一種快速選育蘭花新品種的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明屬于植物雜交育種【技術(shù)領(lǐng)域】，具體公開(kāi)一種快速選育蘭花新品種的方法。本發(fā)明通過(guò)對(duì)現(xiàn)有的蘭花育種方法進(jìn)行創(chuàng)新改良，省去常規(guī)雜交育種過(guò)程中在獲得雜種后代后進(jìn)行單株選擇的過(guò)程，而是直接由雜種果實(shí)進(jìn)行單種子快繁生產(chǎn)株系，將蘭花新品種的選育時(shí)間由傳統(tǒng)的12年縮短為6年，大大縮短了蘭花雜交育種的周期，提高了育種效率。由于蘭花新品種選育時(shí)間的縮短，使育種家能夠?qū)?fù)雜多變的市場(chǎng)需求做出更加快速準(zhǔn)確的反應(yīng)，從而使選育出來(lái)的蘭花新品種具有更強(qiáng)的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益都將十分明顯。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種快速選育蘭花新品種的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物雜交育種【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地涉及一種快速選育蘭花新品種的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蘭花通常是對(duì)蘭科蘭屬植物的統(tǒng)稱，是一類(lèi)具有重要觀賞價(jià)值、經(jīng)濟(jì)價(jià)值、文化價(jià)值和生態(tài)價(jià)值的世界名花。世界上已發(fā)現(xiàn)的蘭屬植物約68種，其中在我國(guó)發(fā)現(xiàn)49種，占全世界的72.1%。蘭花在我國(guó)具有悠久的栽培歷史和豐富的文化內(nèi)涵，素有“花中君子”之稱，蘭花也深受世界各國(guó)人們的喜愛(ài)，即可作為高檔切花，也可作為高檔盆花。隨著人們生活水平和文化素質(zhì)的提高，蘭花開(kāi)始走進(jìn)尋常百姓家，受到越來(lái)越多消費(fèi)者的喜愛(ài)，具有廣闊的市場(chǎng)前景。
[0003]蘭花育種是蘭花產(chǎn)業(yè)發(fā)展的創(chuàng)新驅(qū)動(dòng)力和產(chǎn)業(yè)技術(shù)的制高點(diǎn)，及時(shí)快速的推出新品種是保持蘭花產(chǎn)業(yè)健康可持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵。但是長(zhǎng)期以來(lái)，蘭花的育種以自然選種為主，自種子無(wú)菌萌發(fā)成功后，蘭花的雜交育種逐漸興起并發(fā)展成蘭花育種的一種主要方式。國(guó)外，通過(guò)人工雜交已獲得大量種間、屬間雜交種，培育出具有不同花色、花型、具有香味和高抗逆性的雜交種。但是，我國(guó)蘭屬植物雜交育種起步較晚，同時(shí)由于育種周期長(zhǎng)、難度大，開(kāi)展蘭花雜交育種單位少，品種改良緩慢。傳統(tǒng)的蘭花雜交育種方法主要包括以下步驟:(1)配置雜交組合:根據(jù)育種目標(biāo)，選擇雜交親本，配置雜交組合，獲得果實(shí)；(2)雜種后代苗生產(chǎn):對(duì)蘭花種子進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)，獲得大量雜種后代種子苗；(3)單株選擇:對(duì)獲得的種子苗進(jìn)行栽培，通過(guò)對(duì)育種目 標(biāo)性狀的觀察，從大量的雜種后代植株選擇優(yōu)良的單株；(4)營(yíng)養(yǎng)芽快繁生產(chǎn)株系:選擇優(yōu)良單株的營(yíng)養(yǎng)芽進(jìn)行組培快繁，經(jīng)過(guò)增殖、分化形成株系；(5)新品系選擇:將獲得的株系種植后進(jìn)行株系栽培和品種比較試驗(yàn)，觀察其苗期和開(kāi)花期的表現(xiàn)，根據(jù)育種的目標(biāo)從栽培的株系中選擇新品系；(6)多年多點(diǎn)試驗(yàn):對(duì)獲選的新品系進(jìn)行多年多點(diǎn)試驗(yàn)，觀察新品系的綜合表現(xiàn)和主要觀賞性狀穩(wěn)定性；(7)申請(qǐng)品種審定。按照上述雜交育種方法開(kāi)展蘭花育種，選育一個(gè)新品種通常需要12年左右的時(shí)間，這導(dǎo)致了蘭花雜交育種周期長(zhǎng)、效率低，難以滿足市場(chǎng)對(duì)新品種的需求。
