一種澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法，屬于果樹雜交育種【技術(shù)領(lǐng)域】。它包括去雄、采集花粉和人工授粉三個(gè)步驟，其中去雄是在澳洲堅(jiān)果盛花期，選擇大部分花蕾發(fā)白、花被管裂開且花柱突出第1d的花序，去掉花被管沒(méi)有裂開的小花，并對(duì)花柱突出第1d的小花進(jìn)行疏除至每個(gè)花序留30-100朵小花，在小花花柱突出彎曲的部位切斷花被管，切斷的花被管上部分向外翻時(shí)或切斷花被管10-30分鐘后，去除花被片并套袋封口，得到去雄花序。本發(fā)明的方法有效的提高了澳洲堅(jiān)果去雄的效率，使人工操作去雄更加簡(jiǎn)單快捷，同時(shí)避免了偽雜種的產(chǎn)生，提高了雜交種的純度。
【專利說(shuō)明】一種澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于果樹雜交育種【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉一種澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]澳洲堅(jiān)果(Macadamia spp.),原產(chǎn)于澳大利亞昆士蘭州東南部和新南威爾士州北部沿海的亞熱帶雨林，為多年生常綠喬木果樹。我國(guó)于上世紀(jì)70年代開始澳洲堅(jiān)果引種試種，現(xiàn)今已有50多年的栽培史，澳洲堅(jiān)果的栽培面積已超過(guò)了主產(chǎn)國(guó)澳大利亞，但是商業(yè)性種植品種主要是國(guó)外育成品種，目前我國(guó)尚無(wú)自己選育的品種，為了滿足生產(chǎn)和研究的需要，為了選育適合我國(guó)氣候環(huán)境的、具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新品種，我國(guó)于2009年開始啟動(dòng)澳洲堅(jiān)果育種工作，而雜交育種仍然是澳洲堅(jiān)果新品種選育的最主要方法，是澳洲堅(jiān)果育種中最重要和最有效的途徑，也是目前使用最廣泛的方法。由于澳洲堅(jiān)果的結(jié)實(shí)率一般較低，為了獲得一定的雜交種子數(shù)，就必須做更多的雜交花數(shù)。在澳洲堅(jiān)果雜交育種過(guò)程中，為了保證獲得所配置組合的純正雜交種子，去雄雜交是重要的步驟之一。1954年，澳大利亞學(xué)者URATA曾用針?biāo)洪_花被片，后用鑷子去掉雄蕊的方法來(lái)去雄，2009年林玉虹、陳顯國(guó)等也用此方法對(duì)澳洲堅(jiān)果進(jìn)行雜交授粉試驗(yàn)。這種去雄方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力，柱頭受傷的概率較大，由于受傷柱頭多，坐果率比較低。因此，如何克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足是目前果樹雜交育種【技術(shù)領(lǐng)域】亟需解決的問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足，本發(fā)明的目的是提供一種工作效率更高的去雄方法，避免了偽雜種的產(chǎn)生 ，提高了雜交種的純度。
[0004]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
[0005]一種澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法，包括如下步驟:
[0006]步驟(1)，去雄:在澳洲堅(jiān)果盛花期，選擇大部分花蕾發(fā)白、花被管裂開且花柱突出第Id的花序，去掉花被管沒(méi)有裂開的小花，并對(duì)花柱突出第Id的小花進(jìn)行疏除至每個(gè)花序留30-100朵小花,在小花花柱突出彎曲的部位切斷花被管，切斷的花被管上部分向外翻時(shí)或切斷花被管10-30分鐘后，去除花被片并套袋封口，得到去雄花序，本方法稱之為切管連被去雄法；
