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用于mon89788大豆疾病控制的方法

文檔序號(hào):73732閱讀:454來源:國(guó)知局

專利名稱::用于mon89788大豆疾病控制的方法用于MON89788大豆疾病控制的方法發(fā)明背景本申請(qǐng)要求享有2005年5月27日登記的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)No.60/685,548的優(yōu)先權(quán),并將該申請(qǐng)的全部公開內(nèi)容在此引入作為參考。1.發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及化學(xué)疾病控制領(lǐng)域。更具體地說是,本發(fā)明涉及一種通過向耐草甘膦大豆MON89788施加草甘膦或草甘膦與殺真菌劑的混合物來控制大豆病害的方法。2.相關(guān)技術(shù)介紹大豆,G/少c,"em"jc(L.)Merril,其作為植物油和蛋白質(zhì)的主要來源是世界范圍生長(zhǎng)的主要經(jīng)濟(jì)作物之一(Sinclair和Backman,1989)。對(duì)低膽固醇和高纖維飲食的需求的增長(zhǎng)也提高了大豆作為健康食品的重要性。在美國(guó),大豆產(chǎn)量由于疾病的作用而逐年減少。高的每公頃產(chǎn)量對(duì)農(nóng)民的利潤(rùn)幅度是至關(guān)重要的,尤其是在大豆價(jià)格低的時(shí)期。由大豆病害引起的財(cái)政損失對(duì)農(nóng)經(jīng)濟(jì)和對(duì)i^市地區(qū)的相關(guān)工業(yè)經(jīng)濟(jì)來i兌是重要的。人們認(rèn)為這些損失的影響終究會(huì)遍及全世界的大豆市場(chǎng)。在美國(guó)和安大略省,對(duì)由病害所導(dǎo)致的損失的估計(jì)值由于年與年的不同以及由于病害的不同而不同。/人1999年到2002年,美國(guó)的大豆產(chǎn)量損失估計(jì)在8百萬公噸到1億公噸的范圍內(nèi),安大略省的在90,000到166,000公噸的范圍內(nèi)(Wrather等人,2003)。在東半球和西半球均已經(jīng)才艮道發(fā)現(xiàn)了亞洲大豆銹病(本文稱其為ASR)。在東半球,澳大利亞、中國(guó)、印度、日本、臺(tái)灣和泰國(guó)均已經(jīng)報(bào)道發(fā)現(xiàn)了ASR。在西半球,巴西、哥倫比亞、哥斯達(dá)黎加、波多黎各與其它地區(qū)一起也均觀察到了ASR。ASR是一種破壞性的疾病,根據(jù)在臺(tái)灣一些地區(qū)的報(bào)道,其能夠?qū)е庐a(chǎn)量損失高達(dá)70到80%。嚴(yán)重感染的植林的豆莢較少且豆粒較小,也就是說其質(zhì)量差(Frederick等人,2002)。在美國(guó)首次觀察到ASR是于1994年在夏威夷。大概由于熱帶風(fēng)暴活動(dòng)的結(jié)果,后來ASR在2004年秋被引入美國(guó)大陸。模式預(yù)測(cè)顯示ASR已經(jīng)廣泛地分布在整個(gè)美國(guó)東南部,隨后的田間和實(shí)驗(yàn)室7見測(cè)證實(shí)了這一分布。N-膦酰曱基甘氨酸,又名草甘膦,是一種眾所周知的除草劑,其對(duì)許多植物種均有活性。草甘膦是Roundup(MonsantoCo.,St.Louis,MO)的活性成分,Roundup⑧是一種安全的除草劑,其在環(huán)境中具有所期望的短的半衰期。當(dāng)將其施加到植物表面時(shí),草甘膦能夠通過植物進(jìn)行全身性地轉(zhuǎn)移。草甘膦是植物毒性的,這是由于其對(duì)莽草酸途徑的抑制作用,草甘膦為芳香族胺基酸的合成提供了前體。草甘膦抑制了存在于植物中的酶5-烯醇式丙酮莽草酰-3-磷酸合酶(EPSPS)。草甘膦耐受性能夠通過EPSPS變種的表達(dá)而獲得,所述EPSPS變種對(duì)草甘膦具有較低的親和力并因此能夠在存在草甘膦時(shí)保持它們的催化活性(美國(guó)專利Nos.5,633,435;5,094,945;4,535,060和6,040,497)。將這樣的基因用于生產(chǎn)對(duì)草甘膦具有耐受性的轉(zhuǎn)基因作物,從而允許使用草甘膦來進(jìn)行有效地雜草控制并最小地引起作物損傷。例如,草甘膦耐受性已經(jīng)通過基因工程引入到了谷物(美國(guó)專利5,554,789)、小麥(美國(guó)專利6,689,880)、棉花(美國(guó)專利6,740,488)、大豆(WO9200377)和荒麻(US20040018518)中。已經(jīng)顯示,用草甘膦處理耐草甘膦禾谷類作物能夠減少發(fā)病率或嚴(yán)重度(US2005000654442和US2003000532758,在此引入以上兩篇文獻(xiàn)作為參考)。