[0004]因此，改良目前蘭花雜交育種的方法，縮短育種周期，提高育種效率，不斷培育出具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)和市場(chǎng)前景的蘭花新品種，對(duì)提高我國(guó)花卉產(chǎn)業(yè)的核心競(jìng)爭(zhēng)力和效益、盡快縮小我國(guó)蘭花育種和國(guó)外的差距、促進(jìn)花卉產(chǎn)業(yè)高效可持續(xù)發(fā)展具有十分重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)蘭花雜交育種周期長(zhǎng)的技術(shù)缺陷，提供一種周期短、育種效率高的快速選育蘭花新品種的方法。
[0006]一種快速選育蘭花新品種的方法，包括以下步驟:
S1.配置雜交組合:根據(jù)育種目標(biāo)，選擇雜交親本，配置雜交組合，在適宜的條件下栽培母本植株，獲得果實(shí)；52.單種子快繁:對(duì)果實(shí)進(jìn)行消毒，取其種子進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)獲得中間繁殖體，將單粒種子形成的中間繁殖體切成直徑2~3 _小塊進(jìn)行增殖培養(yǎng)，當(dāng)獲得100塊以上的中間繁殖體時(shí)即可進(jìn)行芽分化培養(yǎng)獲得試管苗，試管苗移栽后即可形成大量不同的株系；
53.決選新品系:將獲得的株系種植后進(jìn)行株系栽培和品種比較試驗(yàn)，觀察其苗期和開(kāi)花期的表現(xiàn)，根據(jù)育種的目標(biāo)從眾多的株系中選擇新品系；
54.多年多點(diǎn)試驗(yàn):對(duì)獲選的新品系進(jìn)行多年多點(diǎn)試驗(yàn)，觀察新品系的綜合表現(xiàn)和主要觀賞性狀穩(wěn)定性；
55.申請(qǐng)品種審定。
[0007]本發(fā)明通過(guò)直接由雜種果實(shí)進(jìn)行單種子快繁生產(chǎn)株系，省去了常規(guī)雜交育種過(guò)程中在獲得雜種后代后進(jìn)行單株選擇的過(guò)程，從而縮短了選育周期，提高了育種效率。
[0008]進(jìn)一步地,所述步驟S2包括以下步驟:
521.果實(shí)消毒、接種和初代培養(yǎng):將雜交后5~11個(gè)月的果實(shí)洗凈，然后用75%乙醇消毒8~15分鐘，無(wú)菌水沖洗3次，取其內(nèi)部種子接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得中間繁殖體；培養(yǎng)條件為溫度25~28°C，暗培養(yǎng)或散射光培養(yǎng)； 522.中間繁殖體的增殖:將種子萌發(fā)后形成的中間繁殖體分開(kāi)，將單個(gè)中間繁殖體或?qū)⑵淝谐芍睆?~3 mm小塊，分別接種于固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為溫度25~28°C，每日光照8~12小時(shí)，光照強(qiáng)度800~1500 Iux ;當(dāng)中間繁殖體繁殖到100塊以上時(shí)進(jìn)行芽分化培養(yǎng)。
[0009]S23.中間繁殖體芽分化:將中間繁殖體分開(kāi)，接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)；
培養(yǎng)條件為溫度25~28°C，每日光照10~14小時(shí)，光照強(qiáng)度1000~2000 Iux ；
524.生根壯苗:選取2cm左右的芽，接種于固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)；
培養(yǎng)條件為溫度25~28°C，每日光照10~14小時(shí)，光照強(qiáng)度1500~3000 Iux ；
