專利名稱：四倍體白花除蟲菊種子的培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物育種工程技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種四倍體白花除蟲菊種子的培育方法。
背景技術(shù)：
普通的白花除蟲菊為二倍體，其染色體數(shù)量為18條，二倍體的白花除蟲菊中除蟲菊素有效成分含量低，加工效益不高；四倍體的白花除蟲菊染色體數(shù)量為36條，加工利用的除蟲菊素有效成分含量較高，種植加工能夠獲得更好的經(jīng)濟(jì)效益。目前，植物多倍體獲取的方法主要是通過(guò)外植體誘導(dǎo)，外植體誘導(dǎo)四倍體的白花除蟲菊試驗(yàn)要求嚴(yán)苛，投入資金和工作量大，成功率不高
發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中利用外植體誘導(dǎo)獲得四倍體的白花除蟲菊，存在試驗(yàn)要求嚴(yán)苛，投入工作量大、成本高，成功率低的問(wèn)題，本發(fā)明提供一種四倍體白花除蟲菊種子的培育方法，其技術(shù)方案包括以下步驟
四倍體白花除蟲菊種子的培育方法，其特征在于包括以下步驟
(a)準(zhǔn)備育苗基質(zhì)將泥炭和珍珠巖按照體積比31混合均勻，再裝放到高壓滅菌鍋中進(jìn)行高溫高壓滅菌，控制高溫高壓滅菌的條件為壓力O. 15MP、溫度121°C，育苗基質(zhì)在此壓力和溫度條件下滅菌O. 5-2小時(shí)，滅菌結(jié)束以后得到育苗基質(zhì)；
(b)準(zhǔn)備種子挑選普通白花除蟲菊優(yōu)良品種的種子，挑選的種子要求飽滿無(wú)蟲眼；
(c)準(zhǔn)備試劑準(zhǔn)備好秋水仙素，用無(wú)菌水將秋水仙素配制成濃度為600-1000mg/L的溶液，然后將配制好的秋水仙素溶液裝放到燒杯中；
Cd)種子處理將挑選好的白花除蟲菊的種子放入裝有上述秋水仙素溶液的燒杯中浸泡，將浸泡有白花除蟲菊種子的燒杯放置在18-25°C的溫室中，在此溫度條件下浸泡24-48小時(shí)；
浸泡結(jié)束后，把白花除蟲菊的種子從秋水仙素溶液中取出來(lái)，然后用無(wú)菌水沖洗上述用秋水仙素溶液浸泡過(guò)的白花除蟲菊的種子,沖洗次數(shù)為5-8遍；
(e)播種準(zhǔn)備好發(fā)芽盒，將(a)步驟中準(zhǔn)備好的育苗基質(zhì)裝填到發(fā)芽盒中，育苗基質(zhì)在發(fā)芽盒中裝填的厚度為2. 5-5cm，將沖洗好的白花除蟲菊的種子播種在發(fā)芽盒中的基質(zhì)上，在播種有白花除蟲菊種子的基質(zhì)上噴灑少量的無(wú)菌水，保持基質(zhì)濕潤(rùn)；
(f)培養(yǎng)將播種有白花除蟲菊種子的發(fā)芽盒放置到智能光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，調(diào)節(jié)控制智能光照培養(yǎng)箱的溫度為20土1°C、光照強(qiáng)度為1500-2000Lex、光照時(shí)間為10_16hr/d，在此條件下培養(yǎng)20-25天，白花除蟲菊的種子萌芽以后逐漸長(zhǎng)高，得到高度為3-5cm的小苗；
