一種花吊絲竹組培繁育中的繼代、生根方法
【專利摘要】一種花吊絲竹組培繁育中的繼代、生根方法，包括繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)步驟，其特征在于：在繼代培養(yǎng)步驟的多周期繼代擴(kuò)繁時(shí)為生根培養(yǎng)步驟選苗，當(dāng)一個(gè)周期繼代培養(yǎng)中培養(yǎng)至5-7天、將基部萌發(fā)出2-4cm長(zhǎng)新芽的植株轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)步驟；生根培養(yǎng)步驟為將植株接入生根培養(yǎng)基：1/4MS大量+IBA0.2-0.4mg·L-1+根太陽(yáng)25-35ppm先進(jìn)行暗培養(yǎng)5-7天，再進(jìn)行光照培養(yǎng)20天；各培養(yǎng)階段培養(yǎng)溫度均控制在25-28℃，暗培養(yǎng)為完全黑暗培養(yǎng)，光照培養(yǎng)為光照10小時(shí)/天、光照強(qiáng)度1600-2200lx。優(yōu)點(diǎn)在于：簡(jiǎn)化生根程序，節(jié)約生產(chǎn)成本；提高花吊絲竹瓶?jī)?nèi)生根的生根率，由原80％提高至90％。
【專利說明】—種花吊絲竹組培繁育中的繼代、生根方法
【技術(shù)領(lǐng)域】:
[0001]本發(fā)明涉及花吊絲竹組培的方法，具體涉及花吊絲竹組培繁育中繼代、生根的方法。
【背景技術(shù)】:
[0002]花吊絲竹為叢生竹，牡竹屬吊絲竹變種，桿節(jié)間淺黃色，竹桿用途與吊絲竹相同。其桿淺黃色而間有5-8條深綠色條紋，甚為美麗，可作庭園觀賞竹種。其產(chǎn)筍量高，適應(yīng)性強(qiáng)，可為筍用竹產(chǎn)業(yè)和園林綠化。在常規(guī)的繁育方法是母竹分株或者利用竹桿、竹枝扦插，成本高、效率低下、種苗運(yùn)輸不便，且優(yōu)良種源稀缺，給林竹產(chǎn)業(yè)帶來(lái)了很大的阻礙。利用組織培養(yǎng)，選取優(yōu)良材料進(jìn)行擴(kuò)繁，不僅彌補(bǔ)了常規(guī)繁育方法的諸多不足，而且將母本的優(yōu)良遺傳性狀保持并擴(kuò)大其繁育數(shù)量。目前國(guó)內(nèi)對(duì)于叢生竹種組織培養(yǎng)的研究主要集中在叢生竹的組培快繁技術(shù)研究(張光楚，2004)、花吊絲竹組培快繁育種技術(shù)研究(張瑋，2010)等，解決花吊絲竹組培現(xiàn)有研究技術(shù)中普遍存在難生根的問題，為建立花吊絲竹高效穩(wěn)定的組培快繁體系。
[0003]1、花吊絲竹外植體的消毒:
[0004]花吊絲在7-10月份選取當(dāng)年新抽梢的主枝莖段作為組培材料，將剪好的枝條修剪干凈，先去除葉片，蘸95%酒精的棉球擦拭枝條2遍，無(wú)菌水浸泡枝條底部l_3cm，放入冰箱10°C冷藏。次日在超凈工作臺(tái)上用75%酒精消毒Imin后，2%。升汞分3次消毒30min、25min、5min，無(wú)菌水沖洗5次。
[0005]2、花吊絲竹的誘導(dǎo):
[0006]將莖段接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基:3/4MS+6-BA4.0mg.'+Θ-ΚΙ.0mg.1+椰乳(Cff) IOOmL.1+ 白糖 20g.1+ 卡拉膠 5.5g/L.PH5.8。45-60 天叢芽。
[0007]3、花吊絲竹的繼代培養(yǎng):
[0008]形成叢芽后，接種于繼代培養(yǎng)基:3/4MS+6-BA2.0mg.L_1+K0.5mg.L_1+VC0.5mg.1+椰乳150mL.L-1+白糖20g.L-1.PH5.8。20-25天周轉(zhuǎn)一次進(jìn)行多周期繼代擴(kuò)繁。
[0009]4、花吊絲竹的生根培養(yǎng):
[0010]將預(yù)備生根的瓶苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基①:1/3MS+IBA4.0mg.1+ΝΑΑ4.5mg +ΚΟ.15mg.?Λ5-7 天后全部轉(zhuǎn)回繼代培養(yǎng)基(3/4MS+6-BA2.0mg K0.5mg VC0.5mg.171+椰乳150mL.L-1+白糖20g.L-1.PH5.8)，待5-7天后將萌發(fā)2_4cm的新芽再次轉(zhuǎn)生根培養(yǎng)基②:1/5MS+IBA8.0mg.L_1+NAA4.5mg.L_1+K0.1mg.L' 采用二次生根法，平均生根率可達(dá) 80%。