[0007]步驟(2)，采集花粉:對(duì)母本花序去雄的當(dāng)天，在父本樹上選擇即將開放的花序套袋，授粉前選擇袋內(nèi)24小時(shí)之內(nèi)開放的花序，將花序放入試管內(nèi)，左右各螺旋式旋轉(zhuǎn)試管
3-5下，讓花粉盡可能多的粘到試管內(nèi)壁上，待試管內(nèi)壁上能夠明顯的看到一層花粉時(shí)即可，采集完花粉的試管用濕毛巾包裹，試管口包在濕毛巾內(nèi)，濕毛巾以不滴水為宜，得到授粉試管；
[0008]步驟(3)，人工授粉:步驟(1)得到的去雄花序在40_48h后，去掉步驟(2)得到的授粉試管外包裹的濕毛巾，然后將其放入授粉試管內(nèi)，左右各螺旋式旋轉(zhuǎn)試管2-3下，上下移動(dòng)試管1-2下即完成授粉，套袋，IOd后撤袋。[0009]步驟(1)中所述的切斷花被管采用鋒利的U型小剪刀。
[0010]步驟(1)中所述的去除花被片的方式為用手或鑷子輕輕去除。
[0011]步驟⑵中所述的試管規(guī)格為25X200mm，且為透明材質(zhì)內(nèi)壁光滑的試管。
[0012]每支步驟⑵得到的授粉試管能授粉3-5個(gè)步驟⑴得到的去雄花序。
[0013]步驟(3)授粉的環(huán)境條件為溫度18-21 °C，相對(duì)濕度60-70%，晴朗、無(wú)風(fēng)或微風(fēng)的天氣。
[0014]步驟(3)人工授粉后24小時(shí)內(nèi)降中到大雨，需重新人工授粉。
[0015]所述的步驟(3)所述的人工授粉時(shí)期為I月下旬至2月下旬或盛花期，盛花期為父母本樹上開花數(shù)量在25% -75%之間時(shí)。
[0016]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其有益效果為:(1)本發(fā)明的切管連被去雄法是將花被片一次去除而成功去雄,速度快,受傷柱頭較少,母本花的柱頭外露,便于授粉；(2)本發(fā)明在研究了澳洲堅(jiān)果花器特征、花藥散粉時(shí)間、柱頭可授性、花粉萌發(fā)率高峰時(shí)間、花粉的收集等授粉特性的基礎(chǔ)上，確定澳洲堅(jiān)果人工授粉中的去雄時(shí)間、花粉采集時(shí)間及方法、授粉時(shí)間及方法和撤袋時(shí)間，有效地提高了人工雜交授粉的效率，避免了偽雜種的產(chǎn)生，提高了雜交種的純度；(3)經(jīng)本發(fā)明方法雜交育種最終坐果率高達(dá)6%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高出于自然授粉的平均坐果率，其中，自然授粉的平均坐果率為0.22%。
具體實(shí)施例
[0017]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
[0018]以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。在不背離本發(fā)明精神和實(shí)質(zhì)的情況下，對(duì)本發(fā)明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。若未特別指明，實(shí)施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段。
[0019]實(shí)施例1
[0020]本實(shí)施例澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法采用的澳洲堅(jiān)果品種D4為母本，品種HAES900為父本，各選擇3株，具體包括以下步驟:
[0021]步驟(1)，去雄:在澳洲堅(jiān)果品種D4的盛花期，選擇大部分花蕾發(fā)白、花被管裂開且花柱突出第Id的花序，去掉花被管沒(méi)有裂開的小花，并對(duì)花柱突出第Id的小花進(jìn)行疏除至每個(gè)花序留30朵小花，在小花花柱突出彎曲的部位，用鋒利的U型小剪刀切斷花被管，切斷花被管10分鐘后，用鑷子輕輕去除花被片并套袋封口，得到去雄花序；
