo)記輔助的選擇的程序是本領(lǐng)域中公知的。這些方法尤其可用于隱性性狀和可變表型的情況，或常規(guī)試驗(yàn)可能更昂貴、耗時(shí)或存在其它缺點(diǎn)的情況。能夠根據(jù)本發(fā)明使用的遺傳標(biāo)記的類型包括但不一定限于簡單序列長度多態(tài)性(SSLPs) (Williams等人，1990)、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNAs (RAPDs)、DNA擴(kuò)增指紋分析(DAF)、序列表征的擴(kuò)增區(qū)(SCARs)、任意引物聚合酶鏈反應(yīng)(AP-PCR)、擴(kuò)增片段長度多態(tài)性(AFLPs) (EP 534 858，特別通過引用整體并入本文)和單核苷酸多態(tài)性(SNPs) (Wang等人，1998)。
C.通過遺傳工稈產(chǎn)牛的棺物
許多能夠通過回交引入以及直接引入植物中的有用的性狀是那些通過遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)引入的性狀。因此遺傳轉(zhuǎn)化可以用于將選定的轉(zhuǎn)基因插入到本發(fā)明的植物中，或者可以替代地用于制備能夠通過回交引入的轉(zhuǎn)基因。本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的、適用于許多作物種的植物轉(zhuǎn)化方法包括但不限于電穿孔、微粒轟擊、農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化和原生質(zhì)體直接攝取 DNA。[0067]為了通過電穿孔實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化，人們可以使用易碎組織，如細(xì)胞或胚發(fā)生愈傷組織的懸浮培養(yǎng)物，或者人們也可以直接轉(zhuǎn)化未成熟胚或其它組織化的組織。在該技術(shù)中，人們通過將其暴露于果膠降解酶(溶果膠酶)部分地降解所選細(xì)胞的細(xì)胞壁或者以受控方式機(jī)械地創(chuàng)傷組織。
將轉(zhuǎn)化DNA區(qū)段遞送給植物細(xì)胞的一種有效的方法是微粒轟擊。在該方法中，微粒用核酸涂覆，并且通過推進(jìn)力將其遞送到細(xì)胞內(nèi)。示例性的微粒包括由鎢、鉬和優(yōu)選的金組成的微粒。為了轟擊，在過濾器或固體組織培養(yǎng)基上濃縮懸浮液中的細(xì)胞?；蛘撸闯墒炫呋蚱渌屑?xì)胞可以排列在固體組織培養(yǎng)基上。待轟擊的細(xì)胞放置在微粒擋板下方適當(dāng)?shù)木嚯x處。
通過加速將DNA遞送到植物細(xì)胞內(nèi)的方法的說明性實(shí)施方案是生物射彈微粒遞送系統(tǒng)，它可以用來推動(dòng)涂覆有DNA的微粒或細(xì)胞通過篩網(wǎng)，例如不銹鋼或Nytex篩網(wǎng)，到達(dá)覆蓋有靶細(xì)胞的表面上。篩網(wǎng)將微粒分散，使得它們不被遞送到大聚集體中的受體細(xì)胞。相信介于發(fā)射裝置與待轟擊細(xì)胞之間的篩網(wǎng)減小了發(fā)射聚集體的大小，并且可以通過減少過大的發(fā)射體對受體細(xì)胞造成的損傷而導(dǎo)致較高的轉(zhuǎn)化頻率。微粒轟擊技術(shù)廣泛適用，并 且可以用來轉(zhuǎn)化實(shí)際上任何植物物種。
農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)移是另一種廣泛適用的用于將基因座引入植物細(xì)胞內(nèi)的系統(tǒng)。該技術(shù)的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是DNA可以被引入完整植物組織中，從而不需要從原生質(zhì)體再生完整的植物?，F(xiàn)代的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化載體能夠在大腸桿菌以及農(nóng)桿菌中復(fù)制，從而允許便捷的操作(Klee等人，1985)。而且，用于農(nóng)桿菌介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移的載體的最新技術(shù)進(jìn)展改善了載體中基因和限制性位點(diǎn)的排列，以便于能夠表達(dá)各種多肽編碼基因的載體的構(gòu)建。所述載體具有方便的多連接體區(qū)域，該區(qū)域的側(cè)翼為用于直接表達(dá)插入的多肽編碼基因的啟動(dòng)子和多腺苷酸化位點(diǎn)。另外，含有致瘤的(armed)和非致瘤的Ti基因的農(nóng)桿菌可用于轉(zhuǎn)化。