(g)培養(yǎng)壯苗準(zhǔn)備好穴盤，在穴盤中裝入(a)步驟中準(zhǔn)備好的育苗基質(zhì)，將上述培養(yǎng)得到的高度為3-5cm的小苗從發(fā)芽盒中取出來(lái)，然后移栽到穴盤中的基質(zhì)上，澆上定根水保持基質(zhì)濕潤(rùn)，將移栽有小苗的穴盤放置到溫棚中進(jìn)行穴盤培養(yǎng)壯苗，調(diào)節(jié)控制溫棚內(nèi)穴盤培養(yǎng)的溫度為晝溫20-25°C，夜溫16-18°C，自然光照8-10hr/d，在此溫光條件下穴盤培養(yǎng)45-50天得到壯苗；
(h)制作根尖染色體壓片將得到的每一株壯苗進(jìn)行編號(hào)，然后貼上標(biāo)簽，用剪刀剪取壯苗的根尖并編號(hào)，根尖的編號(hào)與所屬壯苗的編號(hào)相對(duì)應(yīng)，剪取的根尖長(zhǎng)度為0. 8-1. Ocm,將剪取得到的根尖制作成根尖染色體壓片；
(i)篩選獲得四倍體植株將制作得到的根尖染色體壓片放到顯微鏡下觀察其染色體的數(shù)量，篩選出染色體數(shù)量為36條的壓片，根據(jù)篩出的壓片根尖編號(hào)挑選出對(duì)應(yīng)的壯苗，該壯苗為四倍體植株，其染色體數(shù)量為36條；
(j)栽培和良種擴(kuò)繁將挑選出來(lái)的四倍體壯苗進(jìn)行隔離種植，按照常規(guī)方法栽培管理8-9個(gè)月后，收獲得到四倍體白花除蟲菊的種子，將得到的種子進(jìn)行制種栽培，以后擴(kuò)繁得到大量的四倍體白花除蟲菊種子。 本發(fā)明操作簡(jiǎn)便容易，成本低、效率高，能大量處理白花除蟲菊的種子，培育時(shí)間短，節(jié)省育種時(shí)間，是一種較快速、較簡(jiǎn)便地獲取大量四倍體白花除蟲菊植株的方法，用得到的四倍體植株生產(chǎn)出來(lái)的種子栽培出來(lái)的除蟲菊花朵含量高，能產(chǎn)生更好的經(jīng)濟(jì)效益。
具體實(shí)施例實(shí)施例I
一種四倍體白花除蟲菊種子的培育方法，其技術(shù)方案包括以下步驟
(a)準(zhǔn)備育苗基質(zhì)將泥炭和珍珠巖按照體積比31混合均勻，再裝放到高壓滅菌鍋中進(jìn)行高溫高壓滅菌，控制高溫高壓滅菌的條件為壓力0. 15MP、溫度121°C，育苗基質(zhì)在此壓力和溫度條件下滅菌0. 5小時(shí)，滅菌結(jié)束以后得到育苗基質(zhì)；
(b)準(zhǔn)備種子挑選普通白花除蟲菊優(yōu)良品種的種子，挑選的種子要求飽滿無(wú)蟲眼；
(c)準(zhǔn)備試劑準(zhǔn)備好秋水仙素，用無(wú)菌水將秋水仙素配制成濃度為600mg/L的溶液，然后將配制好的秋水仙素溶液裝放到燒杯中；
Cd)種子處理將挑選好的白花除蟲菊的種子放入裝有上述秋水仙素溶液的燒杯中浸泡，將浸泡有白花除蟲菊種子的燒杯放置在18°C的溫室中，在此溫度條件下浸泡48小時(shí)；浸泡結(jié)束后，把白花除蟲菊的種子從秋水仙素溶液中取出來(lái)，然后用無(wú)菌水沖洗上述用秋水仙素溶液浸泡過(guò)的白花除蟲菊的種子，沖洗次數(shù)為5遍；
(e)播種準(zhǔn)備好發(fā)芽盒，將(a)步驟中準(zhǔn)備好的育苗基質(zhì)裝填到發(fā)芽盒中，育苗基質(zhì)在發(fā)芽盒中裝填的厚度為2. 5cm，將沖洗好的白花除蟲菊的種子播種在發(fā)芽盒中的基質(zhì)上，在播種有白花除蟲菊種子的基質(zhì)上噴灑少量的無(wú)菌水，保持基質(zhì)濕潤(rùn)；