本發(fā)明提供了一種用草甘膦處理新的耐草甘膦大豆事件(event)MON89788(也稱作MON19788或GMA19788)以控制各種真菌病,尤其是亞洲大豆銹病的方法。發(fā)明簡(jiǎn)介本發(fā)明涉及一種用于控制名為MON89788的大豆轉(zhuǎn)基因事件的疾病的方法,并且其后代在美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物保藏所(AmericanTypeCultureCollection)(ATCC)中具有代表性種子的保藏,其登記號(hào)為PTA-6708。所述用于在大豆植林中預(yù)防疾病的方法包括(a)鑒定處于患上由植物病原體引起疾病的危險(xiǎn)中的大豆植林,其中所述的被鑒定的大豆植林是包含轉(zhuǎn)基因的事件MON89788,所述轉(zhuǎn)基因?qū)x予植物草甘膦耐受性的多肽進(jìn)行了編碼;和(b)向大豆植株施加包含草甘膦的制劑或混合物,從而使得MON89788大豆植林中的疾病得以預(yù)防。在發(fā)明的另一方面,通過施加草甘膦控制了MON89788田間的雜草和疾病。本發(fā)明還提供了一種用于治療MON89788大豆植抹根、莖、葉、豆莢或種子的真菌病的方法,其包括鑒定感染了真菌病的MON89788大豆植林,和向所述大豆植林或其部分施加包含草甘膦的組合物,由此所述組合物能夠使所述疾病得到控制。在發(fā)明的另一方面,所述治療是一種施加到大豆植抹或其部分的含有草甘膦和殺真菌劑組分的混合物,由此所述治療能夠使根、莖、葉、豆莢或種子疾病得到控制。本發(fā)明還提供了用于治療MON89788大豆植株中葉部真菌病的方法,其包括鑒定感染了葉部真菌病的MON89788大豆植株,和向所述大豆植林或其部分施加包含草甘膦的組合物,由此所述組合物能夠使所述疾病得到控制。在發(fā)明的另一方面,所述治療是一種施加到大豆植林或其部分的包含草甘膦和殺真菌劑組分的混合物,由此所述治療能夠使所述葉部疾病得到控制。附圖簡(jiǎn)介以下附圖是本說明書的一部分,包括這些附圖的目的是進(jìn)一步證明本發(fā)明的某些方面。通過與本文給出的具體實(shí)施方式的詳細(xì)說明結(jié)合著參考這些附圖中的一或多個(gè),可以更好地理解本發(fā)明。圖1.實(shí)施例1中所描述的離體大豆葉片試驗(yàn)的結(jié)果。圖2.圖1中所描述的材料的病程曲線下面積(AreaUndertheDiseaseProgressCurve)(AUDPC)分析。示例性實(shí)施方式的描述提供了定義本發(fā)明的定義和方法,并且能夠指導(dǎo)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員技術(shù)人員實(shí)施本發(fā)明。除非另有說明,術(shù)語是由相關(guān)領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)常規(guī)用法理解的。分子生物學(xué)中常見術(shù)語的定義還可以參見Rieger等人(1991)和Lewin(1994)。DNA堿基的名稱使用的是37CFR§1.822中所描述的。如本文所使用的,術(shù)語"大豆"的意思是G(ycz"emax,其包括能夠用大豆繁殖的所有植物變種,其中包括野生大豆種。如本文所使用的,術(shù)語"包含"的意思是"包括但不限于"。轉(zhuǎn)基因"事件"是通過用異種源DNA,即包括所感興趣的轉(zhuǎn)基因的核酸結(jié)構(gòu)來改變植物細(xì)胞,再生由向植物基因組中插入轉(zhuǎn)基因而獲得的植物種群和選擇以在特定基因組位置處插入為特征的特定植物而產(chǎn)生的。術(shù)語"事件"是指包含異源DNA的原始轉(zhuǎn)化體和所述轉(zhuǎn)化體的后代。術(shù)語"事件"還指通過在轉(zhuǎn)化體和另一個(gè)包含異源DNA的變種之間進(jìn)行有性異型雜交而產(chǎn)生的后代。轉(zhuǎn)基因事件通常具有很多轉(zhuǎn)基因特性的表達(dá)。從大量的轉(zhuǎn)基因事件中選擇出那些具有期望的轉(zhuǎn)基因表達(dá)水平或期望的表型的轉(zhuǎn)基因事件是必要的。轉(zhuǎn)基因大豆事件MON89788是從眾多的轉(zhuǎn)基因大豆植物中選擇出來的,這是由于其優(yōu)異的農(nóng)學(xué)特性,尤其是產(chǎn)量,此外MON89788還提供了高水平的草甘膦耐受性。該事件在本發(fā)明中特別有效,其中可以在4艮大范圍內(nèi)調(diào)節(jié)控制疾病所需的草甘膦施用量或草甘膦施用時(shí)間而基本上不會(huì)影響MON89788的農(nóng)學(xué)特性。本發(fā)明的方法提供了用于控制、預(yù)防或治療大豆MON89788的疾病,尤其是由子嚢菌綱(Ascomycetes)、半知菌綱(Deuteromycetes)、擔(dān)子菌綱(Basidiomycetes)或卵菌類(Oomycetes),其中包括銹菌目(Uredinales)、黑粉菌目(Ustilaginales)和白粉菌目(Erysiphales),所引起的疾病的方法。