專利名稱：一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種，即利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法。
背景技術(shù)：
在現(xiàn)有技術(shù)中，長(zhǎng)白山杜胃$花屬植物包括牛皮杜胃$ {Rhododendron chrysanthumPall.)、短果杜醇{Rhododendron brachycarpum D. Don)、照白杜醇{Rhododendronmicranthum Turcz.)、小葉杜匿$ {Rhododendron parvifolium Adams.)、大字杜匿${Rhododendron schlippenbachii Maxim.)、興安杜匿$ {Rhododendron dauricum L.)、迎紅杜匿$ {Rhododendron mucronulaturn Turcz.)、毛租杜匿$ {Rhododendron confertissimumNakai)和荀葉杜醇{Rhododendron redowskianum Maxim.)等共有9個(gè)種,均為吉林省重點(diǎn)保護(hù)植物，其中牛皮杜鵑和苞葉杜鵑為我國(guó)國(guó)家三級(jí)保護(hù)的珍貴稀有植物，短果杜鵑為長(zhǎng) 白山區(qū)珍貴稀有植物，牛皮杜鵑、毛氈杜鵑、照白杜鵑和小葉杜鵑是常綠灌木，短果杜鵑為常綠小喬木，興安杜鵑為半常綠灌木。牛皮杜鵑、苞葉杜鵑和毛氈杜鵑分布海拔達(dá)2500米高，屬高山杜鵑。牛皮杜鵑、大字杜鵑、照白杜鵑、小葉杜鵑、迎紅杜鵑和興安杜鵑全株揮發(fā)油含量較高，為精油和藥用植物。這9種杜鵑均可通過(guò)人工引種馴化為園林綠化植物。以上9種杜鵑對(duì)水土保持和維持生態(tài)平衡起重要作用，是杜鵑花育種的種質(zhì)資源。但其在我國(guó)分布甚狹，僅在長(zhǎng)白山有較大種群分布，其它地區(qū)僅為零星分布，由于人們亂采亂挖，野生資源遭到極大威脅。這9種杜鵑花種子細(xì)小，萌發(fā)率低，萌發(fā)后形成的小苗成活率極低；扦插繁殖需要大量的野生杜鵑枝條，對(duì)野生資源破壞極大，且生根率和移栽成活率極低，開發(fā)和利用受到極大限制。目前，9種杜鵑花的離體繁殖報(bào)道較多，通過(guò)愈傷組織再分化芽苗、腋芽叢生和直接再生等途徑具有增殖系數(shù)高等優(yōu)點(diǎn)，但仍存在外植體誘導(dǎo)愈傷組織再分化、腋芽叢生和直接再生周期較長(zhǎng)，獲得不定芽再進(jìn)一步生根速度較慢、步驟復(fù)雜、成本高、可操作性差，長(zhǎng)期連續(xù)增殖極易發(fā)生退化和變異等缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)上述不足而提供一種方法可行、步驟簡(jiǎn)捷、成本低和繁殖速度快的利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法。本發(fā)明的技術(shù)解決方案是一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其步驟如下
(1)10月下旬采集牛皮杜鵑枝條，將枝條進(jìn)行低溫休眠，溫度控制在-10 -5°C,60d后取出并將頂芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)；待側(cè)芽萌發(fā)長(zhǎng)至2. 50 cm時(shí)，將鮮嫩的側(cè)芽剪下，去除嫩葉及葉柄，用體積分?jǐn)?shù)的75%乙醇涮洗60 S，移至飽和次氯酸鈉溶液中浸泡8 min，無(wú)菌水沖洗10次，無(wú)菌濾紙吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸鈉毒傷的組織后切割成I葉I段作為外植體備用；
(2)牛皮杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基為培養(yǎng)基+KT O. 13 O. 14mg · Γ1 + IBA 0. 05 O. 08 mg · Γ1 + NAA O. 02 O. 05 mg · Γ1 + GA3 2. 70 I. 90mg·!/1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g噸―1，調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 hM'光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23±2 1條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；12. 4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。—種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其步驟如下
(1)10月下旬采集短果杜鵑枝條，將枝條進(jìn)行低溫休眠，溫度控制在-10 -5 °C,60d后取出并將頂芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)；待側(cè)芽萌發(fā)長(zhǎng)至2. 50 cm時(shí)，將鮮嫩的側(cè)芽剪下，去除嫩葉及葉柄，用體積分?jǐn)?shù)的75%乙醇涮洗60 S，移至飽和次氯酸鈉溶液中浸泡8 min，無(wú)菌水沖洗10次，無(wú)菌濾紙吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸鈉毒傷的組織后切割成I葉I段作為外植體備用；
(2)短果杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+KT O. 09 O. 12mg · Γ1 + IBA O. 03 O. 07 mg · Γ1 + NAA O. 04 O. 06 mg · Γ1 + GA3 2. 80 3. 00mg·!/1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g · Λ調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 hM'光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23±2 1條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；12. 4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其步驟如下