[0011]以上誘導(dǎo)、繼代、生根各培養(yǎng)階段均為培養(yǎng)溫度控制25-28°C，光照10小時(shí)/天，光照強(qiáng)度約1600-22001x。
[0012]5、花吊絲竹的移栽:`[0013]待生根苗出根至5_7cm時(shí)，煉苗15_20天進(jìn)行移栽，移栽前一天要擰松瓶蓋，洗去根部粘黏的培養(yǎng)基。移栽時(shí)要叢狀移栽，移栽前用2%。高錳酸鉀溶液消毒，移栽后用2.5%o多菌靈定根，并且在移栽成活后也要定期噴2.5%。多菌靈，以控制病害發(fā)生。移栽基質(zhì)用:3/4河沙+1/4泥炭土。生根苗移栽7-10天后就可恢復(fù)生長(zhǎng)，25-35天抽新葉。成活率可達(dá)90%以上。60天后可移至圃地。
[0014]現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn):1、花吊絲組培采用二次生根的方法程序過于繁雜，運(yùn)用于生產(chǎn)成本過高；2、花吊絲組培采用二次生根的生根率過低，只達(dá)到80%。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0015]本發(fā)明的目的在于克服上述缺點(diǎn)，提供一種花吊絲竹組培繁育中的繼代、生根方法。
[0016]本發(fā)明的方案是:包括繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)步驟，其特征在于:在繼代培養(yǎng)步驟的多周期繼代擴(kuò)繁時(shí)為生根培養(yǎng)步驟選苗，當(dāng)一個(gè)周期繼代培養(yǎng)中培養(yǎng)至5-7天、將基部萌發(fā)出2-4cm長(zhǎng)新芽的植株轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)步驟；生根培養(yǎng)步驟為將植株接入生根培養(yǎng)基:1/4MS大量+ΙΒΑ0.2-0.4mg.L—1+根太陽(yáng)25_35ppm先進(jìn)行暗培養(yǎng)5_7天，再進(jìn)行光照培養(yǎng)20天；所述各培養(yǎng)階段培養(yǎng)溫度均控制在25-28°C，暗培養(yǎng)為完全黑暗培養(yǎng)，光照培養(yǎng)為光照10小時(shí)/天、光照強(qiáng)度1600-22001x。
[0017]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:1.簡(jiǎn)化生根程序，節(jié)約生產(chǎn)成本；2.提高花吊絲竹瓶?jī)?nèi)生根的生根率，由原來(lái)的80%提高至90%。
【具體實(shí)施方式】:
[0018]本發(fā)明的方法是:包括繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)步驟，其特征在于:在繼代培養(yǎng)步驟的多周期繼代擴(kuò)繁時(shí)為生根培養(yǎng)步驟選苗，當(dāng)一個(gè)周期繼代培養(yǎng)中培養(yǎng)至5-7天、將基部萌發(fā)出2-4cm長(zhǎng)新芽的植株轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基:1/4MS大量+ΙΒΑ0.2-0.4mg.L—1+根太陽(yáng)25-35ppm,接入生根培養(yǎng)基后進(jìn)行暗培養(yǎng)5_7天，再進(jìn)行光照培養(yǎng)，20天后平均生根率可達(dá)90%以上。便可進(jìn)入移栽步驟。
[0019]實(shí)施例1:
[0020]將準(zhǔn)備生根的瓶苗預(yù)先轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)至5-7天、選擇萌發(fā)出2-4cm長(zhǎng)新芽的植株轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基:1/4MS大量+IBA0.4mg.L—1+根太陽(yáng)35ppm。接入生根培養(yǎng)基直接進(jìn)行光照培養(yǎng)。20天后統(tǒng)計(jì)平均生根率為79%。
[0021]實(shí)施例2:
[0022]將準(zhǔn)備生根的瓶苗預(yù)先轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)至5-7天、選擇萌發(fā)出2-4cm長(zhǎng)新芽的植株轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基:1/4MS大量+IBA0.4mg.L—1+根太陽(yáng)35ppm。接入生根培養(yǎng)基后進(jìn)行暗培養(yǎng)5-7天，再進(jìn)行光照培養(yǎng)。20天后統(tǒng)計(jì)平均生根率為92.7%。
[0023]實(shí)施例3:
[0024]將準(zhǔn)備生根的瓶苗預(yù)先轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)至5-7天、選擇萌發(fā)出2-4cm長(zhǎng)新芽的植株轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基:1/4MS大量+IBA0.25mg.L—1+根太陽(yáng)25ppm。切割生根植株時(shí)，一個(gè)主枝帶1-2個(gè)新芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，接入生根培養(yǎng)基后進(jìn)行暗培養(yǎng)5-7天，再進(jìn)行光照培養(yǎng)。20天后統(tǒng)計(jì)平均生根率為90.3%。
[0025]各培養(yǎng)階段均為培養(yǎng)溫度控制25-28°C，光照10小時(shí)/天，光照強(qiáng)度約16001x ;暗
培養(yǎng)為完全黑暗培養(yǎng)。[0026]本發(fā)明旨在花吊絲竹組培組培技術(shù)中存在難生根的問題，制約了其建立穩(wěn)定高效的組培快繁體系，因此本發(fā)明方法在花吊絲組培繁育中生根培養(yǎng)階段前采用了先繼代培養(yǎng)5-7天時(shí)間后，再轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基，使得植株在同時(shí)萌發(fā)出新芽后再同時(shí)出根，達(dá)到了苗木生長(zhǎng)、生根整齊的要求。首次添加了根太陽(yáng)的使用，利于生根率的提高。插入暗培養(yǎng)分步驟有利于暗培養(yǎng)條件下細(xì)胞快速完成脫分化，促使根的分化形成，所以暗培養(yǎng)利于生根率的提聞并利于生根時(shí)間的提iu。[0027]本發(fā)明英文名詞說明:
[0028]MS:組培中用到的一種基本培養(yǎng)基(包含大量元素、微量元素、鐵鹽和有機(jī)成分)
[0029]VC:抗壞血酸，一種水溶性維生素
[0030]6-BA:6_芐氨基嘌呤，一種植物細(xì)胞分裂素
[0031]NAA:萘乙酸，一種植物細(xì)胞生長(zhǎng)素
[0032]IBA:吲哚-3- 丁酸，一種植物生根劑
[0033]KT:6_糖基氨基嘌呤，一種植物細(xì)胞分裂素
[0034]根太陽(yáng):一種新型的分子信號(hào)誘導(dǎo)型植物生根劑
[0035]CW:椰乳，椰子汁
[0036]Lx:勒克斯，光照強(qiáng)度單位。
【權(quán)利要求】
1.一種花吊絲竹組培繁育中的繼代、生根方法，包括繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)步驟，其特征在于:在繼代培養(yǎng)步驟的多周期繼代擴(kuò)繁時(shí)為生根培養(yǎng)步驟選苗，當(dāng)一個(gè)周期繼代培養(yǎng)中培養(yǎng)至5-7天、將基部萌發(fā)出2-4cm長(zhǎng)新芽的植株轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)步驟；生根培養(yǎng)步驟為將植株接入生根培養(yǎng)基:1/4MS大量+IBA0.2-0.4mg.L—1+根太陽(yáng)25_35ppm先進(jìn)行暗培養(yǎng)5_7天，再進(jìn)行光照培養(yǎng)20天；所述各培養(yǎng)階段培養(yǎng)溫度均控制在25-28°C，暗培養(yǎng)為完全黑暗培養(yǎng)，光照培養(yǎng)為光照10小 時(shí)/天、光照強(qiáng)度1600-22001X。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103493739SQ201310495293
【公開日】2014年1月8日 申請(qǐng)日期:2013年10月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月11日
【發(fā)明者】黃樹燕 申請(qǐng)人:福建省永安林業(yè)(集團(tuán))股份有限公司種苗中心