具體的大豆疾病包括,但不限于耐草甘膦大豆植物MON89788中的炭疽病(束狀刺盤孑包(Co〃efoWc/mm(iema〃wm)),葉褐斑病(大豆殼針孑包(Sep,onag(ycz"^)),炭腐病(菜豆殼J求孑包(Macro/7/zom/"a!"/z<x^o//w<2)),棉根腐病(多主瘤梗孑包(尸/z少m^oWc/zwmomm'vorwm)),霜霉病(東北霜霉(尸era"asporama朋/zwnc^)),白粉菌(擴(kuò)散叉絲殼(Mc賜—"era)),大豆灰斑病(大豆尾孢(Cercos/7ora)),尾孢菌葉枯病(胡蘿卜尾孢(Cwco^oracaratoe)),黑點(diǎn)病(大豆黑點(diǎn)菌(Z)/a戶W/ze/j/zas^o/on/m紫斑病(大豆紫斑病菌(Cerccw/orah'A:wc/z//)),辣椒白纟胃病(齊整小核菌(Sc/erW謹(jǐn)ra(/^7'z')),莖潰瘍(大豆北方莖潰瘍病菌(Z)z'a/oW/ze//2CLS"eo/orwmcawhvora)),空氣枯萎病(立枯絲核菌(A/^ocfomaso/am)),輪斑病(鏈才各孢屬種(爿"em^7"^))和由層銹菌屬種所引起的亞洲大豆銹病(ASR)疾病。所述方法提供了將含草甘膦的制劑或混合物施加到需要疾病控制、預(yù)防或治療的大豆^:物MON89788上的方法。在另一方面,所述治療是8一種施加到大豆植物MON89788或其部分上的含有草甘膦和殺真菌劑組分的混合物,由此所述混合物使得所述疾病得以控制。在本文中將兩種真菌,亞洲豆薯層《秀病菌(尸/zaA:o^sora/ac/j^/n力'Sydow)和美洲豆薯層銹病菌(尸/zaAo戸ora,z力o脂'ae(Arthur)Arthur),稱為層銹病種(尸/z^:a^oraw.),其引起了ASR。不同于其它銹病,亞洲豆薯層4秀病菌(尸./ac/zyr/n力')和美洲豆薯層4秀病菌(尸,me^om/ae)能夠侵染的植物種的范圍非常大。已知亞洲豆薯層銹病菌能夠自然地侵染豆科植物的17個(gè)屬中的31個(gè)種,在控制條件下其已經(jīng)侵染了26個(gè)其它屬中的60個(gè)種。美洲豆薯層銹病菌能夠自然侵染豆科植物的19個(gè)屬中的42個(gè)種,并且已經(jīng)人工侵染了12個(gè)其它屬中的18個(gè)附加種。19個(gè)屬中的二十四個(gè)植物種為這兩種菌種的宿主(Frederick等人,2002)。草甘膦耐受性是為大家所熟知的,其可以通過本領(lǐng)域中所描述的重組DNA技術(shù)(例如美國(guó)專利5,312,910;5,310,667;5,463,175中所描述的)而被賦予植物種。草甘膦除草劑耐受性所涉及的多核普酸分子編碼蛋白是本領(lǐng)域已知的,其包括但不限于,關(guān)于草甘膦耐受性的美國(guó)專利5,627,061、美國(guó)專利5,633,435、美國(guó)專利6,040,497和美國(guó)專利5,094,945中所描述的多核普酸分子編碼5-烯醇式丙酮莽草酰-3-磷酸合酶(EPSPS),因此將上述全部專利文獻(xiàn)引入作為參考;多核苷酸編碼草甘膦氧化還原酶,草甘膦-N-轉(zhuǎn)乙酰酶或草甘膦脫羧酶(GOX,美國(guó)專利5,463,175;GAT,美國(guó)專利公開20030083480和20050246798;草甘膦脫酸酶,美國(guó)專利公開20060021093;20060021094;20040177399,在此將它們的全部?jī)?nèi)容引入作為參考)。"草甘膦,,是指N-膦酰曱基甘氨酸及其鹽。草甘膦是Round叩⑧除草劑(Monsanto公司,StLouis,MO)的活性成分。除非另有說明,用"草甘膦"進(jìn)行的植物處理是指用Roundup⑧或RoundupUltra除草劑制劑進(jìn)行的處理。作為N-膦酰甲基甘氨酸及其鹽(沒有配制成Roundup⑧除草劑)的草甘膦是用于選擇細(xì)菌和對(duì)草甘膦的植物耐藥性或者用于在體外生物化學(xué)試驗(yàn)中確定酶抵抗性的合成培養(yǎng)基的組分。草甘膦的商品化制劑的例子包括,而不限于,Monsanto公司作為ROUNDUP、ROUNDUPULTRA、ROUNDUPULTRAMAX、ROUNDUPCT、ROUNDUPEXTRA、ROUNDUPBIACTIVE、ROUNDUPBIOFORCE、RODEO、POLARIS、SPARK和ACCORD除草劑銷售的那些制劑,所有這些除草劑均含有其異丙胺鹽形式的草甘膦;ROUNDUPWEATHERMAX含有其鉀鹽,以及Monsanto公司作為ROUNDUPDRY和RIVAL除草劑銷售的那些制劑,這些制劑含有其銨鹽形式的草甘膦;Monsanto公司作為ROUNDUPGEOFORCE銷售的制劑,該制劑含有其鈉鹽形式的草甘膦;以及Zeneca有限公司作為TOUCHDOWN除草劑銷售的制劑,該制劑含有其三曱基锍鹽形式的草甘膦。向植物葉片施加草甘膦組合物優(yōu)選是通過噴霧,使用用于噴灑液體的任何常用設(shè)備,例如噴頭或旋轉(zhuǎn)-離心式噴霧圓盤完成的。