(1)10月下旬采集照白杜鵑枝條，將枝條進(jìn)行低溫休眠，溫度控制在-10 -5 °C,60d后取出并將頂芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)；待側(cè)芽萌發(fā)長(zhǎng)至2. 50 cm時(shí)，將鮮嫩的側(cè)芽剪下，去除嫩葉及葉柄，用體積分?jǐn)?shù)的75%乙醇涮洗60 S，移至飽和次氯酸鈉溶液中浸泡8 min，無(wú)菌水沖洗10次，無(wú)菌濾紙吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸鈉毒傷的組織后切割成I葉I段作為外植體備用；
(2)照白杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+KT O. 17 O. 25mg · I/1 + IAA O. 20 O. 25 mg · Γ1 + NAA O. 02 O. 05 mg · Γ1 + GA3 2. 30 2. 60mg·!/1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g · Λ調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 hM'光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23±2 1條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；12. 4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其步驟如下(1)10月下旬采集小葉杜鵑枝條，將枝條進(jìn)行低溫休眠，溫度控制在-10 -5 °C,60d后取出并將頂芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)；待側(cè)芽萌發(fā)長(zhǎng)至2. 50 cm時(shí)，將鮮嫩的側(cè)芽剪下，去除嫩葉及葉柄，用體積分?jǐn)?shù)的75%乙醇涮洗60 S，移至飽和次氯酸鈉溶液中浸泡8 min，無(wú)菌水沖洗10次，無(wú)菌濾紙吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸鈉毒傷的組織后切割成I葉I段作為外植體備用；
(2)小葉杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+KT O. 08 O. 12mg · Γ1 + IBA O. 15 O. 20 mg · Γ1 + NAA O. 03 O. 05 mg · Γ1 + GA3 2. 00 2. 30mg·!/1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g噸―1，調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 hM'光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23±2 1條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；12. 4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。
一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其步驟如下
(1)10月下旬采集大字杜鵑枝條，將枝條進(jìn)行低溫休眠，溫度控制在-10 -5 °C,60d后取出并將頂芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)；待側(cè)芽萌發(fā)長(zhǎng)至2. 50 cm時(shí)，將鮮嫩的側(cè)芽剪下，去除嫩葉及葉柄，用體積分?jǐn)?shù)的75%乙醇涮洗60 S，移至飽和次氯酸鈉溶液中浸泡8 min，無(wú)菌水沖洗10次，無(wú)菌濾紙吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸鈉毒傷的組織后切割成I葉I段作為外植體備用；
(2)大字杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+KT O. 07 O. 10mg · Γ1 + IAA O. 20 O. 25 mg · Γ1 + NAA O. 01 O. 03 mg · Γ1 + GA3 2. 20 2. 50mg·!/1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g · Λ調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 hM'光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23±2 1條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；12. 4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其步驟如下
(1)10月下旬采集興安杜鵑枝條，將枝條進(jìn)行低溫休眠，溫度控制在-10 -5 °C,60d后取出并將頂芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)；待側(cè)芽萌發(fā)長(zhǎng)至2. 50 cm時(shí)，將鮮嫩的側(cè)芽剪下，去除嫩葉及葉柄，用體積分?jǐn)?shù)的75%乙醇涮洗60 S，移至飽和次氯酸鈉溶液中浸泡8 min，無(wú)菌水沖洗10次，無(wú)菌濾紙吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸鈉毒傷的組織后切割成I葉I段作為外植體備用；