525.試管苗移栽:當(dāng)小苗長(zhǎng)至5~8cm并具有2條以上根時(shí)進(jìn)行煉苗；煉苗時(shí)，將培養(yǎng)瓶蓋子旋松，放在溫室中10~20 d或在室外無(wú)直射光的地方放置3~5 d后,取出試管苗移栽。
[0010]本發(fā)明經(jīng)過(guò)大量探索性試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，將中間繁殖體切成直徑2~3 mm的小塊進(jìn)行增殖培養(yǎng)時(shí)，中間繁殖體的增值速度較快，且有利于減少培養(yǎng)過(guò)程中的褐變和變異的發(fā)生。
[0011]更進(jìn)一步地，步驟S21中所述的固體培養(yǎng)基配方為MS培養(yǎng)基+0.5~I mg/16-BA+0.1 ~0.2mg/l NAA+5 ~20% (w/w)挪子汁 +0.2 ~lg/L 活性碳 +30g/L 糖 +8g/L 瓊月旨。S22所述固體培養(yǎng)基配方為MS培養(yǎng)基+1~2mg/l 6-BA+0.2~0.5mg/l NAA+10% (w/w)椰子汁+30g/L糖+8g/L瓊脂。S23所述固體培養(yǎng)基配方為1/2 MS培養(yǎng)基+0.2~I mg/I NAA +20g/L 糖+8g/L 瓊脂。
[0012]S3所述株系栽培包括如下步驟:
531.組培苗煉苗:當(dāng)組培苗為株高4~8cm、葉片3~5片、根數(shù)2~4條時(shí)，將組培瓶移入溫室，適當(dāng)遮陰，將光照控制在4000~10000 Iux ；
532.組培苗上盆初期管理:將試管苗取出，流水沖洗干凈，用1000倍百菌清浸泡5~10 min，晾干后對(duì)試管苗進(jìn)行分級(jí)種植，I月后第一次施肥，促使新根長(zhǎng)出；光照度7000~10000 lux，溫度 22 ~30°C，濕度 50 ~70% ；
533.中苗管理:當(dāng)小苗株高8~12厘米時(shí)，可換入9或12厘米盆栽種，所用肥料種類(lèi)同小苗，濃度適當(dāng)加大；光照度15000 lux，溫度25~30°C，濕度50~70% ；
534.大苗管理:中苗株高為18-22厘米左右，長(zhǎng)出新芽，根系健壯時(shí)可以換種12或15厘米盆，此時(shí)適當(dāng)增加氮肥，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)；光照度15000~20000 lux，溫度25~30°C，濕度50~70% ；
535.花芽分化和抽梗期:減少氮肥，增施磷鉀肥，并適當(dāng)控制水分，增加光照，以促進(jìn)花芽分化，當(dāng)花葶長(zhǎng)達(dá)20厘米以上時(shí)，插桿牽引。
[0013]此外，栽培中要注意莖基腐病、炭疽病、紅蜘蛛、介殼蟲(chóng)等的防治。平時(shí)采取“預(yù)防為主，防治結(jié)合”的方針，每月噴施1-2次殺菌劑和殺蟲(chóng)劑，并注意更換用藥的品種，避免產(chǎn)生抗藥性。一旦發(fā)現(xiàn)有病苗，及時(shí)剪除病葉，并帶出棚外。
[0014]更進(jìn)一步地，步驟S3中所述品種比較試驗(yàn)為將待選的蘭花新品系與其父本、母本和性狀相近的對(duì)照品種進(jìn)行品種比較試驗(yàn)，對(duì)不同品種在株型、葉片、花序、花朵、開(kāi)花期、組培快繁特性和抗性方面進(jìn)行差異性比較，明確新品系具有的性狀特點(diǎn)。
[0015]步驟S4中所述多年多點(diǎn)試驗(yàn)為將選擇的蘭花新品系與性狀上相近的對(duì)照品種和雙親在不同區(qū)域進(jìn)行多年的種植，不同種植點(diǎn)的氣候條件和大棚的培養(yǎng)條件應(yīng)該具有差異，以便對(duì)蘭花新品種的育種目標(biāo)性狀在不同環(huán)境條件下和不同年份的穩(wěn)定性進(jìn)行觀察，同時(shí)找出在不同栽培條件下的成品生產(chǎn)技術(shù)。
[0016]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果:
本發(fā)明通過(guò)對(duì)現(xiàn)有的蘭花育種方法進(jìn)行創(chuàng)新改良，省去常規(guī)雜交育種過(guò)程中在獲得雜種后代后進(jìn)行單株選擇的 過(guò)程，而是直接由雜種果實(shí)進(jìn)行單種子快繁生產(chǎn)株系，將蘭花新品種的選育時(shí)間由傳統(tǒng)的12年縮短為6年，大大縮短了蘭花雜交育種的周期，提高了育種效率。由于蘭花新品種選育時(shí)間的縮短，使育種家能夠?qū)?fù)雜多變的市場(chǎng)需求做出更加快速準(zhǔn)確的反應(yīng)，從而使選育出來(lái)的蘭花新品種具有更強(qiáng)的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益都將十分明顯。
[0017]說(shuō)明書(shū)附圖。
[0018]圖1蘭花新品種快速選育方法示意圖。
[0019]圖2蘭花常規(guī)雜交育種方法示意圖。
[0020]圖3 ‘小風(fēng)墨蘭’及其雙親和‘小香墨蘭’的開(kāi)花株和花朵比較圖。
[0021]a.大鳳開(kāi)花株；b.企劍白墨開(kāi)花株；c.小鳳開(kāi)花株；d.小香墨蘭開(kāi)花株； θ.大鳳花朵；f.企劍白墨花朵；g.小鳳花朵；h.小香墨蘭花朵。
【具體實(shí)施方式】
[0022]下面結(jié)合說(shuō)明書(shū)附圖和具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的闡述，但具體實(shí)施例并不對(duì)本發(fā)明做任何的限定。以下實(shí)施例中所述的品種、培養(yǎng)基、試劑等均為本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通過(guò)購(gòu)買(mǎi)可以得到。
[0023]實(shí)施例1:新品種‘小鳳蘭’的選育
2006年開(kāi)始我們用本發(fā)明所述的方法進(jìn)行新品種‘小鳳蘭’的選育，具體方法如下:
S1.配置雜交組合:本次新品種的選育目標(biāo)為株型好，葉形秀美；花出架、花大、花色亮麗、有香氣；溫室栽培能在春節(jié)期間開(kāi)花，花期長(zhǎng)；易工廠化繁殖；抗性強(qiáng)、適應(yīng)性好。根據(jù)此目標(biāo)，2006年2月18日以‘大鳳’ Cymbidium Maureen Carter ‘DaFeng’為母本、‘企劍白墨’ Cymbidium sinense ‘QiJianBaiMo’為父本配制雜交組合，同年7月28日收獲果實(shí)。
[0024]S2.單種子快繁:
S21.果實(shí)消毒、接種和初代培養(yǎng):將雜交后6個(gè)月左右的果實(shí)用自來(lái)水洗凈，然后在超凈工作臺(tái)上用75%乙醇消毒10分鐘，無(wú)菌水沖洗3次，取其內(nèi)部種子接種到MS+0.5~Img/1 6-BA+0.1 ~0.2 mg/1 NAA+5 ~20% 挪子汁 +0.2 ~lg/L 活性碳 +30g/L 糖 +8g/L 瓊脂的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得中間繁殖體。培養(yǎng)條件為溫度26°C左右，暗培養(yǎng)或散射光培養(yǎng)。
[0025]S22.中間繁殖體的增殖:將種子萌發(fā)后形成的中間繁殖體分開(kāi)，將單個(gè)中間繁殖體或?qū)⑵淝谐芍睆?~3 mm小塊，分別接種于MS+1~2 mg/1 6-BA+0.2~0.5mg/lNAA+10%椰子汁+0.3~0.5g/L活性碳+30g/L糖+8g/L瓊脂的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)。培養(yǎng)條件為溫度26°C左右，每日光照8小時(shí)，光照強(qiáng)度1000 Iux0當(dāng)中間繁殖體繁殖到100塊以上時(shí)進(jìn)行芽分化。
[0026]S23.中間繁殖體芽分化:將中間繁殖體分開(kāi)，接種到MS+1~2 mg/1 6-BA+0.2~
0.5mg/l NAA+10%椰子汁+30g/L糖+8g/L瓊脂的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)。培養(yǎng)條件為溫度26°C左右，每日光照10小時(shí)，光照強(qiáng)度1000 Iux0
