促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸b積累的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的方法,包括以下步驟:1)丹參毛狀根的初培養(yǎng):在每100mL的6,7-V培養(yǎng)基中接種0.3~0.4g丹參毛狀根,于100~150rpm、24~26℃的培養(yǎng)條件下黑暗培養(yǎng)17~19天;2)丹參毛狀根的繼續(xù)培養(yǎng):然后添加葉酸溶液,使6,7-V培養(yǎng)基中葉酸的終濃度為45~55μM,于100~150rpm、24~26℃的培養(yǎng)條件下黑暗培養(yǎng)5~7天。本發(fā)明采用葉酸處理丹參毛狀根,從而促進(jìn)丹參毛狀根的次生代謝產(chǎn)物迷迭香酸和丹酚酸B的積累。
【專利說(shuō)明】巧進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹齡酸B積累的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及葉酸處理丹參毛狀根,從而促進(jìn)次生代謝產(chǎn)物迷迭香酸和丹酷酸B積 累的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 丹參(Salvia miltiorrhiza)為唇形科植物;丹參的根及根莖有活血巧癒、清熱 安神、養(yǎng)血益氣之功效。丹酷酸是丹參有效成分之一,主要包括迷迭香酸和丹酷酸B等。由 于在治療也血管系統(tǒng)疾病中的突出表現(xiàn)和無(wú)毒負(fù)作用的特點(diǎn),丹參的應(yīng)用和研究也越來(lái)越 廣泛。
[0003] 目前現(xiàn)有的丹參毛狀根可采用6, 7-V培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。一般稱取新鮮丹參毛狀根 0. 15?0. 2g接種于50mL的6, 7-V培養(yǎng)基中進(jìn)行黑暗培養(yǎng)。丹參毛狀根在生產(chǎn)丹參有效成 分方面有著巨大潛力,但活性成分含量較低已成為制約丹參毛狀根應(yīng)用的瓶頸。
[0004] 含30g/L藏糖的6,7-V培養(yǎng)基的配方如表1所示,pH值為5. 8,12rC滅菌20min。
[0005] 表1、6, 7-V培養(yǎng)基的配方
[0006]
【權(quán)利要求】
1. 促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的方法,其特征是包括以下步驟: 1) 、丹參毛狀根的初培養(yǎng): 在每lOOmL的6, 7-V培養(yǎng)基中接種0. 3?0. 4g丹參毛狀根,于100?150rpm、24? 26°C的培養(yǎng)條件下黑暗培養(yǎng)17?19天; 2) 、丹參毛狀根的繼續(xù)培養(yǎng): 然后添加葉酸溶液,使6, 7-V培養(yǎng)基中葉酸的終濃度為45?55 y M,于100?150rpm、 24?26°C的培養(yǎng)條件下黑暗培養(yǎng)5?7天。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的方法,其特征 是:所述葉酸溶液的配制方法為: 將0. 2207g葉酸溶于10ml的無(wú)菌水,用0. 22 y m無(wú)菌濾頭過(guò)濾除菌,得葉酸溶液。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的方法,其 特征是:使6, 7-V培養(yǎng)基中葉酸的終濃度為50 y M。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的方法,其特征 是:所述步驟1)和步驟2)的培養(yǎng)條件均為:110rpm,25°C ; 步驟1)的培養(yǎng)時(shí)間為18天, 步驟2)的培養(yǎng)時(shí)間為6天。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104396755SQ201410697396
【公開(kāi)日】2015年3月11日 申請(qǐng)日期:2014年11月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月26日
【發(fā)明者】梁宗鎖, 楊東風(fēng), 黃志成, 呂洪飛, 侯卓妮, 杜旭紅 申請(qǐng)人:浙江理工大學(xué)