(f)培養(yǎng)將播種有白花除蟲菊種子的發(fā)芽盒放置到智能光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，調(diào)節(jié)控制智能光照培養(yǎng)箱的溫度為19°C、光照強(qiáng)度為1500Lex、光照時(shí)間為16hr/d，在此條件下培養(yǎng)25天，白花除蟲菊的種子萌芽以后逐漸長(zhǎng)高，得到高度為3-5cm的小苗；
(g)培養(yǎng)壯苗準(zhǔn)備好穴盤，在穴盤中裝入(a)步驟中準(zhǔn)備好的育苗基質(zhì)，將上述培養(yǎng)得到的高度為3-5cm的小苗從發(fā)芽盒中取出來(lái)，然后移栽到穴盤中的基質(zhì)上，澆上定根水保持基質(zhì)濕潤(rùn)，將移栽有小苗的穴盤放置到溫棚中進(jìn)行穴盤培養(yǎng)壯苗，調(diào)節(jié)控制溫棚內(nèi)穴盤培養(yǎng)的溫度為晝溫20°C，夜溫16°C，自然光照10hr/d，在此溫光條件下穴盤培養(yǎng)50天得到壯苗；(h)制作根尖染色體壓片將得到的每一株壯苗進(jìn)行編號(hào)，然后貼上標(biāo)簽，用剪刀剪取壯苗的根尖并編號(hào)，根尖的編號(hào)與所屬壯苗的編號(hào)相對(duì)應(yīng)，剪取的根尖長(zhǎng)度為O. 8cm，將剪取得到的根尖制作成根尖染色體壓片；
(i)篩選獲得四倍體植株將制作得到的根尖染色體壓片放到顯微鏡下觀察其染色體的數(shù)量，篩選出染色體數(shù)量為36條的壓片，根據(jù)篩出的壓片根尖編號(hào)挑選出對(duì)應(yīng)的壯苗，該壯苗為四倍體植株，其染色體數(shù)量為36條；
(j )栽培和良種擴(kuò)繁將挑選出來(lái)的四倍體壯苗進(jìn)行隔離種植，按照常規(guī)方法栽培管理8個(gè)月后，收獲得到四倍體白花除蟲菊的種子，將得到的種子進(jìn)行制種栽培，以后擴(kuò)繁得到大量的四倍體白花除蟲菊種子。 實(shí)施例2
一種四倍體白花除蟲菊種子的培育方法，其技術(shù)方案包括以下步驟 (a)準(zhǔn)備育苗基質(zhì)將泥炭和珍珠巖按照體積比31混合均勻，再裝放到高壓滅菌鍋中進(jìn)行高溫高壓滅菌，控制高溫高壓滅菌的條件為壓力O. 15MP、溫度121°C，育苗基質(zhì)在此壓力和溫度條件下滅菌2小時(shí)，滅菌結(jié)束以后得到育苗基質(zhì)；
(b)準(zhǔn)備種子挑選普通白花除蟲菊優(yōu)良品種的種子，挑選的種子要求飽滿無(wú)蟲眼；
(c)準(zhǔn)備試劑準(zhǔn)備好秋水仙素，用無(wú)菌水將秋水仙素配制成濃度為1000mg/L的溶液，然后將配制好的秋水仙素溶液裝放到燒杯中；
Cd)種子處理將挑選好的白花除蟲菊的種子放入裝有上述秋水仙素溶液的燒杯中浸泡，將浸泡有白花除蟲菊種子的燒杯放置在25°C的溫室中，在此溫度條件下浸泡24小時(shí)；
浸泡結(jié)束后，把白花除蟲菊的種子從秋水仙素溶液中取出來(lái)，然后用無(wú)菌水沖洗上述用秋水仙素溶液浸泡過(guò)的白花除蟲菊的種子，沖洗次數(shù)為8遍；
(e)播種準(zhǔn)備好發(fā)芽盒，將(a)步驟中準(zhǔn)備好的育苗基質(zhì)裝填到發(fā)芽盒中，育苗基質(zhì)在發(fā)芽盒中裝填的厚度為5cm，將沖洗好的白花除蟲菊的種子播種在發(fā)芽盒中的基質(zhì)上，在播種有白花除蟲菊種子的基質(zhì)上噴灑少量的無(wú)菌水，保持基質(zhì)濕潤(rùn);