[0022]步驟(2)，采集花粉:對(duì)母本花序去雄的當(dāng)天，在父本HAES900的樹上選擇即將開放的花序套袋，授粉前選擇袋內(nèi)24小時(shí)之內(nèi)開放的花序，用規(guī)格為25 X 200mm、透明材質(zhì)內(nèi)壁光滑的試管取花粉，把花序放入干凈的試管內(nèi)，左右各螺旋式旋轉(zhuǎn)試管3下，讓花粉盡可能多的粘到試管內(nèi)壁上，待試管內(nèi)壁上能夠明顯的看到一層花粉時(shí)即可；采集完花粉的試管標(biāo)上標(biāo)簽，用濕毛巾包裹，試管口包在濕毛巾內(nèi)，濕毛巾以不滴水為宜，得到授粉試管；
[0023]步驟(3)，人工授粉:步驟(1)得到的去雄花序在40h后，去掉步驟(2)得到的授粉試管外包裹的濕毛巾，然后將其放入授粉試管內(nèi)，左右各螺旋式旋轉(zhuǎn)試管2下，上下移動(dòng)試管I下即完成授粉，套袋后掛上標(biāo)簽，注明父母本，每支步驟(2)得到的授粉試管可授粉3個(gè)步驟(1)得到的去雄花序；授粉結(jié)束后IOd撤袋。
[0024]授粉時(shí)期為I月下旬，；授粉環(huán)境條件優(yōu)選為溫度18_21°C、相對(duì)濕度60-70%、晴朗、微風(fēng)；
[0025]授粉后5個(gè)月調(diào)查最終坐果數(shù)，去雄授粉的坐果率為5% (坐果率=坐果數(shù)/授粉花朵數(shù)*100% )。
[0026]實(shí)施例2
[0027]本實(shí)施例澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法采用的澳洲堅(jiān)果品種D4為母本，品種HAES900為父本，各選擇4株，具體包括以下步驟:
[0028]步驟(1)，去雄:在澳洲堅(jiān)果品種D4的盛花期，選擇大部分花蕾發(fā)白、花被管裂開且花柱突出第Id的花序，去掉花被管沒(méi)有裂開的小花，并對(duì)花柱突出第Id的小花進(jìn)行疏除至每個(gè)花序留100朵小花，在小花花柱突出彎曲的部位，用鋒利的U型小剪刀切斷花被管，切斷花被管30分鐘后，用手輕輕去除花被片并套袋封口，得到去雄花序；
[0029]步驟(2)，采集花粉:對(duì)母本花序去雄的當(dāng)天，在父本HAES900的樹上選擇即將開放的花序套袋，授粉前選擇袋內(nèi)24小時(shí)之內(nèi)開放的花序，用規(guī)格為25 X 200mm、透明材質(zhì)內(nèi)壁光滑的試管取花粉，把花序放入干凈的試管內(nèi)，左右各螺旋式旋轉(zhuǎn)試管5下，讓花粉盡可能多的粘到試管內(nèi)壁上，待試管內(nèi)壁上能夠明顯的看到一層花粉時(shí)即可；采集完花粉的試管標(biāo)上標(biāo)簽，用濕毛巾包裹，試管 口包在濕毛巾內(nèi)，濕毛巾以不滴水為宜，得到授粉試管；
[0030]步驟(3)，人工授粉:步驟⑴得到的去雄花序在48h后，去掉步驟⑵得到的授粉試管外包裹的濕毛巾，然后將其放入授粉試管內(nèi)，左右各螺旋式旋轉(zhuǎn)試管3下，上下移動(dòng)試管2下即完成授粉，套袋后掛上標(biāo)簽，注明父母本，每支步驟(2)得到的授粉試管可授粉5個(gè)步驟(1)得到花序；授粉結(jié)束后IOd撤袋。
[0031]授粉時(shí)期為2月下旬，授粉環(huán)境條件優(yōu)選為溫度18_21°C、相對(duì)濕度60-70%、晴朗、無(wú)風(fēng)；
[0032]授粉后5個(gè)月調(diào)查最終坐果數(shù)，去雄授粉的坐果率為5.6%。
[0033]實(shí)施例3
[0034]本實(shí)施例澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法采用的澳洲堅(jiān)果品種D4為母本，品種HAES900為父本，各選擇5株，具體包括以下步驟:
[0035]步驟(1)，去雄:在澳洲堅(jiān)果品種D4的盛花期，選擇大部分花蕾發(fā)白、花被管裂開且花柱突出第Id的花序，去掉花被管沒(méi)有裂開的小花，并對(duì)花柱突出第Id的小花進(jìn)行疏除至每個(gè)花序留60朵小花，在小花花柱突出彎曲的部位，用鋒利的U型小剪刀切斷花被管，切斷的花被管上部分向外翻時(shí)，用手輕輕去除花被片并套袋封口，得到去雄花序；
