樺木酸的應(yīng)用方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于家畜飼養(yǎng)的【技術(shù)領(lǐng)域】，具體公開了樺木酸在制備預(yù)防和治療家畜，尤其是斷奶仔豬腹瀉的制劑的用途。樺木酸以0.1-0.5％的劑量添加到斷奶仔豬飼料中，能顯著降低斷奶仔豬腹瀉率，改善腸黏膜形態(tài)，保護腸粘膜屏障，有效提高仔豬整體的防病抗病能力，提高日增重。
【專利說明】樺木酸的應(yīng)用方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于家畜飼養(yǎng)的【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及樺木酸在制備預(yù)防和治療家畜，尤其 是斷奶仔豬腹瀉的制劑的用途。

【背景技術(shù)】
[0002] 在當前高度集約化養(yǎng)殖中，仔豬腹瀉是常見的危害很大的疾病。該病直接導(dǎo)致仔 豬成活率下降、生長緩慢、發(fā)育停滯而成為僵豬，甚至死亡，影響整個飼養(yǎng)期的生長速度和 飼料轉(zhuǎn)化率，最終給養(yǎng)殖業(yè)帶來重大經(jīng)濟損失。據(jù)統(tǒng)計，我國每年因腹瀉導(dǎo)致的仔豬死亡占 仔豬死亡總數(shù)的39. 8%。仔豬腹瀉的平均發(fā)病率為46. 5%，死亡率為15%，造成的直接經(jīng) 濟損失高達10億元。仔豬斷奶腹瀉的原因很多，主要有消化不良、免疫力下降、電解質(zhì)失 衡、腸道致病性大腸桿菌和其他致病菌的侵染以及斷奶后營養(yǎng)和環(huán)境應(yīng)激等。長期以來，該 病的防治主要依賴于抗生素和化學(xué)藥物解決，而抗生素的濫用導(dǎo)致耐藥性產(chǎn)生、內(nèi)源感染 和二重感染、機體免疫力下降以及食品中的藥物殘留等給人類健康帶來了巨大的威脅。因 此，尋找有效的抗生素替代品是亟待解決重要問題。
[0003] 樺木酸屬于羽扇豆烷型五環(huán)三萜類物質(zhì)，廣泛分布于如鼠李科、桃金娘科和樺木 科等多種植物中，其量普遍很低，以白樺樹皮量較高?！侗静菥V目》中記載樺樹皮可用于黃 疽、乳癰、疥瘡等疾病的治療。早在19世紀，白樺樹皮就被美國人放在茶和其他飲料中飲 用；白樺樹汁被歐洲人稱為"天然啤酒"和"森林飲料"。1995年發(fā)現(xiàn)樺木酸對黑色素瘤細 胞具有極強的選擇性細胞毒性，抑制H9淋巴細胞中HIV的復(fù)制，其作用范圍幾乎影響病毒 生命周期的每個環(huán)節(jié)。由于樺木酸具有優(yōu)越的抗腫瘤和抗HIV活性，引起了人們對樺木酸 的廣泛研究與關(guān)注。隨后研究發(fā)現(xiàn)，樺木酸具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化應(yīng)激、抗炎等多種較強的 生物活性，而樺木酸在仔豬腹瀉方面的應(yīng)用鮮見報道。據(jù)報道，樺木酸對癌細胞的敏感強度 約是正常細胞的10倍，樺木酸劑量高達500mg/kg時，動物沒有明顯的中毒癥狀，而且樺木 酸廣泛來源于自然界的多種植物，說明樺木酸具有安全、不易產(chǎn)生耐藥性，不存在藥物殘留 等優(yōu)點，是理想的抗生素替代品之一。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種樺木酸在制備預(yù)防和治療家畜，尤其是斷奶仔豬腹瀉 制劑的用途，使用的樺木酸安全、無耐藥性、針對性強，能夠有效控制斷奶仔豬腹瀉，同時兼 具提高機體的免疫力和生產(chǎn)性能作用，可替代抗生素進行喂食和添加。
[0005] 樺木酸的應(yīng)用方法，所述的樺木酸用于制備家畜的抗腹瀉制劑。所述的抗腹瀉制 劑還能提高家畜的日增重，降低料肉比。
[0006] 所述的家畜為豬，尤其是斷奶仔豬。
[0007] 將所述的樺木酸直接喂食家畜或者添加到家畜的基礎(chǔ)日糧中喂食。
[0008] 所述的家畜為豬，尤其是斷奶仔豬。
[0009] 將所述的樺木酸添加到斷奶仔豬基礎(chǔ)日糧中的質(zhì)量比例為0. 1?0. 5%。優(yōu)選 0· 1-0. 2%。
[0010] 所述的樺木酸的制備過程為：從白樺樹皮中提取樺木醇，經(jīng)瓊斯試劑氧化制備中 間產(chǎn)物樺木酮酸后，用硼氫化鈉還原合成樺木酸。
[0011] 采用HPLC測定樺木酸的含量為96. 53%。
[0012] 本發(fā)明中使用的樺木酸是利用現(xiàn)有的技術(shù)路線制備，從白樺樹皮中提取樺木醇， 經(jīng)瓊斯試劑氧化制備中間產(chǎn)物樺木酮酸后，用硼氫化鈉還原合成樺木酸。（參考文獻：易金 娥，文利新，袁莉蕓，Obminska-MrukowiczBozena,袁慧·白樺樹中樺木醇的提取與樺木酸 合成研究·湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2010, 36 (5) : 574-580.)