本發(fā)明的組合物能夠用于精準(zhǔn)農(nóng)業(yè)技術(shù),其中使用裝置根據(jù)變量例如種植的具體植物種類、植物生長(zhǎng)的階段、土壤濕度狀況等來改變施加到田地不同部分的外來化學(xué)物質(zhì)的量。在這種工藝的一個(gè)方面,可以使用全球定位系統(tǒng)操縱的噴霧裝置來控制組合物的施加以將組合物以所需的量施加到田地的不同部分。優(yōu)選將草甘膦組合物稀釋到足以容易地使用標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)業(yè)噴灑裝置噴施的濃度。對(duì)于本發(fā)明來說,合適的施用量是隨著許多因素改變的,所述因素包括活性成分的類型和濃度以及所涉及的植物種類。通過噴灑施加,用于將含水組合物施加到葉部區(qū)域的有效施用量可以在約25到約1,000升每公項(xiàng)(1/ha)的范圍內(nèi),優(yōu)選為約50到約300l/ha。從約0.1磅酸當(dāng)量/英畝(除非另有說明,否則本文稱為"磅/英畝")到約5磅/英畝草甘膦的草甘膦組合物施用量在根據(jù)本發(fā)明方法控制、預(yù)防或治療病原體方面是有效的。然而更優(yōu)選的施用量是在約0.5磅/英畝到約2.5磅/英畝的范圍內(nèi)。最優(yōu)選的施用量是約0.75磅/英畝??梢詫⒉莞熟⑴c殺真菌劑混合,例如最優(yōu)選的是將草甘膦化合物與殺菌化合物或殺真菌劑的組合相混合,所述殺真菌劑例如腈嘧菌酯、苯菌靈、滅瘟素-S、波爾多液混合物(堿式硫酸銅)、糠菌唑、敵菌丹、克菌丹、多菌靈、地茂丹、百菌清、王銅、銅鹽、霜脲氰、環(huán)唑醇、嘧菌環(huán)胺(CGA219417)、噠菌酮、氯硝胺、苯醚曱環(huán)唑、稀酰嗎啉、烯唑醇、烯唑醇-M、多嗎菌靈、克瘕散、氟環(huán)唑(BAS480F)、P惡唑酮菌、氯苯嘧啶醇、腈苯唑、拌種咯、苯銹啶、粉銹啉、氟啶胺、氟奎唑、氟硅唑、氟酰胺、粉唑醇、滅菌丹、三乙膦酸鋁、吹霜靈、己唑醇、種菌唑、異稻瘟凈、異菌脲、稻瘟靈、春雷霉素、醚菌酯、代森錳鋅、代森錳、滅銹胺、曱霜靈、葉菌唑、S-曱基7-benzothiazolecarbothioate(CGA245704)、腈菌唑、曱腫鐵銨(甲基胂酸鐵)、卩惡酰胺、戊菌唑、紋枯脲、噻菌靈、丙氯咪、丙環(huán)唑、啶斑肟、咯全酮、喹氧靈、螺環(huán)菌胺(KWG4168)、硫磺、戊唑醇、氟醚唑、噻菌靈、甲基硫菌靈、福美雙、三唑酮、三唑醇、三環(huán)唑、肟菌酯、滅菌唑、有效霉毒和乙稀菌核利;常見的殺真菌劑的組合,例如環(huán)唑醇和腈嘧菌酯、苯醚曱環(huán)唑和曱霜靈-M、咯菌腈和曱霜靈-M、代森錳鋅和甲霜靈-M、氫氧化銅和甲霜靈-M、嘧菌環(huán)胺和咯菌腈、環(huán)唑醇和丙環(huán)唑。能夠作為混合物與本發(fā)明所描述的草甘膦組合物結(jié)合以提供加強(qiáng)保護(hù)從而免受真菌病的可商購(gòu)獲得的殺真菌劑制劑包括,但不限于Quadris⑧(Syngenta公司)、Bravo⑧(Syngenta公司)、Echo720(SipcamAgro有限公司)、Headline2.09EC((BASF公司)、Tilt3.6EC(Syngenta公司)、PropiMax3.6EC(DowAgroSciences)、Bumper41.8EC(MakhteshimAgan)、Folicur3.6F(BayerCropScience)、Laredo25EC(DowAgroSciences)、Laredo25EW(DowAgroSciences)、Stmtego2.08F(Bayer公司)DomarkTM125SL(SipcamAgroUSA)和Pristine38%WDG(BASF公司)。當(dāng)將草甘膦用于與殺真菌劑組成的混合物中時(shí)或當(dāng)將草甘膦與殺真菌劑順序施加時(shí),為了獲得草甘膦和殺真菌劑的有效濃度的最有效比以提供有成本效益的疾病控制混合物,可以降低施用量。草甘膦和殺真菌劑的施加可以提供協(xié)同效果。與2X量的草甘膦或1X量的殺真菌劑相比,1X量的草甘膦(0.75磅/英畝)繼之以0.5X量的殺菌化合物將提供相等或提高了的真菌病控制??梢灶A(yù)見進(jìn)一步減少使用草甘膦與殺真菌劑的混合物的施用量對(duì)控制不同的真菌病將是有效的。例如,與0.4X量的殺真菌劑,或0.3X,或0.2X,或0.1X量或在其中間的量的殺真菌劑混合的1X量的草甘膦,對(duì)真菌病的經(jīng)濟(jì)控制來說可能是有成本效益的。此外,降低混合物中草甘膦的用量也可以提供有效且成本有效的真菌病控制。例如0.75X量的草甘膦與0.5X量的殺真菌劑,或0.5X量的草甘膦與0.5X量的殺真菌劑,或0.25X量的草甘膦與0.5X量的殺真菌劑,或0.1X量的草甘膦與0.5X量的殺真菌劑。在本發(fā)明中,混合物中0.1X草甘膦和0.1X殺真菌劑的比例是能夠預(yù)期的。精確的比例可以通過傳遞給患病或疾病易感植物組織的每種化合物的有效量,由MON897884直物真菌病控制用化學(xué)制劑及應(yīng)用領(lǐng)域的技術(shù)人員來確定。