[0027]S24.生根壯苗:選取2 cm左右的芽，接種于1/2 MS+0.2~I mg/1 NAA +20g/L糖+8g/L瓊脂的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)。培養(yǎng)條件為溫度26°C左右，每日光照10小時(shí),光照強(qiáng)度2000 Iux0
[0028]S5.試管苗移栽 當(dāng)小苗長(zhǎng)至5~8 cm并具有2條以上根時(shí)即可進(jìn)行煉苗。煉苗時(shí)，將培養(yǎng)瓶蓋子旋松，放在溫室中10~20 d或在室外無(wú)直射光的地方放置3~5 d后,取出試管苗移栽。
[0029]根據(jù)以上方法，在2007年I~12月采用單種子快繁生產(chǎn)株系160個(gè)，每個(gè)株系20~60株，總計(jì)約7000株，株系先種植于廣州花卉研究中心花都基地，后種植于廣州花卉研究中心從化基地。
[0030]S3.決選新品系:將獲得的160個(gè)株系進(jìn)行種植，同時(shí)進(jìn)行株系栽培和品種比較試驗(yàn)。
[0031]株系栽培按以下方法進(jìn)行:
S3.組培苗煉苗:株高5厘米，左右、葉片3~5片、根數(shù)2~4條時(shí)，組培苗達(dá)到出瓶移栽標(biāo)準(zhǔn)。此時(shí)將組培瓶移入溫室，適當(dāng)遮陰，將光照控制在4000~10000 lux。
[0032]S32.組培苗上盆初期管理:將試管苗取出，流水沖洗干凈，用1000倍百菌清浸泡5分鐘，晾干后對(duì)試管苗進(jìn)行分級(jí)種植，I月后第一次施肥，促使新根長(zhǎng)出。光照度7000~10000 lux，溫度 22 ~30°C，濕度 50 ~70%。
[0033]S33.中苗管理:當(dāng)小苗生長(zhǎng)8~9個(gè)月，株高10厘米時(shí)，可換入9厘米盆栽種。所用肥料種類(lèi)同小苗，濃度可適當(dāng)加大。光照度15000 lux，溫度25~30°C，濕度50~70%。
[0034]S34.大苗管理:中苗生長(zhǎng)I年，株高為20厘米左右，長(zhǎng)出新芽，根系健壯時(shí)可以換種15厘米盆。此時(shí)應(yīng)適當(dāng)增加氮肥，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)。光照度15000~20000 lux，溫度25 ~30°C，濕度 50 ~70%。
[0035]S35.花芽分化和抽梗期:從7月份開(kāi)始，減少氮肥，增施磷鉀肥，并適當(dāng)控制水分，增加光照，以促進(jìn)花芽分化，花芽集中在9、10月份形成，當(dāng)花葶長(zhǎng)達(dá)20厘米以上時(shí)，及時(shí)插桿牽引。[0036]S36.栽培中要注意莖基腐病、炭疽病、紅蜘蛛、介殼蟲(chóng)等的防治。平時(shí)采取“預(yù)防為主，防治結(jié)合”的方針，每月噴施I~2次殺菌劑和殺蟲(chóng)劑，并注意更換用藥的品種，避免產(chǎn)生抗藥性。一旦發(fā)現(xiàn)有病苗,及時(shí)剪除病葉,并帶出棚外。
[0037]品種比較試驗(yàn)在待選的160個(gè)蘭花新株系、母本‘大鳳’、父本‘企劍白墨’和對(duì)照品種‘小香墨蘭’之間進(jìn)行，比較結(jié)果見(jiàn)圖3。
[0038]經(jīng)過(guò)苗期和開(kāi)花期觀察，結(jié)果表明，06-bs-110 -72新品系株型挺立，生長(zhǎng)勢(shì)旺盛，花大，雙枝花比例較高、出架，花型美觀，花色鮮艷，香氣宜人，溫室栽培能在春節(jié)期間開(kāi)花，適應(yīng)性廣、易工廠化繁殖、符合育種目標(biāo)，轉(zhuǎn)移到華南農(nóng)業(yè)大學(xué)寧西基地種植。