在農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化有效的植物株系中，這是選擇的方法，因?yàn)榛蜃D(zhuǎn)移具有易行和確定的性質(zhì)。農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物整合載體將DNA引入植物細(xì)胞中的應(yīng)用是本領(lǐng)域中公知的(Fraley等人，1985 ;美國專利號5，563，055)。
植物原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)化也可以采用基于磷酸鈣沉淀、聚乙二醇處理、電穿孔以及這些處理的組合的方法來實(shí)現(xiàn)(參見，例如，Potrykus等人，1985 ；Omirulleh等人，1993 ；Fromm等人，1986 ；Uchimiya等人，1986 ；Marcotte等人，1988)。植物的轉(zhuǎn)化和外來遺傳元件的表達(dá)在Choi等人(1994)和Ellul等人(2003)中舉例說明。
有眾多的啟動(dòng)子可用于任何感興趣的基因的植物基因表達(dá)，感興趣的基因包括但不限于選擇性標(biāo)記，可評分標(biāo)記，害蟲耐受性、抗病性、營養(yǎng)提高基因，以及任何其它具有農(nóng)學(xué)意義的基因。可用于驅(qū)動(dòng)植物中基因表達(dá)的組成型啟動(dòng)子的例子包括但不限于花椰菜花葉病毒(CaMV)P-35S啟動(dòng)子，它導(dǎo)致大多數(shù)植物組織中的組成型、高水平表達(dá)(參見，例如，Odel等人，1985),所述植物包括單子葉植物(參見,例如，Dekeyser等人，1990 ；Terada和Shimamoto，1990);串聯(lián)重復(fù)形式的CaMV 35S啟動(dòng)子、增強(qiáng)的35S啟動(dòng)子(P_e35S)、月因脂堿合酶啟動(dòng)子(An等人，1988)、章魚堿合酶啟動(dòng)子(Fromm等人，1989);和如美國專利號5，378，619中所述的玄參花葉病毒(P-FMV)啟動(dòng)子，以及FMV啟動(dòng)子的增強(qiáng)形式(P-eFMV)(其中P-FMV的啟動(dòng)子序列串聯(lián)重復(fù))，花椰菜花葉病毒19S啟動(dòng)子,甘鹿桿狀病毒啟動(dòng)子，鴨跖草黃斑駁病毒啟動(dòng)子，和已知在植物細(xì)胞中表達(dá)的其它植物DNA病毒啟動(dòng)子。[0074]響應(yīng)環(huán)境、激素、化學(xué)和/或發(fā)育信號而被調(diào)節(jié)的多種植物基因啟動(dòng)子可用于在植物細(xì)胞中表達(dá)可操作連接的基因，包括由以下因素調(diào)節(jié)的啟動(dòng)子(I)熱(Callis等人，1988), (2)光(例如，豌豆rbcS_3A啟動(dòng)子，Kuhlemeier等人，1989 ;玉米rbcS啟動(dòng)子，Schaffner和Sheen, 1991 ;或葉綠素a/b_結(jié)合蛋白啟動(dòng)子，Simpson等人，1985), (3)激素，如脫落酸(Marcotte 等人，1989)，(4)創(chuàng)傷(例如，wunl, Siebertz 等人，1989);或(5)化學(xué)物質(zhì)，如茉莉酸甲酯、水楊酸或安全劑。使用器官特異性啟動(dòng)子也可能是有利的(例如，Roshal 等人，1987 ;Schernthaner 等人，1988 ；Bustos 等人，1989)。
