一種榿木的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種榿木的快速繁殖方法，包括外植體的消毒、無菌苗的獲得、叢生芽增殖、生根培養(yǎng)和煉苗移栽。本發(fā)明的榿木組培方法操作簡便，增殖系數(shù)好，成活率高，遺傳性狀穩(wěn)定，可以短期內(nèi)獲得大量的榿木幼苗。
【專利說明】一種榿木的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及榿木組織培養(yǎng)的快繁方法，屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 棺木，又名別名水冬瓜樹、水青風、棺蒿，為樺木科，棺 木屬植物。落葉喬木，是中國特有種和福建重要的鄉(xiāng)土樹種之一。屬瀕危等級國家II級重點 保護野生植物（國務(wù)院1999年8月4日批準)。喜光，喜溫暖氣候，適生于年平均氣溫15? 18°C,降水量900?1400mm的丘陵及平原、山區(qū)。對土壤適應(yīng)性強，喜水濕，多生于河灘低 濕地。以樹皮、嫩枝葉入藥。春季采集嫩枝葉，四季采樹皮，鮮用或曬干。目前榿木的繁殖 方法基本采用播種育苗，在貴州北部、甘肅南部、陜西西南部，安徽、湖南、湖北、江西、廣東、 江蘇等地有栽培。組培技術(shù)應(yīng)用于榿木尚未研究，利用組培技術(shù)可以縮短培養(yǎng)周期，提高繁 殖率，保持性狀的穩(wěn)定性。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種榿木的快速繁殖方法，由該方法所制備的 榿木組培方法簡便，增殖系數(shù)好，成活率高，遺傳性狀穩(wěn)定，可以短期內(nèi)獲得大量的榿木幼 苗。
[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下方案來實現(xiàn)的： 取榿木種子，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，水中浸泡24h，8h換一次水，超凈工作臺 上75%酒精處理30s，氯化汞處理20min，無菌水沖洗5-7遍，接入MS+GA3lmg/L培養(yǎng)基中 培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6g/L，PH5. 8,光照30001x，溫度26°C，生長出來的無菌芽苗，放 入增殖培養(yǎng)基 WPM+IAAO. lmg/L+TDZO. 2mg/L+0. 35mmol/L 腐胺，附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6g/ L，PH5. 8,光照40001x，增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WPM+NAAO. 2mg/L+半胱氨酸 100mg/L+5mg/LAgN03，將生根后的試管苗在培養(yǎng)室中打開瓶口練苗6d，在0. 1%的多菌靈藥 液中浸泡4d，取出幼苗，清洗干凈，栽植于珍珠巖：腐殖土 =1 :1的基質(zhì)中培養(yǎng)，20d后，移栽 入大田培養(yǎng)。
[0005] 采用本發(fā)明制備的榿木成活率為94%，周期短，產(chǎn)量大，能耗少，利于大規(guī)模種植。
[0006] 下面將結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步闡述，但本發(fā)明要求保護的范圍并不 局限于下列實施方式。
[0007] 實施例1 取榿木種子，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，水中浸泡24h，8h換一次水，超凈工作臺 上75%酒精處理30s，氯化汞處理20min，無菌水沖洗5-7遍，接入MS+GA3lmg/L培養(yǎng)基中 培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6g/L，PH5. 8,光照30001x，溫度26°C，生長出來的無菌芽苗，放 入增殖培養(yǎng)基 WPM+IAAO. 05mg/L+TDZ0. lmg/L+0. 35mmol/L 腐胺，附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6g/ L，PH5. 8,光照40001x，增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WPM+NAAO. lmg/L+半胱氨酸 100mg/L+5mg/LAgN03，將生根后的榿木試管苗進行室外煉苗移栽，榿木成活率為90%。
[0008] 實施例2 取榿木種子，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，水中浸泡24h，8h換一次水，超凈工作臺 上75%酒精處理30s，氯化汞處理20min，無菌水沖洗5-7遍，接入MS+GA3lmg/L培養(yǎng)基中 培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6g/L，PH5. 8,光照30001x，溫度26°C，生長出來的無菌芽苗，放 入增殖培養(yǎng)基 WPM+IAAO. 15mg/L+TDZ0. 3mg/L+0. 35mmol/L 腐胺，附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6g/ L，PH5. 8,光照40001x，增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WPM+NAAO. 2mg/L+半胱氨酸 50-100mg/L+5mg/LAgN03，將生根后的榿木試管苗進行室外煉苗移栽，榿木成活率為91%。 [0009] 實施例3 取榿木種子，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，水中浸泡24h，8h換一次水，超凈工作臺 上75%酒精處理30s，氯化汞處理20min，無菌水沖洗5-7遍，接入MS+GA3lmg/L培養(yǎng)基中 培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6g/L，PH5. 8,光照30001x，溫度26°C，生長出來的無菌芽苗，放 入增殖培養(yǎng)基 WPM+IAAO. lmg/L+TDZO. lmg/L+0. 35mmol/L 腐胺，附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6g/ L，PH5. 8,光照40001x，增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WPM+NAAO. lmg/L+半胱氨酸 50-100mg/L+5mg/LAgN03，將生根后的榿木試管苗進行室外煉苗移栽，榿木成活率為93%。 [0010] 實施例4 取榿木種子，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，水中浸泡24h，8h換一次水，超凈工作臺 上75%酒精處理30s，氯化汞處理20min，無菌水沖洗5-7遍，接入MS+GA3lmg/L培養(yǎng)基中培 養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6g/L，PH5. 8,光照30001x，溫度26°C，生長出來的無菌芽苗，放入 增殖培養(yǎng)基 WPM+IAAO. lmg/L+TDZO. 3mg/L+0. 35mmol/L 腐胺，附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6g/L， PH5. 8,光照40001x ;增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WPM+NAAO. 2mg/L+半胱氨酸 50-100mg/L+5mg/LAgN03，將生根后的榿木試管苗進行室外煉苗移栽，榿木成活率為92%。
【權(quán)利要求】
1. 一種榿木的快速繁殖方法，包括外植體的消毒、無菌苗的獲得、叢生芽增殖、生根培 養(yǎng)和煉苗移栽，其主要步驟如下： (1) 取榿木種子，對其進行滅菌處理； (2) 將步驟（1)滅菌處理過的榿木種子接入MS+GA3lmg/L培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加蔗糖30g/ L，瓊脂 6g/L，PH5. 8,光照 30001x，溫度 26°C ; (3) 取步驟（2)生長出來的無菌芽苗，放入增殖培養(yǎng)基WPM+IAAO. 05-0. 15mg/ L+TDZ0. 1-0. 3mg/L+0. 35mmol/L 腐胺，附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6g/L，PH5. 8,光照 40001x ; (4) 取步驟（3)增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WPM+NAA0. 1-0. 2mg/L+半胱氨 酸 100mg/L+5mg/LAgN03; (5) 取步驟（4)生根后的榿木進行煉苗移栽。
2. 按照權(quán)利要求1所述的一種榿木的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（1)中所述榿 木種子的滅菌處理為，取榿木種子，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，水中浸泡24h，8h換一 次水，超凈工作臺上75%酒精處理30s，氯化汞處理20min，無菌水沖洗5-7遍。
3. 按照權(quán)利要求1所述的一種榿木的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（2)無菌苗生 長培養(yǎng)中中附加了 GA3，能促進無菌苗的伸長生長。
4. 按照權(quán)利要求1所述的一種榿木的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（3)中的增殖 培養(yǎng)基 WPM+IAA0. 05-0. 15mg/L+TDZ0. 1-0. 3mg/L+0. 35mmol/L腐胺中附加了 0· 35mmol/L腐 胺可以促進不定芽的發(fā)生。
5. 按照權(quán)利要求1所述的一種榿木的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（4)中加入了 半胱氨酸l〇〇mg/L和5mg/LAgN03，半胱氨酸可以抗氧化，阻止在增殖過程中，出現(xiàn)褐化現(xiàn) 象，AgN0 3可以克服試管苗的玻璃化現(xiàn)象，且此兩種物質(zhì)的加入均待滅菌后的培養(yǎng)基冷卻到 60°C以下進行過濾滅菌。
6. 按照權(quán)利要求1所述的一種榿木的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（4)中的生根 培養(yǎng)條件為蔗糖20g/L，瓊脂6g/L，PH5. 8,光照80001x，濕度60-70%。
7. 按照權(quán)利要求1所述的一種榿木的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（5)中榿木的 煉苗培養(yǎng)方法為將生根后的試管苗在培養(yǎng)室中打開瓶口練苗6d，在0. 1%的多菌靈藥液中 浸泡4d，取出幼苗，清洗干凈，栽植于珍珠巖：腐殖土 =1 :1的基質(zhì)中培養(yǎng)，20d后，移栽入大 田培養(yǎng)。
【文檔編號】A01H4/00GK104206071SQ201410445594
【公開日】2014年12月17日 申請日期:2014年9月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月4日
【發(fā)明者】張金芳楊存 申請人:南京標科生物科技有限公司