[0013] 本發(fā)明具有的優(yōu)點：
[0014] 本發(fā)明采用的樺木酸，具有多種生物學(xué)活性，且兼有防病功能，既可防病又可提高 動物生產(chǎn)性能，樺木酸不易在動物體內(nèi)殘留，不易產(chǎn)生耐藥性，確保畜產(chǎn)品的質(zhì)量。
[0015] 1.可提高斷奶仔豬生長性能：樺木酸添加劑組與對照組（沒有添加劑）相比，提 高日增重，降低料肉比。
[0016] 2.明顯抑制斷奶仔豬腹瀉：樺木酸添加劑組與對照組（沒有添加劑）相比，腹瀉 率顯著降低；
[0017] 3.可促進腸道修復(fù)：明顯改善斷奶仔豬小腸黏膜形態(tài)，緩解小腸絨毛萎縮，樺木 酸添加劑組顯著提高十二指腸的絨毛高度，顯著降低隱窩深度，提高絨毛高度與隱窩深度 之比。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0018] 圖1為樺木酸對斷奶仔豬生長性能的影響；
[0019] 與空白對照組相比，差異顯著（Ρ〈0·05);
[0020] 圖2為樺木酸對斷奶仔豬料重比的影響；
[0021] 與空白對照組相比，差異顯著（Ρ〈0.05)，"林"差異極顯著（Ρ〈0.01);
[0022] 圖3為樺木酸對仔豬腹瀉率的影響；
[0023] 與空白對照組相比，"林"差異極顯著（Ρ〈0.01);
[0024] 圖4為樺木酸對斷奶仔豬小腸黏膜絨毛高度和隱窩深度的影響；
[0025] 與空白對照組相比，差異顯著（Ρ〈0. 05);
[0026] 圖5為樺木酸對斷奶仔豬小腸黏膜絨毛高度和隱窩深度比值的影響。
[0027] 與空白對照組相比，"林"差異極顯著（Ρ〈0· 01)。

【具體實施方式】
[0028] 本發(fā)明使用的樺木酸屬于五環(huán)三萜類化合物，來源于白樺樹皮，從白樺樹皮中提 取樺木醇，經(jīng)瓊斯試劑氧化制備中間產(chǎn)物樺木酮酸后，用硼氫化鈉還原合成樺木酸。具體制 備方法如下：收集白樺木的樹皮，經(jīng)60°C烘干，貯藏在黑暗、干燥處。采用半合成法制備樺 木酸。1)從白樺樹皮中提取樺木酸：稱取白樺樹皮粉末，用甲醇70°C加熱回流3h，減壓干 燥，加2m 〇L/L NaOH攪拌，收集下層液，減壓蒸干并用乙醚溶解，加適量的水充分搖勻，收集 上層液，減壓干燥，硅膠柱層析，減壓干燥得樺木醇純品。2)采用樺木酮酸為中間體合成樺 木酸的方法：用丙酮溶解樺木醇快速攪拌，冷卻至5-10°C后，逐滴加入新制的瓊斯試劑（樺 木醇：瓊斯試劑=1 : 6)，20°c反應(yīng)3h，過濾除去墨綠色沉淀，減壓蒸干丙酮，殘液用乙酸 乙酯萃取，水洗，10% NaHCO3洗滌，有機相用無水MgSO4干燥，得淡黃色固體（樺木酮酸粗 品）用乙醚溶解，快速柱色譜分離，減壓干燥，得樺木酮酸純品。再用硼氫化鈉/四氫呋喃 (NaBH/THF)還原，將所得固體溶于甲醇并煮沸15-20min，冷卻重結(jié)晶得樺木酸純品。采用 HPLC測定樺木酸的含量為96. 53%。
[0029] 本發(fā)明通過以下藥效學(xué)實驗證明樺木酸可以用于改善斷奶仔豬的腹瀉，并提高斷 奶仔豬的生長性能。
[0030] 實例 1 :
[0031] 健康雄性KM小鼠30只，4-5w，SPF級，體重（20 ± 2) g，許可證號：（湘）2009-0004， 飼料為M02小鼠普通育成料，小鼠和飼料購自湖南斯萊克景達實驗動物公司。小鼠置于 (22-25) °C，相對濕度為50%?70%的飼養(yǎng)房中，飼養(yǎng)Iw后，隨機分為3組，即空白對照組 (A組），環(huán)磷酰胺組（B組，腸粘膜損傷模型），樺木酸與環(huán)磷酰胺聯(lián)合組（C組，樺木酸按 0. 5mg/kg b w給與）。C組將樺木酸混懸于1 %的可溶性淀粉中，采用灌胃的方式給藥，A組 與B組僅灌服1%的可溶性淀粉，均按20ml/kg bw給與，Ι/d,連續(xù)14d，觀察臨床表現(xiàn)以及 體重變化。最后一次給與Ih后造模，B組和C組小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺（50mg/kg · bw)，A 組注射等體積的滅菌生理鹽水。飼養(yǎng)結(jié)束，小鼠禁食不禁水12h，脫頸椎處死，取材并進行各 項指標檢測。