(f)培養(yǎng)將播種有白花除蟲菊種子的發(fā)芽盒放置到智能光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，調(diào)節(jié)控制智能光照培養(yǎng)箱的溫度為21°C、光照強(qiáng)度為2000Lex、光照時(shí)間為lOhr/d，在此條件下培養(yǎng)20天，白花除蟲菊的種子萌芽以后逐漸長(zhǎng)高，得到高度為3-5cm的小苗；
(g)培養(yǎng)壯苗準(zhǔn)備好穴盤，在穴盤中裝入(a)步驟中準(zhǔn)備好的育苗基質(zhì)，將上述培養(yǎng)得到的高度為3-5cm的小苗從發(fā)芽盒中取出來(lái)，然后移栽到穴盤中的基質(zhì)上，澆上定根水保持基質(zhì)濕潤(rùn)，將移栽有小苗的穴盤放置到溫棚中進(jìn)行穴盤培養(yǎng)壯苗，調(diào)節(jié)控制溫棚內(nèi)穴盤培養(yǎng)的溫度為晝溫25°C，夜溫18°C，自然光照8hr/d，在此溫光條件下穴盤培養(yǎng)45天得到壯苗；
(h)制作根尖染色體壓片將得到的每一株壯苗進(jìn)行編號(hào)，然后貼上標(biāo)簽，用剪刀剪取壯苗的根尖并編號(hào)，根尖的編號(hào)與所屬壯苗的編號(hào)相對(duì)應(yīng)，剪取的根尖長(zhǎng)度為I. 0cm，將剪取得到的根尖制作成根尖染色體壓片；
(i)篩選獲得四倍體植株將制作得到的根尖染色體壓片放到顯微鏡下觀察其染色體的數(shù)量，篩選出染色體數(shù)量為36條的壓片，根據(jù)篩出的壓片根尖編號(hào)挑選出對(duì)應(yīng)的壯苗，該壯苗為四倍體植株，其染色體數(shù)量為36條；
(j)栽培和良種擴(kuò)繁將挑選出來(lái)的四倍體壯苗進(jìn)行隔離種植，按照常規(guī)方法栽培管理9個(gè)月后，收獲得到四倍體白花除蟲菊的種子，將得到的種子進(jìn)行制種栽培，以后 擴(kuò)繁得到大量的四倍體白花除蟲菊種子。
權(quán)利要求
1.四倍體白花除蟲菊種子的培育方法，其特征在于包括以下步驟 (a)準(zhǔn)備育苗基質(zhì)將泥炭和珍珠巖按照體積比31混合均勻，再裝放到高壓滅菌鍋中進(jìn)行高溫高壓滅菌，控制高溫高壓滅菌的條件為壓力O. 15MP、溫度121°C，育苗基質(zhì)在此壓力和溫度條件下滅菌O. 5-2小時(shí)，滅菌結(jié)束以后得到育苗基質(zhì)； (b)準(zhǔn)備種子挑選普通白花除蟲菊優(yōu)良品種的種子，挑選的種子要求飽滿無(wú)蟲眼； (c)準(zhǔn)備試劑準(zhǔn)備好秋水仙素，用無(wú)菌水將秋水仙素配制成濃度為600-1000mg/L的溶液，然后將配制好的秋水仙素溶液裝放到燒杯中； Cd)種子處理將挑選好的白花除蟲菊的種子放入裝有上述秋水仙素溶液的燒杯中浸泡，將浸泡有白花除蟲菊種子的燒杯放置在18-25°C的溫室中，在此溫度條件下浸泡24-48小時(shí)；浸泡結(jié)束后，把白花除蟲菊的種子從秋水仙素溶液中取出來(lái)，然后用無(wú)菌水沖洗上述用秋水仙素溶液浸泡過(guò)的白花除蟲菊的種子,沖洗次數(shù)為5-8遍； (e)播種準(zhǔn)備好發(fā)芽盒，將(a)步驟中準(zhǔn)備好的育苗基質(zhì)裝填到發(fā)芽盒中，育苗基質(zhì)在發(fā)芽盒中裝填的厚度為2. 