(2)興安杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+KT O. 04 O. 07mg · I/1 + NAA O. 02 O. 04 mg · Γ1 + GA3 I. 00 I. 50 mg · Γ1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉
7.8g· L_\添加蔗糖10. O g · L—1，調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 h · cf1、光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23 + 2 °C條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · Γ1 (NH4)2SO4,375 mg · IZ1NH4NO3,180 mg · IZ1KNO3, 320 mg · IZ1CaCl2 · 2H20，245 mg · IZ1MgSO4 · 7H20,436 mg · IZ1KH2PO4 ；18. 4 mg · IZ1FeSO4 · 7H20, 24. 9 mg · IZ1Na2 · EDTA · 2H20 ；12. 4mg · IZ1MnSO4 · 4H20，7. 2 mg · IZ1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3, 0. 32 mg · IZ1KI，0. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25
mg · L-1甘氨酸。一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其步驟如下
(1)10月下旬采集迎紅杜鵑枝條，將枝條進(jìn)行低溫休眠，溫度控制在-10 -5 °C,60d后取出并將頂芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)；待側(cè)芽萌發(fā)長(zhǎng)至2. 50 cm時(shí)，將鮮嫩的側(cè)芽剪下，去除嫩葉及葉柄，用體積分?jǐn)?shù)的75%乙醇涮洗60 S，移至飽和次氯酸鈉溶液中浸泡8 min，無(wú)菌水沖洗10次，無(wú)菌濾紙吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸鈉毒傷的組織后切割成I葉I段作為外植體備用；
(2)迎紅杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+KT O. 03 0.06 mg · I/1 + NAA O. 03 O. 07 mg · Γ1 + GA3 O. 09 I. 30 mg · Γ1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉
7.8g· L_\添加蔗糖10. O g · L—1，調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 h · cf1、光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23 + 2 °C條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · Γ1 (NH4)2SO4,375 mg · IZ1NH4NO3,180 mg · IZ1KNO3, 320 mg · IZ1CaCl2 · 2H20，245 mg · IZ1MgSO4 · 7H20,436 mg · IZ1KH2PO4 ；18. 4 mg · IZ1FeSO4 · 7H20, 24. 9 mg · IZ1Na2 · EDTA · 2H20 ；12. 4mg · IZ1MnSO4 · 4H20，7. 2 mg · IZ1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3, 0. 32 mg · IZ1KI，0. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其步驟如下
(1)10月下旬采集毛氈杜鵑枝條，將枝條進(jìn)行低溫休眠，溫度控制在-10 -5 °C,60d后取出并將頂芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)；待側(cè)芽萌發(fā)長(zhǎng)至2. 50 cm時(shí)，將鮮嫩的側(cè)芽剪下，去除嫩葉及葉柄，用體積分?jǐn)?shù)的75%乙醇涮洗60 S，移至飽和次氯酸鈉溶液中浸泡8 min，無(wú)菌水沖洗10次，無(wú)菌濾紙吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸鈉毒傷的組織后切割成I葉I段作為外植體備用；
(2)毛氈杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+KT O. 08 O. 12mg · I/1 + IAA O. 12 O. 15 mg · Γ1 + NAA O. 05 O. 07 mg · Γ1 + GA3 I. 80 2. 00mg·!/1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g · Λ調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 hM'光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23±2 1條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；12. 4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其步驟如下
(I)10月下旬采集苞葉杜鵑枝條，將枝條進(jìn)行低溫休眠，溫度控制在-10 -5 °C,60d后取出并將頂芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)；待側(cè)芽萌發(fā)長(zhǎng)至2. 50 cm時(shí)，將鮮嫩的側(cè)芽剪下，去除嫩葉及葉柄，用體積分?jǐn)?shù)的75%乙醇涮洗60 S，移至飽和次氯酸鈉溶液中浸泡8 min，無(wú)菌水沖洗10次，無(wú)菌濾紙吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸鈉毒傷的組織后切割成I葉I段作為外植體備用；