[0032] 1)樺木酸對小鼠體重、胸腺指數(shù)和脾指數(shù)的影響
[0033] 樺木酸對小鼠體重、胸腺指數(shù)和脾指數(shù)的影響見表1，與空白對照組相比，環(huán)磷酰 胺組體重和脾指數(shù)有所降低，但差異不顯著；但胸腺指數(shù)明顯降低（P〈〇. 05)，提示環(huán)磷酰 胺使得正常小鼠免疫功能受到抑制，致使體重有所降低；與環(huán)磷酰胺組相比，樺木酸組小鼠 的體重、胸腺指數(shù)和脾指數(shù)都得到一定程度的恢復(fù)，且胸腺指數(shù)差異顯著（P〈〇. 05)，表明樺 木酸能改善免疫低下小鼠的免疫功能。
[0034] 表1樺木酸對小鼠體重、胸腺指數(shù)和脾指數(shù)的影響

【權(quán)利要求】
1. 樺木酸的應(yīng)用方法，其特征在于，所述的樺木酸用于制備家畜的抗腹瀉制劑。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的樺木酸的應(yīng)用方法，其特征在于，所述的抗腹瀉制劑還能提 高家畜的日增重，降低料肉比。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的樺木酸的應(yīng)用方法，其特征在于，所述的家畜為豬。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的樺木酸的應(yīng)用方法，其特征在于，所述的家畜為斷奶仔豬。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的樺木酸的應(yīng)用方法，其特征在于，將所述的樺木酸直接喂 食家畜或者添加到家畜的基礎(chǔ)日糧中喂食。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的樺木酸的應(yīng)用方法，其特征在于，所述的家畜為豬。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的樺木酸的應(yīng)用方法，其特征在于，所述的家畜為斷奶仔豬。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的樺木酸的應(yīng)用方法，其特征在于，將所述的樺木酸添加到斷 奶仔豬基礎(chǔ)日糧中的質(zhì)量比例為〇. 1?〇. 5%。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的樺木酸的應(yīng)用方法，其特征在于，將所述的樺木酸添加到斷 奶仔豬基礎(chǔ)日糧中的質(zhì)量比例為〇. 1?〇. 2%。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的樺木酸的應(yīng)用方法，其特征在于，所述的樺木酸的制備 過程為：從白樺樹皮中提取樺木醇，經(jīng)瓊斯試劑氧化制備中間產(chǎn)物樺木酮酸后，用硼氫化鈉 還原合成樺木酸。
【文檔編號】A23K1/16GK104222527SQ201410520978
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年9月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月30日
【發(fā)明者】易金娥, 鄔靜 申請人:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)