[0036]步驟(2)，采集花粉:對(duì)母本花序去雄的當(dāng)天，在父本HAES900的樹上選擇即將開放的花序套袋，授粉前選擇袋內(nèi)24小時(shí)之內(nèi)開放的花序，用規(guī)格為25 X 200mm、透明材質(zhì)內(nèi)壁光滑的試管取花粉，把花序放入干凈的試管內(nèi)，左右各螺旋式旋轉(zhuǎn)試管4下，讓花粉盡可能多的粘到試管內(nèi)壁上，待試管內(nèi)壁上能夠明顯的看到一層花粉時(shí)即可；采集完花粉的試管標(biāo)上標(biāo)簽，用濕毛巾包裹，試管口包在濕毛巾內(nèi)，濕毛巾以不滴水為宜，已收集好花粉的試管稱為授粉試管；
[0037]步驟(3)，人工授粉:步驟(1)得到去雄花序在去除花被片44h后，去掉步驟(2)得到的授粉試管外包裹的濕毛巾，然后將其放入授粉試管內(nèi)，左右各螺旋式旋轉(zhuǎn)試管2下，上下移動(dòng)試管2下即完成授粉，套袋后掛上標(biāo)簽，注明父母本，每支步驟(2)得到的授粉試管可授粉4個(gè)步驟(1)得到花序；授粉結(jié)束后IOd撤袋。[0038]授粉時(shí)期為2月上旬；授粉環(huán)境條件優(yōu)選為溫度18_21°C、相對(duì)濕度60-70%、晴朗、無(wú)風(fēng)；
[0039]授粉后5個(gè)月調(diào)查最終坐果數(shù)，去雄授粉的坐果率為6%。
[0040]實(shí)施例4
[0041]本實(shí)施例澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法采用的澳洲堅(jiān)果品種788為母本，品種HAES900為父本，各選擇3株，具體包括以下步驟:
[0042]步驟(1)，去雄:在澳洲堅(jiān)果品種788的盛花期，選擇大部分花蕾發(fā)白、花被管裂開且花柱突出第Id的花序，去掉花被管沒(méi)有裂開的小花，并對(duì)花柱突出第Id的小花進(jìn)行疏除至每個(gè)花序留50朵小花，在小花花柱突出彎曲的部位，用鋒利的U型小剪刀切斷花被管，切斷花被管20分鐘后，用鑷子輕輕去除花被片并套袋封口，得到去雄花序；
[0043]步驟(2)，采集花粉:對(duì)母本花序去雄的當(dāng)天，在父本HAES900的樹上選擇即將開放的花序套袋，授粉前選擇袋內(nèi)24小時(shí)之內(nèi)開放的花序，用規(guī)格為25 X 200mm、透明材質(zhì)內(nèi)壁光滑的試管取花粉，把花序放入干凈的試管內(nèi)，左右各螺旋式旋轉(zhuǎn)試管4下，讓花粉盡可能多的粘到試管內(nèi)壁上，待試管內(nèi)壁上能夠明顯的看到一層花粉時(shí)即可；采集完花粉的試管標(biāo)上標(biāo)簽，用濕毛巾包裹，試管口包在濕毛巾內(nèi)，濕毛巾以不滴水為宜，已收集好花粉的試管稱為授粉試管； [0044]步驟(3)，人工授粉:步驟(1)得到去雄花序在去除花被片45h后，去掉步驟(2)得到的授粉試管外包裹的濕毛巾，然后將其放入授粉試管內(nèi)，左右各螺旋式旋轉(zhuǎn)試管3下，上下移動(dòng)試管2下即完成授粉，套袋后掛上標(biāo)簽，注明父母本，每支步驟(2)得到的授粉試管可授粉4個(gè)步驟(1)得到花序；授粉結(jié)束后IOd撤袋。
[0045]授粉時(shí)期為盛花期；授粉環(huán)境條件優(yōu)選為溫度18_21°C、相對(duì)濕度60-70%、晴朗、無(wú)風(fēng)；
[0046]授粉后5個(gè)月調(diào)查最終坐果數(shù)，去雄授粉的坐果率為4.5%。
[0047]對(duì)比試驗(yàn):用本發(fā)明的切管連被去雄法與URATA和林玉虹的針?biāo)喝バ鄯椒ㄗ鞅容^，以澳洲堅(jiān)果品種D4為母本，品種HAES900為父本，各選擇3株。切管連被去雄法的具體步驟同實(shí)例3，URATA的針?biāo)喝バ鄯椒?用針輕輕撕開花被片后用鑷子去掉雄蕊，再用手指將花被片推回原來(lái)的位置，使小花恢復(fù)原狀。試驗(yàn)按完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，根據(jù)去雄時(shí)的小花所處狀態(tài)，針?biāo)喝バ鄯ㄔO(shè)3個(gè)處理為花被管裂開前Id、花被管裂開花柱突出第Id、花被管裂開花柱突出第2d，去雄后套袋，開花后授粉。