[0039]S4.多年多點(diǎn)試驗(yàn):參試品種為新選育出的06-bs-110_72號(hào)株系和對(duì)照品種‘小香墨蘭’。試驗(yàn)地點(diǎn)分別為華南農(nóng)業(yè)大學(xué)校內(nèi)實(shí)驗(yàn)基地和寧西實(shí)驗(yàn)基地。其中，校內(nèi)基地夏季具備水簾風(fēng)機(jī)降溫，溫度控制在30°C以內(nèi)，冬季有加溫，溫度控制在10°C以上，全年濕度控制在50~78% ;寧西基地夏季具備水簾風(fēng)機(jī)降溫，溫度控制在31°C以內(nèi)，冬季無(wú)加溫，夏天濕度控制在50~85%，冬天濕度為60~100%。試驗(yàn)期限為2個(gè)周期，第I周期為2011年4月至2012年3月，第二周期為2012年4月至2013年3月。試驗(yàn)時(shí)采用盆栽方式，基質(zhì)栽培，基質(zhì)為泥炭、樹(shù)皮混合基質(zhì)，將2年生苗種植于150 X 140 mm塑料杯，測(cè)試品種和對(duì)照品種相鄰栽培，種30株以上，測(cè)量時(shí)，至少測(cè)30株，10株為一次重復(fù)，重復(fù)三次。
[0040]上述多年多點(diǎn)試驗(yàn)結(jié)果表明，06-bs_110 -72新品系的質(zhì)量性狀穩(wěn)定一致，數(shù)量性狀有差異，但有規(guī)律。表明‘小鳳蘭’具有一致性和穩(wěn)定性，符合育種目標(biāo)，定名為‘小鳳蘭’。
[0041]S5.申請(qǐng)品種審定:2013年3 月2日，廣東省種子管理總站組織專(zhuān)家對(duì)‘小鳳蘭’進(jìn)行了品種現(xiàn)場(chǎng)鑒定，專(zhuān)家組同意并通過(guò)了現(xiàn)場(chǎng)鑒定。由于‘小鳳蘭’選育過(guò)程中，多次更換了種植基地，影響了植株的生長(zhǎng)，從而導(dǎo)致選育時(shí)間有所延長(zhǎng)，該品種總的選育時(shí)間為7年。
【權(quán)利要求】
1.一種快速選育蘭花新品種的方法，其特征在于，包括以下步驟: 51.配置雜交組合:根據(jù)育種目標(biāo)，選擇雜交親本，配置雜交組合，在適宜的條件下栽培母本植株，獲得果實(shí)； 52.單種子快繁:對(duì)果實(shí)進(jìn)行消毒，取其種子進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)獲得中間繁殖體，將單粒種子形成的中間繁殖體切成直徑2~3 _小塊進(jìn)行增殖培養(yǎng)，當(dāng)獲得100塊以上的中間繁殖體時(shí)即可進(jìn)行芽分化培養(yǎng)獲得試管苗，試管苗移栽后即可形成大量不同的株系； 53.決選新品系:將獲得的株系種植后進(jìn)行株系栽培和品種比較試驗(yàn)，觀察其苗期和開(kāi)花期的表現(xiàn)，根據(jù)育種的目標(biāo)從眾多的株系中選擇新品系； 54.多年多點(diǎn)試驗(yàn):對(duì)獲選的新品系進(jìn)行多年多點(diǎn)試驗(yàn)，觀察新品系的綜合表現(xiàn)和主要觀賞性狀穩(wěn)定性； 55.申請(qǐng)品種審定。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述快速選育蘭花新品種的方法，其特征在于，所述步驟S2包括以下步驟: 521.果實(shí)消毒、接種和初代培養(yǎng):將雜交后5~11個(gè)月的果實(shí)洗凈，然后用75%乙醇消毒8~15分鐘，無(wú)菌水沖洗3次，取其內(nèi)部種子接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得中間繁殖體；培養(yǎng)條件為溫度25~28°C，暗培養(yǎng)或散射光培養(yǎng)； 522.中間繁殖體的增殖:將種子萌發(fā)后形成的中間繁殖體分開(kāi)，將單個(gè)中間繁殖體或?qū)⑵淝谐芍睆?~3 mm小塊，分別接種于固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為溫度25~28°C，每日光照8~12小時(shí)，光照強(qiáng)度800~1500 Iux ;當(dāng)中間繁殖體繁殖到100塊以上時(shí)進(jìn)行芽分化培養(yǎng)； 523.中間繁殖體芽分化:將中間繁殖體分開(kāi)，接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)； 培養(yǎng)條件為溫度25~28°C，每日光照10~14小時(shí)，光照強(qiáng)度1000~2000 Iux ； 524.