專利名稱：一種馬鈴薯莖尖脫毒方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供了一種解決馬鈴薯莖尖脫毒及脫毒過程中，莖尖愈傷化導(dǎo)致基因變異和脫毒周期長的方法。該技術(shù)屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
馬鈴薯在種植過程中感染病毒而引起退化直接影響了馬鈴薯的品質(zhì)及產(chǎn)量，嚴(yán)重阻礙了馬鈴薯的生產(chǎn)和利用。應(yīng)用馬鈴薯脫毒技術(shù)，是解決馬鈴薯種薯退化的主要技術(shù)措施。因此，脫毒種薯越來越受到廣大馬鈴薯栽培者的歡迎。我國在馬鈴薯莖尖組織培養(yǎng)方面也取得了很多研究成果川，并在各地建成脫毒種薯繁育體系。馬鈴薯莖尖組織培養(yǎng)脫毒苗是馬鈴薯脫毒種薯產(chǎn)業(yè)的基礎(chǔ)，優(yōu)質(zhì)快速地莖尖培養(yǎng)為以后脫毒苗和脫毒薯的生產(chǎn)贏得了時(shí)間和效益。通過組織培養(yǎng)途徑，從而建立無病毒生產(chǎn)體系是目前非常有效的獲得無病毒植株的途徑。當(dāng)前脫毒馬鈴薯莖尖培養(yǎng)效率低，成苗率和脫毒率達(dá)不到預(yù)期目的，因此優(yōu)化馬鈴薯莖尖脫毒培養(yǎng)方法非常必要。馬鈴薯莖尖脫毒標(biāo)準(zhǔn)程序如下:塊莖、植株或芽條(或者帶病毒試管苗)；結(jié)合熱處理(36°C，16小時(shí)光照；8小時(shí)黑暗，30°C);表面清洗之后，常規(guī)消毒處理；解剖鏡下剝離分生組織約0.1 0.3mm、帶I 2個(gè)初生葉原基；在無菌條件下操作；接入已滅菌的分生組織培養(yǎng)基培養(yǎng)(4-5個(gè)月);待分生組織分化后，轉(zhuǎn)入生長培養(yǎng)基成苗(15-20天);具5 7葉的莖尖分化苗擴(kuò)繁(15-20天轉(zhuǎn)接一次);各株系莖尖分化苗的病毒及類病毒檢測(cè)；無病原菌的試管苗留作基礎(chǔ)種苗；至少一個(gè)生長季節(jié)；經(jīng)遺傳穩(wěn)定性鑒定后工廠化快繁用。該技術(shù)是目前馬鈴薯莖尖脫毒的一般程序，但存在不少缺點(diǎn):1、脫毒周期長、環(huán)節(jié)多，要經(jīng)過熱處理使病毒鈍化，莖尖剝離以后進(jìn)行愈傷及成苗培養(yǎng)，獲得脫毒苗以后還需要進(jìn)行穩(wěn)定性鑒定。2、對(duì)技術(shù)和設(shè)備要求高，需要解剖鏡，莖尖剝離的操作很細(xì)致，莖尖不能過大或過小，過大脫毒率低，過小不易成活，一般要求0.1-0.3mm,帶1_2個(gè)葉原基最宜。3、脫毒苗可能發(fā)生變異，莖尖剝離后的愈傷培養(yǎng)會(huì)在培養(yǎng)基內(nèi)加一些激素，分生組織受這些激素影響可能會(huì)產(chǎn)生遺傳變異，并且馬鈴薯莖尖細(xì)胞小，有可能遺傳物質(zhì)不完全。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足提供一種馬鈴薯莖尖脫毒方法。本發(fā)明的技術(shù)方案如下:一種馬鈴薯莖尖脫毒方法，包括以下步驟:Al、將需要脫毒的原原種進(jìn)行田間播種；A2、植株生長期常規(guī)管理；

A3、在現(xiàn)蕾或開花期從馬鈴薯地里篩選健康的植株，做好標(biāo)記，較其他植株提前半個(gè)月收獲，每株篩選個(gè)大，薯型標(biāo)準(zhǔn)和健康的種薯單獨(dú)收獲和貯存；A4、種薯發(fā)芽后，剪取幼芽進(jìn)行病毒檢測(cè)；A5、將檢測(cè)健康的種薯，重新催芽后剪取大芽經(jīng)酒精和升汞殺菌處理后，放于常規(guī)MS固體培養(yǎng)基上做成莖段苗；A6、將長高的莖段苗，剪取上部三分之一高度保種，剩余三分之二進(jìn)行病毒檢測(cè)；A7、病毒檢測(cè)合格后，按照常規(guī)方法進(jìn)行快繁。