每處理去雄50朵小花，重復(fù)3次。調(diào)查去雄所需時(shí)間、柱頭受傷率及授粉后20d的坐果率。結(jié)果如表1。由表1可以看出本發(fā)明的切管連被去雄方法是將花被片一次去除而成功去雄，速度快，受傷柱頭較少，母本花的柱頭外露，便于授粉；去雄后，母本花朵無(wú)花瓣和花藥，不誘傳媒昆蟲，為防萬(wàn)一有傳媒昆蟲停留柱頭，而需套袋，傳媒昆蟲少的地方，可以不套袋，而且由于受傷柱頭少，坐果率比較高；URATA和林玉虹的針?biāo)喝バ鄯ㄊ怯冕樰p輕撕開花被片后用鑷子逐一去掉雄蕊來(lái)達(dá)到去雄的目的，這種去雄方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力，柱頭受傷的概率較大，由于受傷柱頭多，坐果率比較低。
[0048]表1
[0049]
【權(quán)利要求】
1.一種澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法，其特征在于包括如下步驟: 步驟(1)，去雄:在澳洲堅(jiān)果盛花期，選擇大部分花蕾發(fā)白、花被管裂開且花柱突出第Id的花序，去掉花被管沒(méi)有裂開的小花，并對(duì)花柱突出第Id的小花進(jìn)行疏除至每個(gè)花序留30-100朵小花，在小花花柱突出彎曲的部位切斷花被管，切斷的花被管上部分向外翻時(shí)或切斷花被管10-30分鐘后，去除花被片并套袋封口，得到去雄花序； 步驟(2)，采集花粉:對(duì)母本花序去雄的當(dāng)天，在父本樹上選擇即將開放的花序套袋，授粉前選擇袋內(nèi)24小時(shí)之內(nèi)開放的花序，將花序放入試管內(nèi)，左右各螺旋式旋轉(zhuǎn)試管3-5下，采集完花粉的試管用濕毛巾包裹，得到授粉試管； 步驟(3)，人工授粉:步驟(1)得到的去雄花序在40-48h后，去掉步驟(2)得到的授粉試管外包裹的濕毛巾，然后將其放入授粉試管內(nèi)，左右各螺旋式旋轉(zhuǎn)試管2-3下，上下移動(dòng)試管1-2下即完成授粉，套袋，IOd后撤袋。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法，其特征在于:步驟(1)中所述的切斷花被管采用鋒利的U型小剪刀。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法，其特征在于:步驟(1)中所述的去除花被片的方式為用手或鑷子輕輕去除。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法，其特征在于步驟(2)中所述的試管規(guī)格為25 X 200mm,且為透明材質(zhì)內(nèi)壁光滑的試管。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法，其特征在于每支步驟(2)得到的授粉試管能授粉3-5個(gè)步驟(1)得到去雄花序。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法，其特征在于步驟(3)授粉的環(huán)境條件為溫度18-21°C，相對(duì)濕度60-70%，晴朗、無(wú)風(fēng)或微風(fēng)的天氣。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法，其特征在于步驟(3)人工授粉后24小時(shí)內(nèi)降中到大雨，需重新人工授粉。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的澳洲堅(jiān)果雜交育種的方法，其特征在于所述的步驟(3)所述的人工授粉時(shí)期為I月下旬至2月下旬或盛花期。
【文檔編號(hào)】A01H1/02GK103999765SQ201410234111
【公開日】2014年8月27日 申請(qǐng)日期:2014年5月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月29日
【發(fā)明者】陶麗, 賀熙勇, 倪書邦, 陳麗蘭, 肖曉明, 陳國(guó)云, 孔廣紅 申請(qǐng)人:云南省熱帶作物科學(xué)研究所