一種美國紅火箭紫薇的組織培養(yǎng)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種美國紅火箭紫薇的組織培養(yǎng)方法,包括消毒滅菌、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和煉苗移栽。以美國紫薇當(dāng)年生嫩枝條為外植體,經(jīng)過無菌接種于誘芽培養(yǎng)基上,形成叢生芽后,利用叢生芽再進(jìn)行繼代培養(yǎng),然后轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根誘導(dǎo)形成生根苗,生根苗經(jīng)過煉苗馴化得到再生植株。本發(fā)明的方法使美國紫薇的繁殖更為容易,打破了季節(jié)與氣候的限制,繁殖周期縮短,再生植株成活率得到提高。
【專利說明】一種美國紅火箭紫薇的組織培養(yǎng)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物無性繁殖領(lǐng)域,具體涉及一種美國紅火箭紫薇的組織培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]美國紅火箭紫薇是紫薇中花色最鮮紅的品種之一,花鮮紅如國旗,花簇可達(dá)24英寸,花量大,花色艷麗,片植的色塊開花時(shí)一片火海?;ㄔ谇鐭崽鞛樾杉t色,多云涼爽天花色略淡,可能有白色斑,新葉微紅,老葉綠色略帶紅暈,葉芽在開花前為深紅色,開花時(shí)變成櫻桃紅。6月初始花,可連續(xù)開到霜降,花期進(jìn)行修剪,可多次開花。適應(yīng)性廣,抗逆性強(qiáng)。適合于孤植、叢植,培植為花籬,可制作盆景和樁景。美國紅火箭紫薇的組織培養(yǎng)方法是常用的培育繁殖方法,但是現(xiàn)有的組織培養(yǎng)方法存活率較低,容易受季節(jié)限制。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]發(fā)明目的:為了克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足,本發(fā)明提供一種美國紅火箭紫薇的組織培養(yǎng)方法法。
[0004]技術(shù)方案:為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供的一種美國紅火箭紫薇的組織培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
O消毒滅菌:選取美國紅火箭紫薇當(dāng)年生嫩枝條,用漂白粉浸泡10分鐘后,流水沖洗20分鐘,在超凈工作臺(tái)上以75%酒精浸泡30秒鐘,再轉(zhuǎn)入0.1%升汞溶液中滅菌10分鐘,倒去滅菌液,用預(yù)先準(zhǔn)備好的無菌水沖洗4?5遍,浙干水后,將消毒后的嫩枝接種到誘芽培養(yǎng)基上;
2)進(jìn)行接種培養(yǎng):將選取的外植體切成廣2厘米的小段接種在配置好的MS培養(yǎng)基上,培養(yǎng)25?30天左右,接種培養(yǎng)基成份為:MS基本培養(yǎng)基,附加2,4—D 1.5mg/L + BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L +瓊脂 5 ?7g/L,PH 值控制在 5.5?5.8 ;
3)繼代培養(yǎng):把切下叢生芽接種在MS+BA1.5mg/L + NAA 0.2mg/L +蔗糖30g/L +瓊脂5?7g/L,PH值5.6?5.7,MS培養(yǎng)基經(jīng)1.1kg/cm2高壓消毒15?20分鐘,在溫度25±2。。,光照強(qiáng)度20001uX,每日光照12小時(shí),至28?32天,小芽基部形成愈傷組織,并形成叢生芽,叢生小芽達(dá)到l_2cm。一般第一次繼代培養(yǎng)時(shí)增殖率2?3倍左右,經(jīng)2?3次繼代培養(yǎng)后增殖倍數(shù)可達(dá)到4-5倍左右。
[0005]4)生根培養(yǎng):當(dāng)小苗長(zhǎng)至2?3 cm時(shí),轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng):生根培養(yǎng)基配方為 1/3MS + NAA0.2mg/L + IBA0.5mg/L + 0.3% 活性炭+ 蔗糖 20g/L,溫度控制在 25 ?28V’ pH控制在5.5?5.7 ;光照強(qiáng)度為lOOOlux,每日光照10-12小時(shí)。一般15-20天左右可見白色短根形成,經(jīng)20-25天左右,即可進(jìn)行煉苗移栽。
5)煉苗和移栽:美國紅火箭紫薇組培苗煉苗,先在溫度23±2°C之間的溫室內(nèi)擰松瓶蓋放置3?5天,然后進(jìn)行溫床過渡移栽。過渡苗床(即溫床)建在普通單體的塑料大棚內(nèi)。移栽的過程中盡量減少傷根,并碰灑1000倍稀釋的多菌靈藥液??刂茰囟仍?(Γ30度,過渡移栽48?52天,可以上盆移栽。
[0006]有益效果:本發(fā)明的方法使美國紫薇的繁殖更為容易,打破了季節(jié)與氣候的限制,繁殖周期縮短,再生植株成活率得到提高,成活率能夠達(dá)到95%以上。
【具體實(shí)施方式】
[0007]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作更進(jìn)一步的說明。
[0008]一種美國紅火箭紫薇的組織培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
O消毒滅菌:選取美國紅火箭紫薇當(dāng)年生嫩枝條,用漂白粉浸泡10分鐘后,流水沖洗20分鐘,在超凈工作臺(tái)上以75%酒精浸泡30秒鐘,再轉(zhuǎn)入0.1%升汞溶液中滅菌10分鐘,倒去滅菌液,用預(yù)先準(zhǔn)備好的無菌水沖洗4?5遍,浙干水后,將消毒后的嫩枝接種到誘芽培養(yǎng)基上;
2)進(jìn)行接種培養(yǎng):將選取的外植體切成廣2厘米的小段接種在配置好的MS培養(yǎng)基上,培養(yǎng)25?30天左右,接種培養(yǎng)基成份為:MS基本培養(yǎng)基,附加2,4—D 1.5mg/L + BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L +瓊脂 5 ?7g/L,PH 值 5.5 左右;
