專利名稱：蘄山藥試管零余子快速繁殖方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種蘄山藥試管零余子的快速繁殖方法，旨在通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)實(shí)現(xiàn)蘄山藥零余子的規(guī)?；a(chǎn)。屬于生物工程和農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
醫(yī)圣李時(shí)珍故里湖北省蘄春縣山藥種植歷史悠久，蘄山藥(DioscoreaeOppositae “Qi ”)是以蘄春縣為原產(chǎn)地的鄂東地區(qū)大面積種植的山藥優(yōu)良地方種，為《本草綱目》所推崇。僅在蘄春縣蘄山藥的常年種植面積就超過2000hm2，年產(chǎn)山藥逾7 X 104t，已經(jīng)成為當(dāng)?shù)卣攸c(diǎn)扶持的農(nóng)業(yè)特色支柱產(chǎn)業(yè)，2012年申報(bào)了中國地理標(biāo)志產(chǎn)品保護(hù)。目前，蘄山藥主要采用無性繁殖方式進(jìn)行繁育，所用的營養(yǎng)器官有栽子、塊莖和零余子。各種營養(yǎng)器官繁育蘄山藥的優(yōu)勢(shì)和缺點(diǎn)都十分明顯，例如，用栽子繁育可以直接栽種，出苗整齊,長勢(shì)旺，山藥產(chǎn)量高、賣相好,但工作量大、成本高,不適合大面積生產(chǎn),且連續(xù)栽種3 4年后，頂芽退化嚴(yán)重，產(chǎn)量大幅下降；用塊莖切段繁育連續(xù)栽種不易退化，有利于種性的保持，但用種量大，塊莖分割費(fèi)工費(fèi)時(shí)，成本高，且出芽時(shí)間長，早春遇上陰雨天然氣，爛種、死苗時(shí)有發(fā)生，影響產(chǎn)量和品質(zhì)；用零余子繁育能夠大量節(jié)省種薯，省時(shí)省工，但生產(chǎn)周期較長，且連續(xù)多年播種零余子后種質(zhì)出現(xiàn)嚴(yán)重退化。因此，尋找一種合理的繁育方式一直是蘄山藥生產(chǎn)上的一道難題。2010年以來，申請(qǐng)人采用組織培養(yǎng)技術(shù)繁育蘄山藥，在較短時(shí)間內(nèi)獲得了大量的蘄山藥種苗，并申請(qǐng)了國家發(fā)明專利“蘄山藥組培育苗方法”(專利申請(qǐng)?zhí)?201110451511.1)。雖然采用組織培養(yǎng)技術(shù)繁育蘄山藥種苗，不僅可以獲得優(yōu)良性狀的單株，而且可以改善品質(zhì)，保持蘄山藥種的純度，但由于受技術(shù)條件的限制和傳統(tǒng)用種習(xí)慣的影響，目前無法在農(nóng)戶中大面積推廣。生產(chǎn)實(shí)踐中，農(nóng)戶通常 采用塊莖和零余子交替繁育，以維持蘄山藥的種性不被退化。零余子是山藥的葉腋處長出的珠芽(俗稱為氣生塊莖)，大田條件下一般在山藥收獲期采摘零余子。由于零余子的形成影響地下塊莖的產(chǎn)量，為了提高產(chǎn)量和保證山藥的品質(zhì)，農(nóng)戶習(xí)慣于用“疏芽”的方式去掉零余子，使得零余子的數(shù)量和品質(zhì)都不能滿足生產(chǎn)上的需要，以致影響塊莖與零余子交替繁育的保種效果。由于在現(xiàn)有技術(shù)中還沒有解決蘄山藥零余子的人工誘導(dǎo)條件和試管零余子的生產(chǎn)等問題，因此，借助植物組織培養(yǎng)技術(shù)規(guī)模化生產(chǎn)蘄山藥零余子，對(duì)于解決蘄山藥生產(chǎn)上零余子的實(shí)際需求具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是建立一種蘄山藥試管零余子的快速繁殖方法，實(shí)現(xiàn)人工規(guī)?；a(chǎn)蘄山藥零余子，縮短生產(chǎn)周期，降低生產(chǎn)成本，提高生產(chǎn)效率。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案為:—種蘄山藥試管零余子的繁殖方法，以通過莖尖組織培養(yǎng)獲得的蘄山藥脫毒試管苗為外植體，以改良的MS培養(yǎng)基為培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中NH4NO3含量為MS培養(yǎng)基的1/4 3/4，同時(shí)添加BA (細(xì)胞分裂素)1.0mg/L、NAA(是萘乙酸，為生長素的一種)0.5mg/L、蔗糖80.0g/L、瓊脂4.5g/L、活性炭0.5g/L，調(diào)節(jié)pH為5.8 6.0，置于半固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)；在光照時(shí)數(shù)12h/d、光照強(qiáng)度25001UX、培養(yǎng)溫度25±2°C，培養(yǎng)蘄山藥試管零余子按照所述的蘄山藥試管零余子的繁殖方法，用帶3 4片葉且去掉頂芽的蘄山藥無根脫毒試管苗為外植體，直接接種于試管零余子誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)周期為10w，試管零余子誘導(dǎo)率達(dá)93%以上，零余子發(fā)生個(gè)數(shù)達(dá)3.69個(gè)/株，每年生產(chǎn)4 5次。