(2)苞葉杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+ KT O. 17 O. 20mg · I/1 + IAA O. 14 O. 18 mg · Γ1 + GA3 I. 30 I. 80 mg · Γ1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7.8 g· L_\添加蔗糖10. O g · L—1，調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 h · cf1、光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23 + 2 °C條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · Γ1 (NH4)2SO4,375 mg · IZ1NH4NO3,180 mg · IZ1KNO3, 320 mg · IZ1CaCl2 · 2H20，245 mg · IZ1MgSO4 · 7H20,436 mg · IZ1KH2PO4 ；18. 4 mg · IZ1FeSO4 · 7H20, 24. 9 mg · IZ1Na2 · EDTA · 2H20 ；12. 4mg · IZ1MnSO4 · 4H20，7. 2 mg · IZ1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3, 0. 32 mg · IZ1KI，0. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是1、而相對(duì)于愈傷組織再分化芽苗、腋芽叢生和直接再生等途徑，嫩莖生根和腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)同步進(jìn)行的繁殖方式不僅成苗速度快、繁殖系數(shù)高，而且遺傳穩(wěn)定、步驟簡(jiǎn)捷、成本低、可操作性強(qiáng)，可大大提高種苗生產(chǎn)效率，屬一步成苗，可直接應(yīng)用于杜鵑花工廠化育苗。2、經(jīng)統(tǒng)計(jì)計(jì)算，9種杜鵑花小植株成活率可達(dá)到90. 3% 98. 5%。下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
具體實(shí)施例方式利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其步驟如下
以牛皮杜鵑一步成苗開展的實(shí)驗(yàn)為例
I材料與方法 1.1材料及處理
10月下旬，于長(zhǎng)白山國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)采牛皮杜鵑枝條，并將枝條用塑料袋包好后放入冰柜內(nèi)低溫休眠，溫度控制在-10 -5 °C, 60 d后取出并將頂芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)。待側(cè)芽萌發(fā)長(zhǎng)至2. 50 cm時(shí)，將鮮嫩的側(cè)芽剪下，去除嫩葉及葉柄，用75%乙醇(體積分?jǐn)?shù))涮洗60 S，移至飽和次氯酸鈉溶液中浸泡8 min，無(wú)菌水沖洗10次，無(wú)菌濾紙吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸鈉毒傷的組織后切割成I葉I段作為外植體備用。1.2牛皮杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)、高頻植株再生和煉苗
培養(yǎng)基成分和含量87 mg · Γ1 (NH4) 2S04, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245 mg · L-1MgSO4 · 7H20，436 mg · L-1KH2PO4 ；18. 4 mg · L-1FeSO4 · 7H20,24. 9 mg · IZ1Na2 · EDTA · 2H20 ；12. 4 mg · IZ1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · IZ1ZnSO4 · 7H20, 5. 7mg · L-1H3BO3,0. 32 mg · L-1KI，0. 05 mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · L-1 鹽酸硫胺素(VB1)，0. 25mg七1煙酸，75 mg七1肌醇，0.25 mg噸―1甘氨酸。培養(yǎng)基中附加激動(dòng)素KT (O. 03 O. 010mg *L :)、卩引噪丁酸 IBA(O. 10 O. 45 mg *L :)、蔡乙酸 NAA(O. 06 O. 13 mg .L O 和赤霉素GA3 (I. 40 2. 60 mg · L-1)，瓊脂粉 7. 8 g · L—1，添加蔗糖 10.0 g · L—1，調(diào)節(jié) pH 值至 5. 6，牛皮杜鵑嫩莖段在光照周期9 h · Cf1、光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度(23±2) °C條件下培養(yǎng)。為提高牛皮杜鵑嫩莖段生根的速度及生根率和腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)速度及長(zhǎng)度，通過(guò)均勻設(shè)計(jì)法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，選用U13 (134)均勻表，每個(gè)處理接種10個(gè)嫩莖段，重復(fù)3次，篩選牛皮杜鵑莖段生根和腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的激動(dòng)素、吲哚丁酸、萘乙酸和赤霉素最佳濃度配比。莖段培養(yǎng)35 d統(tǒng)計(jì)生根率和腋芽萌發(fā)后生長(zhǎng)長(zhǎng)度。生根率=(生根的莖段數(shù)/接種的莖段總數(shù))X 100%，莖段腋芽長(zhǎng)度為I個(gè)培養(yǎng)周期過(guò)程中，莖段腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)后的長(zhǎng)度(不包括原莖段長(zhǎng)度)。