本發(fā)明還提供了用于在耐草甘膦MON89788大豆植物田中控制有害雜草以及控制、預(yù)防或治療病原體的方法,其中該方法利用了草甘膦組合物的施加。這樣的方法包括向包含耐或抗草甘膦MON89788植物的田地中一或多次地施加草甘膦組合物??梢詢纱位蚋啻蔚厥┘硬莞熟?。將所述施加或各次施加的時(shí)間設(shè)定為能夠有效地控制雜草和能夠在被處理的植物(復(fù)數(shù))中有效地控制、以及預(yù)防或治療疾病而不會(huì)影響MON89788的農(nóng)學(xué)特性的時(shí)間。例如,但不限于,第一次施加草甘膦是在當(dāng)所述施加能夠控制MON89788田內(nèi)的雜草時(shí)。例如,但不限于,第二次施加是在當(dāng)植物處于感染植物病原體的危險(xiǎn)中或者已經(jīng)感染了植物病原體時(shí)。在一方面,用于在MON89788大豆田中控制雜草和病原體的方法包括步驟(a)在田間種植MON89788種子,(b)通過施加除草劑組合物使田間基本上沒有非-MON89788植物和(c)然后通過施加草甘膦組合物來控制、預(yù)防或治療疾病。在這樣的方法中,應(yīng)該能夠想到種植和基本上除去非-MON89788植物的步驟可以互換。因此,在向田地種植作物之前田地中可以基本上沒有非-作物植物。在一方面,除草劑組合物的施加和疾病控制用草甘膦的施加是在1天分開進(jìn)行的。或者,它們可以是在2、3、4、5、6、7、8、9、10、14或21天分開進(jìn)行的。在另一方面,除草劑和殺蟲劑的施加是在大于5、10、20、25、30、35、40、45或50天分開進(jìn)行的。在一方面,在生長(zhǎng)季節(jié)期間能夠施加一或多次草甘膦組合物。在另一方面,在生長(zhǎng)季節(jié)期間能夠向需要疾病控制、預(yù)防或治療的植物施加2、3、4、5、6、7、8、9或10次草甘膦組合物。在一方面,草甘膦組合物的施加導(dǎo)致植物組織中草甘膦的濃度在約0.01ppm到約100ppm每鮮重之間。更優(yōu)選地,在用本發(fā)明方法處理過的植物組織中能夠獲得O.lppm到25ppm鮮重草甘膦的組織濃度。最優(yōu)選地,約0.5ppm到約10ppm草甘膦的濃度對(duì)于在一皮處理的MON89788植物中控制、預(yù)防或治療疾病來說是有效的。包括的以下實(shí)施例是為了證明本發(fā)明的各方面。本領(lǐng)域技術(shù)人員^艮好地實(shí)施本發(fā)明的技術(shù),因此可以認(rèn)為這些實(shí)施例組成了用于實(shí)施發(fā)明的優(yōu)選方式。然而,根據(jù)目前所公開的內(nèi)容,本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解,在所公開的具體方面中能夠進(jìn)行許多變化并仍能獲得相同或相似的結(jié)果而沒有脫離本發(fā)明的精神和范圍。包括以下實(shí)施例的目的是表明本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解,以下實(shí)施例中所公開的技術(shù)代表了發(fā)明人發(fā)現(xiàn)的能夠很好地實(shí)施本發(fā)明的技術(shù),因此可以認(rèn)為它們組成了用于實(shí)施發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式。然而,才艮據(jù)目前所公開的內(nèi)容,本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解,在所公開的具體方面中能夠進(jìn)行許多變化并仍能獲得相同或相似的結(jié)果而沒有脫離本發(fā)明的精神和范圍。實(shí)施例實(shí)施例1進(jìn)行了生長(zhǎng)室和溫室試馬全以確定草甘膦處理(RoundupWeatherMax)是否能夠降低MON89788上亞洲大豆銹病(ASR)的罹病度。生長(zhǎng)室試-瞼是繼離葉測(cè)定法后進(jìn)行的。MON89788植抹生長(zhǎng)在溫室中,將自第3個(gè)三片葉子的葉子剝離并置于裝有水的6孔盤中。評(píng)價(jià)了五種處理方法(1)接種了ASR孢子(LoxleyAl離析)的未處理對(duì)照例;(2)接種了ASR孢子并在孢子形成后(接種孢子后的(DAI)第13天)用草甘膦處理過的MON89788葉片組織;(3)在5DAI時(shí)用IX量(0.75磅/英畝)的RoundupWeatherMax處理的MON89788;(4)在5DAI時(shí)用IX量的RoundupWeatherMax處理的MON89788;和(5)在5DAI時(shí)用3X量的RoundupWeatherMax處理的MON89788。銹病嚴(yán)重度打分使用的是從1到5的等級(jí)標(biāo)準(zhǔn);1-是免疫的,2-表示紅/褐斑覆蓋了小于50%的葉片面積,3-表示紅/褐斑覆蓋了大于50%的葉片面積,4-表示棕褐色斑覆蓋了小于50%的葉片面積,以及5-表示椋褐色斑覆蓋了大于50%的葉片面積。