可以引入本發(fā)明的植物中的示例性核酸包括，例如，來自另一物種的DNA序列或基因，或者甚至來源于同一物種或存在于同一物種中，但是通過經(jīng)典繁殖或育種技術(shù)以外的遺傳工程方法摻入受體細(xì)胞內(nèi)的基因或序列。然而，術(shù)語“外源的”還意指正常情況下不存在于所轉(zhuǎn)化的細(xì)胞中或者也許只是不以在轉(zhuǎn)化DNA區(qū)段或基因中發(fā)現(xiàn)的形式、結(jié)構(gòu)等存在的基因，或者正常情況下存在并且希望以不同于天然表達(dá)模式的方式表達(dá)(例如過量表達(dá))的基因。因此，術(shù)語“外源”基因或DNA意指任何引入受體細(xì)胞中的基因或DNA區(qū)段，無論類似的基因是否已經(jīng)存在于這種細(xì)胞中。外源DNA中包括的DNA的類型可以包括已經(jīng)存在于植物細(xì)胞中的DNA、來自另一植物的DNA、來自不同生物體的DNA或外部產(chǎn)生的DNA， 如含有基因的反義信息的DNA序列，或編碼基因的合成或修飾形式的DNA序列。
已知成百上千種不同的基因，并且它們潛在地可被引入包含根據(jù)本發(fā)明的白莖性狀的植物中。人們可選擇用來向包含白莖性狀的植物中引入的特定基因和相應(yīng)表型的非限制性實(shí)例包括一種或多種昆蟲耐受性基因，如蘇云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis(B. t.))基因，害蟲耐受性如真菌病控制基因，除草劑耐受性如賦予草甘膦耐受性的基因，以及用于質(zhì)量改善的基因，如產(chǎn)率、營養(yǎng)增強(qiáng)、環(huán)境或應(yīng)激耐受性，或植物生理學(xué)、生長、發(fā)育、形態(tài)學(xué)或植物產(chǎn)物的任何期望的變化。例如，結(jié)構(gòu)基因?qū)ㄈ魏钨x予昆蟲耐受性的基因，包括但不限于如通過引用整體并入本文的WO 99/31248、通過引用整體并入本文的美國專利號5，689，052、通過引用整體并入本文的美國專利號5，500, 365和5，880，275中所述的芽孢桿菌昆蟲控制蛋白質(zhì)基因。在另一實(shí)施方案中，結(jié)構(gòu)基因可賦予對除草劑草甘膦的耐受性，該耐受性由包括但不限于如通過引用整體并入本文的美國專利號5，633，435中所述的農(nóng)桿菌CP4株草甘膦抗性EPSPS基因(aroA:CP4)或如通過引用整體并入本文的美國專利號5，463，175中所述的草甘膦氧化還原酶基因(GOX)的基因所賦予。
或者，DNA編碼序列可以通過編碼引起內(nèi)源基因表達(dá)的靶向抑制的不可翻譯的RNA分子，例如通過反義或共抑制介導(dǎo)的機(jī)制來影響這些表型(參見，例如，Bird等人，1991)。RNA也可以是工程化為切割所需內(nèi)源mRNA產(chǎn)物的催化性RNA分子(即，核酶)(參見，例如，Gibson和Shillito，1997)。因此，任何產(chǎn)生表達(dá)感興趣的表型或形態(tài)學(xué)變化的蛋白質(zhì)或mRNA的基因可用于本發(fā)明的實(shí)踐中。
D.具有白莖性狀的西蘭花植物的來源或培育史
在被命名為570462的專利西蘭花品系的培育過程中驚奇地發(fā)現(xiàn)了具有白莖和黃色到橙色花球的西蘭花植物。從570462的后代中選擇了三株具有白莖和黃色到橙色花球的植物。兩個(gè)這樣的品系(580700和580702)的各兩株植物在體外繁殖并且移植到籠子中的罐中(每個(gè)克隆移植總計(jì)6株植物)。使這24個(gè)完整植物通過自然昆蟲媒介彼此自由授粉。在對來自4個(gè)植株的48個(gè)后代的整體后代分析中，14株植物具有白色的莖和黃色到橙色的花球，而34株植物具有正常表型，表明為單基因隱性遺傳模式。后代的開發(fā)可以總結(jié)如下
品系541555 Fl 2 (PPMN) /2 (PLH42) NJA/MRA/MA x2 (PLH42) MA2/PPMN
品系55O298 F2 DEHELEGENEP00L-4.
品系56。383 F3 DEHELEGENEP00L-4. 2.
品系570462 F4 DEHELEGENEP00L-4· 2. 2.
品系580700 F5 DEHELEGENEP00L-4· 2. 2. I.
品系580702 F5 DEHELEGENEP00L-4· 2. 2. 3.