生根壯苗:選取2cm左右的芽，接種于固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)； 培養(yǎng)條件為溫度25~28°C，每日光照10~14小時(shí)，光照強(qiáng)度1500~3000 Iux ； 525.試管苗移栽:當(dāng)小苗長(zhǎng)至5~8cm并具有2條以上根時(shí)進(jìn)行煉苗；煉苗時(shí)，將培養(yǎng)瓶蓋子旋松，放在溫室中10~20 d或在室外無(wú)直射光的地方放置3~5 d后,取出試管苗移栽。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的快速選育蘭花新品種的方法，其特征在于，步驟S21中所述的固體培養(yǎng)基配方為MS培養(yǎng)基+0.5~I mg/1 6-BA+0.1~0.2mg/l NAA+5~20% (w/w)椰子汁+0.2~lg/L活性碳+30g/L糖+8g/L瓊脂。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述快速選育蘭花新品種的方法，其特征在于，S22所述固體培養(yǎng)基配方為 MS 培養(yǎng)基 +1 ~2mg/l 6-BA+0.2 ~0.5mg/l NAA+10% (w/w)椰子汁 +30g/L 糖 +8g/L瓊脂。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述快速選育蘭花新品種的方法，其特征在于，S23所述固體培養(yǎng)基配方為1/2 MS培養(yǎng)基+0.2~I mg/1 NAA +20g/L糖+8g/L瓊脂。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述快速選育蘭花新品種的方法，其特征在于，S3所述株系栽培包括如下步驟: S31.組培苗煉苗:當(dāng)組培苗為株高4~8cm、葉片3~5片、根數(shù)2~4條時(shí)，將組培瓶移入溫室，適當(dāng)遮陰，將光照控制在4000~10000 Iux ；S32.組培苗上盆初期管理:將試管苗取出，流水沖洗干凈，用1000倍百菌清浸泡5~10 min，晾干后對(duì)試管苗進(jìn)行分級(jí)種植，I月后第一次施肥，促使新根長(zhǎng)出；光照度7000~10000 lux，溫度 22 ~30°C，濕度 50 ~70% ； S33.中苗管理:當(dāng)小苗株高8~12厘米時(shí)，可換入9或12厘米盆栽種，所用肥料種類(lèi)同小苗，濃度適當(dāng)加大；光照度15000 lux，溫度25~30°C，濕度50~70% ； S34.大苗管理:中苗株高為18-22厘米左右，長(zhǎng)出新芽，根系健壯時(shí)可以換種12或15厘米盆，此時(shí)適當(dāng)增加氮肥，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)；光照度15000~20000 lux，溫度25~30°C，濕度50~70% ； S35.花芽分化和抽梗期:減少氮肥，增施磷鉀肥，并適當(dāng)控制水分，增加光照，以促進(jìn)花芽分化，當(dāng)花葶長(zhǎng)達(dá)20厘米以上時(shí)，插桿牽引。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述快速選育蘭花新品種的方法，其特征在于，步驟S3中所述品種比較試驗(yàn)為將待選的蘭花新品系與其父本、母本和性狀相近的對(duì)照品種進(jìn)行品種比較試驗(yàn)，對(duì)不同品種在株型、葉片、花序、花朵、開(kāi)花期、組培快繁特性和抗性方面進(jìn)行差異性比較，明確新品系具有的 性狀 特 點(diǎn)。
【文檔編號(hào)】A01G1/00GK103749279SQ201310692103
【公開(kāi)日】2014年4月30日 申請(qǐng)日期:2013年12月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月11日
【發(fā)明者】張志勝, 周玉亮, 曾瑞珍, 郭和蓉, 謝利 申請(qǐng)人:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)