根據(jù)12DAI、20DAI和25DAI的罹病度將葉片分級(jí)。圖1顯示了對(duì)未處理或者在5DAI用IX、2X或3XRoundupWeatherMax處理離體葉片的結(jié)果的簡(jiǎn)要概括。在12DAI時(shí)(實(shí)心柱),未用草甘膦處理的MON89788葉片顯示出高水平的罹病度和孢子形成,而在5DAI用IX量的Round叩⑧WeatherMax處理過的葉片顯示出降低的嚴(yán)重性。在20DAI時(shí)(影線柱),與未處理的對(duì)照例相比,2X和3X處理的葉片繼續(xù)顯示出較低水平的ASR。當(dāng)在13DAI用2X處理時(shí),MON89788葉片上ASR的孢子形成水平也在20DAI(點(diǎn)柱)時(shí)得到降低。對(duì)疾病級(jí)數(shù)的分析圖解于圖2中,其是作為與圖1中所概括的材料相同的材料的病程曲線下面積(AUDPC)測(cè)量的。與其它處理相比,用2X和3X量處理的MON89788葉片的AUDPC較低。在5DAI時(shí)和對(duì)于完整MON89788植抹的溫室試-瞼是用IX、2X和3X量的RoundupWeatherMax在6DBI(接種前的天數(shù))和9DAI時(shí)處理的。17DAI時(shí)收集該實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。除了在6DBI時(shí)的1X處理之外,所有的草甘膦處理均導(dǎo)致了MON89788大豆上ASR感染和疾病水平的降低。與對(duì)照例相比,用1X處理的M0N89788上的ASR罹病度降低了,并且在用2X和3X處理的試驗(yàn)中觀察到了罹病度的進(jìn)一步降低。在6DBI時(shí)用1X的量,接著在9DAI時(shí)再用1X的量進(jìn)行附加處理,其顯示出的罹病度的降低與在接種前或后施加的2X和3X處理相似。溫室試-驗(yàn)和生長(zhǎng)室試^S正實(shí)了用草甘膦處理MON89788能夠控制ASR疾病了。接種前的處理似乎減緩了疾病發(fā)展的速度,而發(fā)病/孢子形成后的處理似乎阻止了孢子的形成。施加草甘膦進(jìn)行分別處理(接種前IX,接種后IX)使ASBR降低的水平與單獨(dú)用2X和3X在接種前或后進(jìn)行的處理相似。進(jìn)行了附加試-瞼以進(jìn)一步評(píng)價(jià)用草甘膦處理MON89788的疾病預(yù)防活性。種植MON89788的種子并使其長(zhǎng)到V4-V5生長(zhǎng)階段,接著用RounchipWeatherMax以IX、2X和表面活性劑對(duì)照量進(jìn)行處理。在草甘膦處理后二十四小時(shí)時(shí),將每林植物的第一和第二片三葉葉片用大約5x104的ASR孢子接種。在10DAI時(shí)開始對(duì)最低的三葉葉片上的斑進(jìn)行數(shù)量和嚴(yán)重度的分級(jí),并且每2天#爻一次評(píng)價(jià)直至20DAI。在預(yù)防性實(shí)驗(yàn)中,在比較同一天評(píng)價(jià)的各處理間的罹病度時(shí)發(fā)現(xiàn)了顯著的差別。在16、20和25DAI時(shí),與1X相比,2X處理明顯具有較低的罹病度。當(dāng)在20和25DAI與表面活性劑對(duì)照例相比時(shí),2X也具有較低的罹病度。在相同處理中的各天之間的感染嚴(yán)重性也顯著不同。實(shí)施例2在MON89788大豆上證實(shí)了對(duì)大豆灰斑病(大豆尾孢(Cenmy/ora))、尾孢菌葉枯病(Cercosporaleafblight)(胡蘿卜尾孢(Cercosporacara&e))和空氣枯萎病(Aerialblight)(立枯絲核菌(^/z/zo"om"so/"m'))的控制。用IX、2X或3X濃度的草甘膦處理包含事件MON89788并在標(biāo)準(zhǔn)條件下在溫室中生長(zhǎng)的大豆植物,并在1DBI、1DAI和4DAI時(shí)用植物病原體接種。將每種疾病的病征分為1-9的等級(jí)作為對(duì)葉片上出現(xiàn)的罹病度(DS)的近似測(cè)量,l是沒用癥狀,2是直至10%的葉片感染,3是11-20%的葉片感染,4是21-35%,5是36-50%,7是66-75%,8是76-85%,9是大于85%的葉片感染并且顯示出病征。結(jié)果顯示于表1中。草甘膦處理為這三種疾病,尤其是那些由尾孢屬(Cwcowora^)所引起的疾病提供了預(yù)防性和治療性的罹病度控制。表1.-瞼證草甘膦在MON89788上對(duì)三種葉部病原體的疾病控制<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>當(dāng)在1DBI用表2中所顯示的三種草甘膦施用量中的任意一種來處理MON89788時(shí)都能在MON89788上觀察到對(duì)白粉病的高水平的控制。沒有噴霧的對(duì)照例的平均罹病度分?jǐn)?shù)為4.65,在所有處理施用量下草甘膦處理均提供了高水平的疾病控制。表2.