待莖段生根和腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)至3. 50 cm，腋芽發(fā)出6 8個(gè)葉時(shí)，在超凈工作臺(tái)上打開培養(yǎng)瓶，將腋芽留I葉剪下苗干，再將苗干切割成I葉I段后，再次將小莖段轉(zhuǎn)接到莖段生根和腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，計(jì)算出每瓶中每個(gè)莖段生根和腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的平均增殖倍數(shù)和周期。當(dāng)牛皮杜鵑試管苗增殖到需要的數(shù)量且小植株長(zhǎng)至2. 00 2. 50 cm時(shí)，將小植株從培養(yǎng)瓶中取出，放在殺毒礬溶液(濃度為2 mg · L—1)中洗凈根上的瓊脂，將小植株栽植到經(jīng)多菌靈(150倍液)消毒過(guò)的草炭土、腐爛松針和河砂(2: 3: I)的混合基質(zhì)中，覆蓋透光性能好的無(wú)滴塑料薄膜進(jìn)行保濕保溫，控制溫度為(18±2) °C，保持相對(duì)濕度在70% 75%之間，13 h · Cf1的自然光照，濕度過(guò)高或中午溫度升高時(shí)，將薄膜打開小口進(jìn)行換氣通風(fēng)，濕度降低時(shí)，可在早上噴灑適量清水。 2結(jié)果與分析
2.I KT、IBA、NAA和GA3濃度交叉配比對(duì)牛皮杜鵑莖段生根的影響數(shù)據(jù)(表I)經(jīng)均勻設(shè)計(jì)軟件分析處理后可得回歸方程為7=81. 8 + 22U, - 17. 5為一IllX3，顯著性水平a = O. 05，復(fù)相關(guān)系數(shù)TP= O. 9536，剩余標(biāo)準(zhǔn)差S= 2. 0600，檢驗(yàn)值&=30. 12 >臨界值/Vo5J9) = 3. 863，回歸方程具有顯著性，激動(dòng)素、吲哚丁酸和萘乙酸對(duì)莖段的生根影響具有顯著性，赤霉素對(duì)莖段的生根影響不顯著。通過(guò)計(jì)算激動(dòng)素、吲哚丁酸和萘乙酸對(duì)生根的貢獻(xiàn)值和貢獻(xiàn)率可知，U1 = 256，UJU = 66. 4% 'U2 = 29. 5，UjU = 7. 66% ；U, = 48. 7，UJU= 12. 6%，但從貢獻(xiàn)率數(shù)值來(lái)看，激動(dòng)素遠(yuǎn)大于吲哚丁酸和萘乙酸對(duì)莖段生根的影響，吲哚丁酸和萘乙酸差距不大，說(shuō)明吲哚丁酸和萘乙酸均在牛皮杜鵑莖段生根起不可缺少的重要作用。因激動(dòng)素與生根率呈正相關(guān)，而吲哚丁酸和萘乙酸與生根率呈負(fù)相關(guān)。猜測(cè)質(zhì)量濃度高于O. 10 mg · L-1的激動(dòng)素，吲哚丁酸和萘乙酸質(zhì)量濃度分別低于O. 10mg-T1和O. 06 mg -T1時(shí)，生根率可能更高。為驗(yàn)證此猜測(cè)的可能性，又以激動(dòng)素為O. 10、O. 11,0. 12,0. 13,0. 14 和 O. 15 mg · Λ 吲哚丁酸質(zhì)量濃度為 O. 10,0. 09,0. 08,0. 07,0. 06、O. 05,0. 04,0. 03,0. 02,0. 01 和 O. 00 mg · Γ1，萘乙酸質(zhì)量濃度為 O. 06,0. 05,0. 04,0. 03、O. 02,0. 01和O. 00 mg · L—1開展11個(gè)水平的驗(yàn)證試驗(yàn)，重復(fù)3次。具體操作按I. I和I. 2方法，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，激動(dòng)素質(zhì)量濃度為(O. 12 O. 14 mg · L—1)、吲哚丁酸質(zhì)量濃度為(O. 03
O.08 mg · Γ1)和萘乙酸質(zhì)量濃度為(O. 02 O. 05 mg · Γ1)時(shí)，牛皮杜鵑嫩莖段生根率最高，平均生根率達(dá)99. 9%。均高于表I所列13個(gè)處理的生根率。
表I牛皮杜鵑嫩莖段生根和腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)激素篩選的U13 (134)試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果Tablel U13(134)test design and result of hormone for rooting and axillarybud growing of stems of Rhododendron chrysan thum
權(quán)利要求
1.一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其特征在于步驟如下 (1)以牛皮杜鵑枝條水培側(cè)芽嫩莖段作為外植體備用； (2)牛皮杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基為培養(yǎng)基+KT O. 13 O. 14mg · Γ1 + IBA O. 05 O. 08 mg · Γ1 + NAA O. 02 O. 05 mg · Γ1 + GA3 2. 70 2. 90mg·!/1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g噸―1，調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 hM'光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23±2 1條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；12. 4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。