從上述操作步驟可以看出，與傳統(tǒng)的大田生產(chǎn)零余子方法相比，本發(fā)明蘄山藥試管零余子繁殖方法的優(yōu)勢(shì)主要表現(xiàn)在:由于采用蘄山藥脫毒試管苗繁殖零余子，不僅可以選擇優(yōu)良性狀的單株，而且可以改善品質(zhì)，保持種的純度，因此，可以克服大田生產(chǎn)零余子存在的不足；同時(shí)，本發(fā)明將生產(chǎn)周期從大田生產(chǎn)的I年，縮短為10W，每年可生產(chǎn)4 5次。采用本發(fā)明的方法可進(jìn)行蘄山藥試管零余子工廠化生產(chǎn)，單位面積培養(yǎng)室可年產(chǎn)零余子11 15萬個(gè)(見表1)，可節(jié)省大量人工和土地，成本較低，生產(chǎn)效率較高。表I 2012年蘄山藥試管零余子生產(chǎn)效率統(tǒng)計(jì)
權(quán)利要求
1.一種蘄山藥試管零余子的繁殖方法，其特征在于:以通過莖尖組織培養(yǎng)獲得的蘄山藥脫毒試管苗為外植體，以改良的MS培養(yǎng)基為培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中NH4NO3含量為MS培養(yǎng)基的1/4 3/4,同時(shí)添加植物生長物質(zhì)BAl.0mg/L、NAA0.5mg/L、鹿糖80.0g/L、瓊脂4.5g/L、活性炭0.5g/L，調(diào)節(jié)pH為5.8 6.0，置于半固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)；在光照時(shí)數(shù)12h/d，光照強(qiáng)度25001UX，培養(yǎng)溫度25±2°C條件下誘導(dǎo)、培養(yǎng)蘄山藥試管零余子。
2.按照權(quán)利要求1所述的蘄山藥試管零余子的繁殖方法，其特征在于:用帶3 4片葉且去掉頂芽的蘄山藥無根脫毒試管苗為外植體，直接接種于試管零余子誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)周期為10w，試管零余子誘導(dǎo)率達(dá)93%以上，零余子發(fā)生個(gè)數(shù)達(dá)3.69個(gè)/株，每年生產(chǎn)4 5次。
全文摘要
一種蘄山藥試管零余子快速繁殖方法，以通過莖尖組織培養(yǎng)獲得的蘄山藥脫毒試管苗為外植體，以改良的MS為培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中NH4NO3質(zhì)量含量為MS培養(yǎng)基的1/4～3/4，同時(shí)添加BA、NAA、蔗糖、瓊脂和活性炭，調(diào)節(jié)pH，置于半固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)；在光照時(shí)數(shù)12h/d，光照強(qiáng)度2500lux，培養(yǎng)溫度25±2℃下誘導(dǎo)、培養(yǎng)蘄山藥試管零余子。用帶3～4片葉且去掉頂芽的蘄山藥無根脫毒試管苗為外植體，直接接種于試管零余子誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)周期10w，試管零余子誘導(dǎo)率93%以上，零余子發(fā)生個(gè)數(shù)達(dá)3.69個(gè)/株，每年生產(chǎn)4～5次，可工廠化生產(chǎn)。本方法能改善品質(zhì)、保持種的純度，克服大田生產(chǎn)零余子存在的不足。
文檔編號(hào)A01H4/00GK103190342SQ20131003103
公開日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2013年1月28日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月28日
發(fā)明者康薇, 鄭進(jìn) 申請(qǐng)人:湖北理工學(xué)院