草甘膦在MON89788上對(duì)白粉菌的控制<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>根據(jù)布達(dá)佩斯條約,MonsantoTechnologyLLC對(duì)以上公開的并在權(quán)利要求中涉及的事件MON89788大豆種子樣品在美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物保藏所(AmericanTypeCultureCollection)(ATCC),10801UniversityBoulevard,Manassas,Va.20110進(jìn)行了保藏。MON89788(又名為MON19788或GM19788)的ATCC登記號(hào)是PTA-6708,保藏時(shí)間是2005年5月11日。保藏將在保藏庫中持續(xù)30年的時(shí)間、或者到最后一次請(qǐng)求后的第5年、或者到專利的有效期滿,不論以上哪個(gè)期限較長(zhǎng),在此期間根據(jù)需要可以進(jìn)行保藏物的替換。已經(jīng)舉例說明并描述了本發(fā)明的原理,因此能夠?qū)Ρ景l(fā)明在排列和細(xì)節(jié)上進(jìn)行改變而沒有脫離上述原理,這對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。發(fā)明人請(qǐng)求保護(hù)落入所附權(quán)利要求的精神和范圍內(nèi)的全部改進(jìn)。在此將本說明書中引用的所有出版物和專利公開文獻(xiàn)引入作為參考,其程度就像具體地并且分別地給出了每篇單獨(dú)的出版物或?qū)@暾?qǐng)以引入作為參考一樣。根據(jù)目前公開的內(nèi)容,本文中公開并請(qǐng)求保護(hù)的所有組合物和方法均能夠制備得到和實(shí)施而沒有不能預(yù)期的實(shí)驗(yàn)。雖然已經(jīng)以優(yōu)選實(shí)施方案的形式對(duì)本發(fā)明的組合物和方法進(jìn)行了描述,但是能夠?qū)Ρ疚乃枋龅慕M合物和方法以及方法的步驟或步驟的順序進(jìn)行改變而沒有脫離發(fā)明的原理、精神和范圍,這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。更具體地說,顯而易見的是可以用某些化學(xué)和生理學(xué)上均相關(guān)的試劑來代替本文所描述的試劑并能夠獲得相同或相似的結(jié)果。認(rèn)為所有這樣的本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的相似替代和改變均落入所附權(quán)利要求定義的發(fā)明的精神、范圍和原理之內(nèi)。參考文獻(xiàn)在此具體地引入以下參考文獻(xiàn)作為參考,在一定程度上它們對(duì)文本所描述的內(nèi)容提供了示例性程序上的或細(xì)節(jié)方面的補(bǔ)充。美國(guó)專利4,535,060美國(guó)專利5,094,945美國(guó)專利5,310,667美國(guó)專利5,312,910美國(guó)專利5,463,175美國(guó)專利5,554,798美國(guó)專利5,627,061美國(guó)專利5,633,435美國(guó)專利6,040,497美國(guó)專利6,689,880美國(guó)專利6,740,488美國(guó)專利公開號(hào)20030083480美國(guó)專利公開號(hào)20040018518美國(guó)專利公開號(hào)20040177399美國(guó)專利公開號(hào)20050246798美國(guó)專利公開號(hào)20060021093美國(guó)專利公開號(hào)20060021094美國(guó)專利公開號(hào)2005000654442美國(guó)專利公開號(hào)2003000532758Frederick等人,A/yco/ogy,92:217-227,2002。Lewin,In:Ge"^K,牛津大學(xué)出版,紐約,1994。PCT申請(qǐng)?zhí)朩O9200377Rieger等人,In:G/os^ar少q/"C/as^c"/a"c/Mo/ecw/ar第5版,Springer-Verlag,紐約,1991。Sinclair和Backman,In:Com/em/z'wmo/5Vj^e"wZ)^os^,第3版,APSPress,St.Paul,MN,106,1989。Wrather等人,Online.PlantHealthProgressdoi:10:1094/PHP-2003-0325-01-RV;2003。權(quán)利要求1.一種在含事件MON89788的大豆植株中控制疾病的方法,所述方法包括(a)鑒定處于患上由植物病原體引起的疾病的危險(xiǎn)中的大豆植株,其中所述被鑒定的大豆植株包含賦予大豆植株草甘膦耐受性的事件MON89788,其中包含事件MON89788的代表性大豆種子已經(jīng)保藏在ATCC中,其登記號(hào)為PTA-6708;和(b)用包含草甘膦的制劑或混合物處理大豆植株,從而使疾病通過草甘膦得到控制。