2.一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其特征在于步驟如下 (O以短果杜鵑枝條水培側(cè)芽嫩莖段作為外植體備用； (2)短果杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+ KT O. 09 O. 12mg · Γ1 + IBA O. 03 O. 07 mg · Γ1 + NAA O. 04 O. 06 mg · Γ1 + GA3 2. 80 3. 00mg·!/1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g · Λ調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 hM'光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23±2 1條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；12. 4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。
3.一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其特征在于步驟如下 (O以照白杜鵑枝條水培側(cè)芽嫩莖段作為外植體備用； (2)照白杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+ KT O. 17 O. 25mg · I/1 + IAA O. 20 O. 25 mg · Γ1 + NAA O. 02 O. 05 mg · Γ1 + GA3 2. 30 2. 60mg·!/1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g · Λ調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 hM'光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23±2 1條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；12. 4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。
4.一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其特征在于步驟如下 (1)以小葉杜鵑枝條水培側(cè)芽嫩莖段作為外植體備用； (2)小葉杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+KT O. 08 O. 12mg · Γ1 + IBA O. 15 O. 20 mg · Γ1 + NAA O. 03 O. 05 mg · Γ1 + GA3 2. 00 2. 30mg·!/1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g · Λ調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 hM'光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23±2 1條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量:87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；,12. 4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。
5.一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其特征在于步驟如下 (O以大字杜鵑枝條水培側(cè)芽嫩莖段作為外植體備用； (2)大字杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+ KT O. 07 O. 10mg · Γ1 + IAA O. 20 O. 25 mg · Γ1 + NAA O. 01 O. 03 mg · Γ1 + GA3 2. 20 2. 50mg·!/1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g · Λ調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 hM'光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23±2 1條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；12. 4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。
6.一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其特征在于步驟如下 (O以興安杜鵑枝條水培側(cè)芽嫩莖段作為外植體備用； (2)興安杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+ KT O. 04 O. 07mg · I/1 + NAA O. 02 O. 04 mg · Γ1 + GA3 I. 00 I. 50 mg · Γ1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7.8g· L_\添加蔗糖10. O g · L—1，調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 h · cf1、光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23 + 2 °C條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · Γ1 (NH4)2SO4,375 mg · IZ1NH4NO3,180 mg · IZ1KNO3, 320 mg · IZ1CaCl2 · 2H20，245 mg · IZ1MgSO4 · 7H20,436 mg · IZ1KH2PO4 ；18. 4 mg · IZ1FeSO4 · 7H20, 24. 9 mg · IZ1Na2 · EDTA · 2H20 ；12. 4mg · IZ1MnSO4 · 4H20，7. 2 mg · IZ1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3, 0. 32 mg · IZ1KI，0. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。