通過本技術(shù)可以在相對(duì)短的周期內(nèi)獲得馬鈴薯脫毒試管苗，得到的脫毒試管苗健康，遺傳基因穩(wěn)定。因?yàn)椴牧蠟槊摱驹N，經(jīng)過田間正向選擇，脫毒率高，提高了脫毒效率。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合具 體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。本發(fā)明的馬鈴薯莖尖脫毒方法包括以下步驟: 1、將需要脫毒的原原種進(jìn)行田間播種。2、植株生長期常規(guī)管理。3、在現(xiàn)蕾或開花期從馬鈴薯地里篩選健康的植株，做好標(biāo)記，較其他植株提前半個(gè)月收獲，每株篩選個(gè)大，薯型標(biāo)準(zhǔn)和健康的種薯單獨(dú)收獲和貯存。4、種薯發(fā)芽后，剪取幼芽進(jìn)行病毒檢測(cè)。5、將檢測(cè)健康的種薯，重新催芽后剪取大芽經(jīng)酒精和升汞殺菌處理后，放于常規(guī)MS固體培養(yǎng)基上做成莖段苗。6、將長高的莖段苗，剪取上部三分之一高度保種，剩余三分之二進(jìn)行病毒檢測(cè)。7、病毒檢測(cè)合格后，按照常規(guī)方法進(jìn)行快繁。表I
權(quán)利要求
1.一種馬鈴薯莖尖脫毒方法，其特征在于，包括以下步驟: Al、將需要脫毒的原原種進(jìn)行田間播種； A2、植株生長期常規(guī)管理； A3、在現(xiàn)蕾或開花期從馬鈴薯地里篩選健康的植株，做好標(biāo)記，較其他植株提前半個(gè)月收獲，每株篩選個(gè)大，薯型標(biāo)準(zhǔn)和健康的種薯單獨(dú)收獲和貯存； A4、種薯發(fā)芽后，剪取幼芽進(jìn)行病毒檢測(cè)； A5、將檢測(cè)健康的種薯，重新催芽后剪取大芽經(jīng)酒精和升汞殺菌處理后，放于常規(guī)MS固體培養(yǎng)基上做成莖段苗； A6、將長高的莖段苗，剪取上部三分之一高度保種，剩余三分之二進(jìn)行病毒檢測(cè)； A7、病毒檢測(cè)合格后，按照 常規(guī)方法進(jìn)行快繁。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種馬鈴薯莖尖脫毒方法，包括以下步驟A1、將需要脫毒的原原種進(jìn)行田間播種；A2、植株生長期常規(guī)管理；A3、在現(xiàn)蕾或開花期從馬鈴薯地里篩選健康的植株，做好標(biāo)記，較其他植株提前半個(gè)月收獲，每株篩選個(gè)大，薯型標(biāo)準(zhǔn)和健康的種薯單獨(dú)收獲和貯存；A4、種薯發(fā)芽后，剪取幼芽進(jìn)行病毒檢測(cè)；A5、將檢測(cè)健康的種薯，重新催芽后剪取大芽經(jīng)酒精和升汞殺菌處理后，放于常規(guī)MS固體培養(yǎng)基上做成莖段苗；A6、將長高的莖段苗，剪取上部三分之一高度保種，剩余三分之二進(jìn)行病毒檢測(cè)；A7、病毒檢測(cè)合格后，按照常規(guī)方法進(jìn)行快繁。通過本發(fā)明可以在相對(duì)短的周期內(nèi)獲得馬鈴薯脫毒試管苗，得到的脫毒試管苗健康，遺傳基因穩(wěn)定。
文檔編號(hào)A01C1/00GK103190264SQ201310102258
公開日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2013年3月27日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月27日
發(fā)明者謝開云, 何衛(wèi), 王克秀, 胡建軍, 王余明, 盧學(xué)蘭, 唐銘霞, 賈巍巍, 馬松明, 劉可心, 劉一盛 申請(qǐng)人:四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所, 何衛(wèi)