2.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述疾病是由選自銹菌目、黑粉菌目、白粉菌目、子嚢菌綱、半知菌綱和卵菌類的病原體引起的。3.如權(quán)利要求2所述的方法,其中所述疾病是由刺盤孢屬(Co〃e/of〃'c/wms/)、層錄菌屬(尸/z"A:o^oras/.)、尾孑包屬(Ce/rcw/oras*;.)、灰星病屬(Se/^on'a)、5求殼孑包屬(7Wacro^/o附masp.)、瘤才更孑包屬(尸/z少wafo/〃'c/2wms/)、霜霉屬(尸en9wos/o廠as/.)、叉絲殼屬(A/z'cmy//^eras/)、腐皮殼屬(Z)z'a戶r/7zes/.)、菌核屬(Sc/en^,'謂s/.)、絲核菌屬(i/n'zo"omaw.)或才各孢屬(J/,ema〃'av.)引起的。4.如權(quán)利要求3所述的方法,進(jìn)一步地其包括,(a)鑒定4支豆薯層銹菌(尸/zdo;^ora;^c/7;^/n力')感染的大豆植才朱;和(b)向所述大豆植株或其部分施加所述包含草甘膦的制劑或混合物,/人而4空制疾病。5.如權(quán)利要求3所述的方法,進(jìn)一步地其包括,(a)鑒定尋皮立^古絲才玄菌(A/nzo"oma感染的大豆才直才木;和(b)向所述大豆植林或其部分施加所述包含草甘膦的制劑或混合物,/人而4空制疾病。6.如權(quán)利要求3所述的方法,進(jìn)一步地其包括,(a)鑒定被擴(kuò)散叉絲殼(A^cn^/力"era)感染的大豆植才朱;和(b)向所述大豆植抹或其部分施加所述的包含草甘膦的制劑或混合物,/人而控制疾病。7.如權(quán)利要求3所述的方法,進(jìn)一步地其包括,(a)鑒定^皮大豆尾孢(Cercasporaso力"")感染的大豆4直4朱;和(b)向所述大豆植株或其部分施加所述的包含草甘膦的制劑或混合物,/人而4空制疾病。8.如權(quán)利要求3所述的方法,進(jìn)一步地其包括,(a)鑒定凈皮胡蘿卜尾孢(Cwco^oracwome)感染的大豆植林;和(b)向所述大豆植抹或其部分施加所述的包含草甘膦的制劑或混合物,從而控制疾病。9.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述制劑或混合物包含殺真菌劑。10.如權(quán)利要求9所述的方法,其中所述殺真菌劑選自腈嘧菌酯、苯菌靈、滅瘟素-S、波爾多液混合物(堿式硫酸銅)、糠菌唑、敵菌丹、克菌丹、多菌靈、地茂丹、百菌清、王銅、銅鹽、霜脲氰、環(huán)唑醇、嘧菌環(huán)胺(CGA219417)、噠菌酮、氯硝胺、苯醚曱環(huán)唑、稀酰嗎啉、烯唑醇、烯唑醇-M、多嗎菌靈、克痘散、氟環(huán)唑(BAS480F)、卩惡唑酮菌、氯苯嘧啶醇、腈苯唑、拌種咯、苯銹啶、粉銹啉、氟啶胺、氟奎唑、氟硅唑、氟酰胺、粉唑醇、滅菌丹、三乙膦酸鋁、呋霜靈、己唑醇、種菌唑、異稻瘟凈、異菌脲、稻瘟靈、春雷霉素、醚菌酯、代森錳鋅、代森錳、滅銹胺、曱霜靈、葉菌唑、S-曱基7-benzothiazolecarbothioate(CGA245704)、腈菌唑、曱胂4失銨(曱基胂酸鐵)、卩惡酰胺、戊菌唑、紋枯脲、噻菌靈、丙氯咪、丙環(huán)唑、啶斑肟、咯喹酮、喹氧靈、螺環(huán)菌胺(KWG4168)、石危石黃、戊唑醇、氟醚唑、瘞菌靈、曱基硫菌靈、福美雙、三唑酮、三唑醇、三環(huán)唑、肟菌酯、滅菌唑、有效霉毒和乙稀菌核利以及它們的組合。11.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述的用草甘膦進(jìn)行的處理控制了雜草。12.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述的用草甘膦進(jìn)行的處理包括一次以上的處理。13.如權(quán)利要求1所述的方法,其中在所述的用草甘膦進(jìn)行的處理之前先用殺真菌劑進(jìn)行處理。14.如權(quán)利要求1所述的方法,其中在所述的用草甘膦進(jìn)行的處理之后接著用殺真菌劑進(jìn)行處理。15.—種如權(quán)利要求1所述的方法,其中在所述的處理后的大豆植物上收獲種子。專利摘要本發(fā)明涉及一種通過用含有草甘膦的制劑或混合物進(jìn)行處理來控制MON89788大豆疾病的方法。特別是,所述制劑和混合物對(duì)控制MON89788的真菌病是有效的。更具體地說,本發(fā)明涉及一種控制MON89788上葉銹病嚴(yán)重度的方法。文檔編號(hào)A01N57/20GKCN101316513SQ200680027616公開日2008年12月3日申請(qǐng)日期2006年5月26日發(fā)明者F·C·科恩,G·J·貝利,J·H·泰勒,J·W·皮特金,J·賴恩哈特申請(qǐng)人:孟山都技術(shù)有限公司導(dǎo)出引文BiBTeX,EndNote,RefMan
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