7.一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其特征在于步驟如下 (1)以迎紅杜鵑枝條水培側(cè)芽嫩莖段作為外植體備用； (2)迎紅杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+KT O. 03 0.06mg · I/1 + NAA O. 03 O. 07 mg · Γ1 + GA3 O. 09 I. 30 mg · Γ1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7.8g· L_\添加蔗糖10. O g · L—1，調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 h · cf1、光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23 + 2 °C條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · Γ1 (NH4)2SO4,375 mg · IZ1NH4NO3,180 mg · IZ1KNO3, 320 mg · IZ1CaCl2 · 2H20，245 mg · IZ1MgSO4 · 7H20,436 mg · IZ1KH2PO4 ；18. 4 mg · IZ1FeSO4 · 7H20, 24. 9 mg · IZ1Na2 · EDTA · 2H20 ；12. 4mg · IZ1MnSO4 · 4H20，7. 2 mg · IZ1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3, 0. 32 mg · IZ1KI，0. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。
8.一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其特征在于步驟如下(1)以毛氈杜鵑枝條水培側(cè)芽嫩莖段作為外植體備用； (2)毛氈杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+KT O. 08 O. 12mg · I/1 + IAA O. 12 O. 15 mg · Γ1 + NAA O. 05 O. 07 mg · Γ1 + GA3 I. 80 2. 00mg·!/1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g噸―1，調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 hM'光照強(qiáng)度1000 Ix和溫度23±2 1條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；·12.4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。
9.一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法，其特征在于步驟如下 (1)以苞葉杜鵑枝條水培側(cè)芽嫩莖段作為外植體備用； (2)苞葉杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基+KT O. 17 O. 20mg · I/1 + IAA O. 14 O. 18 mg · Γ1 + GA3 I. 30 I. 80 mg · Γ1 ;培養(yǎng)基中附加瓊脂粉·7.8g· L_\添加蔗糖10. O g · L—1，調(diào)節(jié)pH值至5. 6，嫩莖段在光照周期9 h · cf1、光照強(qiáng)度·1000 Ix和溫度23 + 2 °C條件下培養(yǎng)莖段35 d ;培養(yǎng)基成分和含量87 mg · Γ1 (NH4)2SO4,·375 mg · IZ1NH4NO3,180 mg · IZ1KNO3, 320 mg · IZ1CaCl2 · 2H20，245 mg · IZ1MgSO4 · 7H20,·436 mg · IZ1KH2PO4 ；18. 4 mg · IZ1FeSO4 · 7H20, 24. 9 mg · IZ1Na2 · EDTA · 2H20 ；12. 4mg · IZ1MnSO4 · 4H20，7. 2 mg · IZ1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3, 0. 32 mg · IZ1KI，0. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 鹽酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 煙酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種植物繁殖，即一種利用長(zhǎng)白山杜鵑花屬植物莖段試管內(nèi)高效成苗方法。以牛皮杜鵑為例，其步驟如下(1)10月下旬采集牛皮杜鵑枝條，將枝條進(jìn)行低溫休眠，水培促其側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)，處理后切割成1葉1段作為外植體備用；牛皮杜鵑莖段生根同時(shí)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)的培養(yǎng)基為培養(yǎng)基＋KT 0.13～0.14mg·L-1＋I(xiàn)BA0.05～0.08mg·L-1＋NAA 0.02～0.05mg·L-1＋GA3 2.70～2.90mg·L-1；具有步驟簡(jiǎn)捷、成本低、可操作性強(qiáng)，提高種苗生產(chǎn)效率，可直接應(yīng)用于杜鵑花工廠化育苗。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102960250SQ20121050294
公開日2013年3月13日 申請(qǐng)日期2012年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月30日
發(fā)明者顧地周, 楊麗娟, 朱俊義, 姜云天, 馮穎, 郭志欣, 陸爽, 潘雨, 禚玲玲, 張學(xué)士 申請(qǐng)人:通化師范學(xué)院