E.包含白萃性狀的西蘭花植物的生理學(xué)和形態(tài)學(xué)特征
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了具有白莖性狀的西蘭花植物。這樣的植物的一個(gè)例子是西蘭花品系BCH 971-4，它具有白色的莖和黃色到橙色的花球。對該品系的生理學(xué)和形態(tài)學(xué)特征的描述在表I中列出。
表I :西蘭花品系BCH 971-4的生理學(xué)和形態(tài)學(xué)特征
權(quán)利要求
1.一種表現(xiàn)出白莖性狀的甘藍(lán)植物。
2.權(quán)利要求
I的植物，其中所述植物是雜種。
3.權(quán)利要求
I的植物，其中所述植物是近交種。
4.權(quán)利要求
I的植物，進(jìn)一步包含賦予雄性不育性的等位基因。
5.權(quán)利要求
I的植物，其中所述植物包含轉(zhuǎn)基因。
6.權(quán)利要求
I的植物，其中所述植物包含單基因座轉(zhuǎn)換。
7.權(quán)利要求
I的植物的植物部分。
8.權(quán)利要求
7的植物部分，進(jìn)一步被定義為葉、小花、胚珠、花粉、細(xì)胞、花球或頭部。
9.一種種子,其長成權(quán)利要求
I的植物。
10.權(quán)利要求
I的植物的可再生細(xì)胞的組織培養(yǎng)物。
11.根據(jù)權(quán)利要求
10的組織培養(yǎng)物,包含來自植物部分的細(xì)胞或原生質(zhì)體,該植物部分選自胚、分生組織、子葉、花粉、葉、花藥、根、根尖、雌蕊、花、小花、花球、種子和柄。
12.由權(quán)利要求
11的組織培養(yǎng)物再生的植物，其中所述再生的植物包含白莖性狀。
13.一種無性繁殖權(quán)利要求
I的植物的方法，包括以下步驟 (a)收集能夠從權(quán)利要求
I的植物繁殖的組織； (b)培養(yǎng)所述組織以獲得增殖的幼苗；和 (C)使所述增殖的幼苗生根以獲得生根的小植物。
14.權(quán)利要求
13的方法，進(jìn)一步包括由所述生根的小植物生長成植物。
15.一種將所需性狀引入權(quán)利要求
I的植物內(nèi)的方法，包括 (a)將根據(jù)權(quán)利要求
I的植物與包含所需性狀的第二植物雜交，以產(chǎn)生Fl后代； (b)選擇包含所需性狀的Fl后代； (c)將選定的Fl后代與同根據(jù)權(quán)利要求
I所述的植物相同品種的植物雜交，以產(chǎn)生回交后代；和 (d)連續(xù)重復(fù)步驟(C)和⑷三次或更多次，以產(chǎn)生選擇的包含所需性狀的第四代或更高代回交后代。
16.通過權(quán)利要求
15的方法產(chǎn)生的植物。
17.—種產(chǎn)生包含增加的所需性狀的植物的方法，該方法包括將賦予所需性狀的轉(zhuǎn)基因引入根據(jù)權(quán)利要求
I的植物中。
18.—種產(chǎn)生種子的方法，包括以下步驟 (a)將根據(jù)權(quán)利要求
I的植物與其自身或能夠與之雜交的第二植物雜交；和 (b)使種子形成。
19.權(quán)利要求
18的方法，進(jìn)一步包括以下步驟 (C)將由步驟(b)的所述種子長成的植物與其自身或第二植物雜交至少另外一次，以產(chǎn)生另外的種子。
20.權(quán)利要求
I的甘藍(lán)植物，其中該植物是西蘭花(Brassicaoleracea var. italica)植物。
21.權(quán)利要求
I的甘藍(lán)植物，其中該植物是花椰菜(Brassicaoleracea var.botrytis)植物。
22.權(quán)利要求
18的方法，其中根據(jù)權(quán)利要求
I的植物是西蘭花品系BCH971-4的植物，所述西蘭花品系的種子樣品已經(jīng)以ATCC保藏號PTA-10298保藏。
23.—種產(chǎn)生具有白莖和黃色到橙色花球的西蘭花植物的方法，所述方法包括 (a)將包含在純合態(tài)時(shí)賦予白莖和黃色到橙色花球的至少第一等位基因的西蘭花植物與第二西蘭花植物雜交，以產(chǎn)生Fl后代； (b)選擇包含所述等位基因的至少第一Fl后代； (c)使所述后代或其以后的后代自交，以重獲對于所述等位基因而言為純合的并且包含所述白莖和黃色到橙色花球的后代西蘭花植物。