3)繼代培養(yǎng):把切下叢生芽接種在MS+BA1.5mg/L + NAA 0.2mg/L +蔗糖30g/L +瓊脂5?7g/L,PH值5.6左右,MS培養(yǎng)基經(jīng)1.1kg/cm2高壓消毒15?20分鐘,在溫度25±2°C,光照強(qiáng)度20001uX,每日光照12小時(shí),至30天左右,小芽基部形成愈傷組織,并形成叢生芽,叢生小芽達(dá)到l_2cm。一般第一次繼代培養(yǎng)時(shí)增殖率2?3倍左右,經(jīng)2?3次繼代培養(yǎng)后增殖倍數(shù)可達(dá)到4-5倍左右。
[0009]4)生根培養(yǎng):當(dāng)小苗長(zhǎng)至2?3 cm時(shí),轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng):生根培養(yǎng)基配方為 1/3MS + NAA0.2mg/L + IBA0.5mg/L + 0.3% 活性炭+ 蔗糖 20g/L,溫度控制在 25 ?28°C,光照強(qiáng)度為lOOOlux,每日光照10-12小時(shí)。一般15-20天左右可見白色短根形成,經(jīng)20-25天左右,即可進(jìn)行煉苗移栽。
5)煉苗和移栽:美國紅火箭紫薇組培苗煉苗,先在溫度23±2°C之間的溫室內(nèi)擰松瓶蓋放置3?5天,然后進(jìn)行溫床過渡移栽。過渡苗床(即溫床)建在普通單體的塑料大棚內(nèi)。移栽的過程中盡量減少傷根,并碰灑1000倍稀釋的多菌靈藥液??刂茰囟仍?(Γ30度,過渡移栽50天左右,可以上盆移栽。
[0010]上述步驟相同,每個(gè)階段的培養(yǎng)基配方如下:
進(jìn)行接種培養(yǎng)時(shí)接種培養(yǎng)基為=MS基本培養(yǎng)基,附加2,4—D 1.5mg/L + BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L +瓊脂 5g/L,PH 值 5.5 ;
繼代培養(yǎng)基組分:MS+BA1.5mg/L + NAA 0.2mg/L +蔗糖 30g/L +瓊脂 7g/L,PH 值 5.6 ; 生根培養(yǎng)基配方為1/3MS + NAA0.2mg/L + IBA0.5mg/L + 0.3%活性炭+蔗糖20g/L。
[0011]選取1000株植株進(jìn)行組織培養(yǎng),最終成活978株,成活率達(dá)到97.8%。
[0012]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式,應(yīng)當(dāng)指出:對(duì)于本【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員來說,在不脫離本發(fā)明原理的前提下,還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾,這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種美國紅火箭紫薇的組織培養(yǎng)方法,其特征在于:包括以下步驟: 1)消毒滅菌:選取美國紅火箭紫薇當(dāng)年生嫩枝條,用漂白粉浸泡10分鐘后,流水沖洗20分鐘,在超凈工作臺(tái)上以75%酒精浸泡30秒鐘,再轉(zhuǎn)入0.1%升汞溶液中滅菌10分鐘,倒去滅菌液,用預(yù)先準(zhǔn)備好的無菌水沖洗4?5遍,浙干水后,將消毒后的嫩枝接種到誘芽培養(yǎng)基上; 2)進(jìn)行接種培養(yǎng):將選取的外植體切成廣2厘米的小段接種在配置好的MS培養(yǎng)基上,培養(yǎng)25?30天; 3)繼代培養(yǎng):把切下叢生芽接種在MS+BA1.5mg/L + NAA 0.2mg/L +蔗糖30g/L +瓊脂5?7g/L,PH值5.6?5.7,MS培養(yǎng)基經(jīng)1.1kg/cm2高壓消毒15?20分鐘,在溫度25±2。。,光照強(qiáng)度20001uX,每日光照12小時(shí),至28?32天,小芽基部形成愈傷組織,并形成叢生芽,叢生小芽達(dá)到l_2cm ; 4)生根培養(yǎng):當(dāng)小苗長(zhǎng)至2?3cm時(shí),轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng),溫度控制在25?28°C,光照強(qiáng)度為lOOOlux,每日光照10-12小時(shí)經(jīng)20-25天; 5)煉苗和移栽:美國紅火箭紫薇組培苗煉苗,先在溫度23±2°C之間的溫室內(nèi)擰松瓶蓋放置3?5天,然后進(jìn)行溫床過渡移栽,過渡溫床建在普通單體的塑料大棚內(nèi),移栽的過程中盡量減少傷根,并碰灑1000倍稀釋的多菌靈藥液,控制溫度在2(Γ30度,過渡移栽48?52天,上盆移栽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的美國紅葉紫薇的嫁接繁殖技術(shù),其特征在于:所述接種培養(yǎng)基成份為=MS 基本培養(yǎng)基,附加 2,4—D 1.5mg/L + BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L +瓊脂5?7g/L,PH值5.5?5.8。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的美國紅火箭紫薇的組織培養(yǎng)方法,其特征在于:所述生根培養(yǎng)基的配方為1/3重量含量的MS基本培養(yǎng)基,附加NAA0.2mg/L + IBA0.5mg/L + 0.3%活性炭+蔗糖20g/L, PH值為5.5?5.7。
【文檔編號(hào)】A01G1/00GK104126506SQ201410346690
【公開日】2014年11月5日 申請(qǐng)日期:2014年7月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月21日
【發(fā)明者】蔡鴻宇, 史云光, 張榮良, 戴靜, 查立勝 申請(qǐng)人:江蘇綠苑園林建設(shè)有限公司