5-5cm，將沖洗好的白花除蟲菊的種子播種在發(fā)芽盒中的基質(zhì)上，在播種有白花除蟲菊種子的基質(zhì)上噴灑少量的無(wú)菌水，保持基質(zhì)濕潤(rùn)； (f)培養(yǎng)將播種有白花除蟲菊種子的發(fā)芽盒放置到智能光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，調(diào)節(jié)控制智能光照培養(yǎng)箱的溫度為20土1°C、光照強(qiáng)度為1500-2000Lex、光照時(shí)間為10_16hr/d，在此條件下培養(yǎng)20-25天，白花除蟲菊的種子萌芽以后逐漸長(zhǎng)高，得到高度為3-5cm的小苗； (g)培養(yǎng)壯苗準(zhǔn)備好穴盤，在穴盤中裝入(a)步驟中準(zhǔn)備好的育苗基質(zhì)，將上述培養(yǎng)得到的高度為3-5cm的小苗從發(fā)芽盒中取出來(lái)，然后移栽到穴盤中的基質(zhì)上，澆上定根水保持基質(zhì)濕潤(rùn)，將移栽有小苗的穴盤放置到溫棚中進(jìn)行穴盤培養(yǎng)壯苗，調(diào)節(jié)控制溫棚內(nèi)穴盤培養(yǎng)的溫度為晝溫20-25°C，夜溫16-18°C，自然光照8_10hr/d，在此溫光條件下穴盤培養(yǎng)45-50天得到壯苗； (h)制作根尖染色體壓片將得到的每一株壯苗進(jìn)行編號(hào)，然后貼上標(biāo)簽，用剪刀剪取壯苗的根尖并編號(hào)，根尖的編號(hào)與所屬壯苗的編號(hào)相對(duì)應(yīng)，剪取的根尖長(zhǎng)度為O. 8-1. Ocm,將剪取得到的根尖制作成根尖染色體壓片； (i)篩選獲得四倍體植株將制作得到的根尖染色體壓片放到顯微鏡下觀察其染色體的數(shù)量，篩選出染色體數(shù)量為36條的壓片，根據(jù)篩出的壓片根尖編號(hào)挑選出對(duì)應(yīng)的壯苗，該壯苗為四倍體植株，其染色體數(shù)量為36條； (j )栽培和良種擴(kuò)繁將挑選出來(lái)的四倍體壯苗進(jìn)行隔離種植，按照常規(guī)方法栽培管理8-9個(gè)月后，收獲得到四倍體白花除蟲菊的種子，將得到的種子進(jìn)行制種栽培，以后擴(kuò)繁得到大量四倍體白花除蟲菊種子。
全文摘要
四倍體白花除蟲菊種子的培育方法，普通二倍體白花除蟲菊的種子用秋水仙素溶液浸泡處理以后，播種到基質(zhì)中，通過(guò)培養(yǎng)、移栽和壯苗培養(yǎng)后，用壯苗的根尖制作染色體壓片，用顯微鏡觀察壓片中根尖染色體的數(shù)量，篩選出壓片染色體數(shù)量為36條的根尖所對(duì)應(yīng)的壯苗植株，該壯苗植株為白花除蟲菊的四倍體植株，利用得到的白花除蟲菊四倍體植株進(jìn)行制種栽培，擴(kuò)繁以后獲得大量的四倍體種子，用獲得的四倍體白花除蟲菊的種子種植加工除蟲菊，能獲得較好的經(jīng)濟(jì)效益。本發(fā)明操作容易，成本低、效率高，能大量處理白花除蟲菊的種子，是一種較快速、較簡(jiǎn)便地獲取大量四倍體白花除蟲菊植株的方法。
文檔編號(hào)A01H1/08GK102792886SQ201210298218
公開日2012年11月28日 申請(qǐng)日期2012年8月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月21日
發(fā)明者楊曉, 楊梅, 趙東能, 梁飛 申請(qǐng)人:云南南寶生物科技有限責(zé)任公司