24.權(quán)利要求
23的方法，其中所述第一等位基因遺傳自西蘭花品系BCH971-4或其任一代包含來自西蘭花品系BCH 971-4的所述等位基因的后代，所述西蘭花品系BCH 971-4的種子樣品已經(jīng)以ATCC保藏號PTA-10298保藏。
25.權(quán)利要求
18的方法，其中所述第二植物是近交西蘭花品系的植物。
26.以品系BCH971-4的植物作為一個(gè)親本的Fl雜種種子，其中所述西蘭花品系的種子樣品已經(jīng)以ATCC保藏號PTA-10298保藏。
27.權(quán)利要求
26的Fl雜種種子，其中所述品系BCH971-4的植物是雄性親本。
28.權(quán)利要求
26的Fl雜種種子，其中所述品系BCH971-4的植物是雌性親本。
29.通過生長權(quán)利要求
26的種子產(chǎn)生的植物。
30.權(quán)利要求
29的植物的植物部分。
31.權(quán)利要求
30的植物部分，進(jìn)一步被定義為西蘭花的葉、小花、胚珠、花粉、細(xì)胞、花球或頭部。
32.—種產(chǎn)生西蘭花的方法,包括 (a)獲得權(quán)利要求
I的植物；和 (b)從所述植物收集西蘭花。
33.權(quán)利要求
20的西蘭花植物，其中所述植物表達(dá)西蘭花品系BCH971-4的所有生理學(xué)和形態(tài)學(xué)特征，所述品種的種子樣品已經(jīng)以ATCC保藏號PTA-10298保藏。
34.權(quán)利要求
20的西蘭花植物，其中所述植物是西蘭花品系BCH971-4的植物，所述西蘭花品系BCH 971-4的種子樣品已經(jīng)以ATCC保藏號PTA-10298保藏。
35.權(quán)利要求
9的種子，進(jìn)一步被定義為西蘭花品系BCH971-4的種子，所述西蘭花品系BCH 971-4的種子樣品已經(jīng)以ATCC保藏號PTA-10298保藏。
36.權(quán)利要求
I的甘藍(lán)植物，其中所述植物是進(jìn)一步被定義為包含亮白(BW)性狀的花椰菜(Brassica oleracea var. botrytis)植物。
37.通過生長權(quán)利要求
36的植物的種子產(chǎn)生的植物。
38.權(quán)利要求
18的方法，其中根據(jù)權(quán)利要求
I的植物是西蘭花品系BCH971-4的植物，所述西蘭花品系的種子樣品已經(jīng)以ATCC保藏號PTA-10298保藏，并且進(jìn)一步地其中所述第二植物是包含亮白(BW)性狀的花椰菜品系的植物。
39.權(quán)利要求
38的方法，其中所述第二植物是已經(jīng)以NCMB保藏號41430保藏的花椰菜品系 CLP/NY6633 (02:310-2)的植物。
40.一種產(chǎn)生具有白莖的小花花椰菜植物的方法，所述方法包括 (a)將包含當(dāng)純合態(tài)時(shí)賦予白莖的至少第一等位基因的西蘭花植物與包含小花性狀和亮白性狀的花椰菜植物雜交，以產(chǎn)生Fl后代；(b)選擇包含所述等位基因的至少第一Fl后代； (c)使所述后代或其以后的后代自交，以重獲對于所述等位基因而言為純合的并且包含所述白莖和小花花椰菜表型的后代花椰菜植物。
41.一種產(chǎn)生花椰菜的方法,包括 (a)獲得權(quán)利要求
I的植物；和 (b)從所述植物收集花椰菜。
專利摘要
本發(fā)明提供包含白莖性狀的甘藍(lán)植物以及通過將這樣的植物與其自身或與另一植物如另一基因型的植物雜交而產(chǎn)生植物的方法。本發(fā)明進(jìn)一步涉及通過這樣的雜交產(chǎn)生的種子和植物。本發(fā)明還涉及這些植物的部分。
文檔編號A01H1/00GKCN102970861SQ201180023982
公開日2013年3月13日 申請日期2011年4月20日
發(fā)明者F·G·范登博希, M·P·布恩 申請人:塞米尼斯蔬菜種子公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan