專利名稱：剛毛檉柳谷胱甘肽-s轉(zhuǎn)移酶基因及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶GST基因及其應(yīng)用，具體涉及一種從檉柳中克隆獲得的能明顯提高植物抗旱耐鹽能力的檉柳谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶基因及其在培育抗旱耐鹽植物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
谷胱甘妝S-轉(zhuǎn)移酶(Glutathione S-transferases, GSTs)是植物體內(nèi)一種重要的解毒酶，不僅能催化降解有毒的內(nèi)源或異源代謝產(chǎn)物，降低這些物質(zhì)導(dǎo)致的氧化損傷，而且同時(shí)具有GPX活性，能夠直接清除細(xì)胞內(nèi)的活性氧。目前，雖然已從多種植物中克隆獲得了 GST基因，并證實(shí)該基因具有提高植物抗逆能力。但大部分都是從不抗逆的甜土植物克隆獲得的，因此獲得的基因的抗旱耐鹽能力較差，且絕大部分抗旱耐鹽相關(guān)基因都是來自于草本植物和微生物等，由于它們與木本植物的遺傳差異，這些基因可能不能很好地提高木本植物的抗旱耐鹽能力。檉柳是一種抗旱耐鹽能力非常優(yōu)良的木本鹽生植物，能在含鹽量I %的土壤上形成自然林，是進(jìn)行抗旱耐鹽基因克隆的理想材料。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種從抗旱耐鹽能力非常優(yōu)良的檉柳中克隆獲得一個(gè)能明顯提高植物抗旱耐鹽能力的剛毛檉柳(Tamarix hispida)谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶基因及其應(yīng)用，命名為ThGST基因，ThGST基因cDNA全長1048bp，基因序列如下
權(quán)利要求
1.剛毛檉柳谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶基因，其特征在于所述基因命名為ThGST基因，ThGST基因cDNA全長1048bp，基因序列如下GGGGGTAGAATCTTGGTTTTCTTCTCATCTGTAAACACTAAGCAGGCGGCTTGAGCGCTATGGAGGAAACGCCCAAGTCAGGGATGAAGCTGTATTCATATTGGAAGAGCACGTGCGCATGCCGTGTCCGTATCGCACTGAACTTGAAAGGGCTGAAGTATGAGTACAAGGCAGTGGATTTGCTTAAAGGGGAGCATCACAGTCCTGAGTTCAGTGAGCTAAATCCCCTAGGTTTTGTACCAGTGCTGGTCGATGAGGACATAGTACTTGCTGATTCGTTTGCCATCTTGATGTATATGGAGGAAAAGTATCCTGAACGGCCTTTGTTGCCTCAGGAGCTTCAGAGAAGAGCCATTAATTACCAGGCTGCAAATATCGTTTCCTCAAGCATACAGCCACATCAAAATCTAACCTTACTGAATTACATTGAAGAAAAGCTTGGTGCTGAAGAGATGTATTTATGGGCTCAAAATCAGATTAAGAAAGGTTTTTCTGCGCTGGAGAAGCTTTTGAGCAACCATGCTGGAAGATATGCTACTGGAGATGACATTGCACTGGCAGATGTCTTCCTGGCACCCCAGACTGATGCTGCAATTAAGACATATAACATTAACATGGATGAGTTCCCTCTGTTAAAGAGGTTGAACCATATGTACGGTGAAACACCAGCATTCCAGGATGCTATGCCGGAAAAGCAGCCAGATTCTCCCGACAATGTTAAATAAGGTACCGAGCTCGAATTTCCCCGATCGTTCAAACATTTGGCAATAAAGTTTCTTAAGATTGAATCCTGTTGCCGGTCTTGCGATGATTATCATATAATTTCTGTTGAATTACGTTAAGCATGTAATAATTAACATGTAATGCATGACGTTATTTATGAGATGGGTTTTTATGATTAGAGTCCCGCAATTATACATTTAATACGCGATAGAAAACAAAATATAGCGCGCAAACTAGGATAAATTATCGCGCGCGGTGTCATCTATGTTACTAGATCGGGAATTCACTGGCCGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGGGAAAACCCT。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的剛毛檉柳谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶基因，其特征在于所述ThGST基因的cDNA序列編碼的氨基酸序列包括221個(gè)氨基酸，氨基酸序列如下MEETPKSGMKLYSYWKSTCACRVRIALNLKGLKYEYKAVDLLKGEHHSPEFSELNPLGFVPVLVDEDIVLADSFALMYMEEKYPERPLLPQELQRRAINYQAANIVSSSIQPHQNLTLLNYIEEKLGAEEMYLWAQNQIKKGFSALEKLLSNHAGRYATCDDIALADVFLAPQTDAAIKTYNINMDEFPLLKRLNHMYGETPAFQDAMPEKQPDSPDNVK。
3.權(quán)利要求I所述剛毛檉柳谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶基因序列用于培育抗旱耐鹽轉(zhuǎn)基因植物品種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的剛毛檉柳谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶基因的應(yīng)用，其特征在于所述植物為林木。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的剛毛檉柳谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶基因的應(yīng)用，其特征在于所述林木為楊樹或白樺。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的剛毛檉柳谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶基因的應(yīng)用，其特征在于所述植物為擬南芥或煙草。
全文摘要
剛毛檉柳谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶基因及其應(yīng)用，涉及一種谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶GST基因及其應(yīng)用。本發(fā)明的檉柳谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶基因，cDNA全長1048bp，cDNA序列編碼的氨基酸序列包括221個(gè)氨基酸，可用于培育抗旱耐鹽轉(zhuǎn)基因植物品種。將ThGST基因轉(zhuǎn)入模式植物擬南芥中，轉(zhuǎn)基因T3代擬南芥種子在100mM NaCl脅迫后平均發(fā)芽率是非轉(zhuǎn)基因野生型的4.6倍，平均根長是非轉(zhuǎn)基因?qū)φ盏?.6倍，平均鮮重是2.36倍。300mM甘露醇脅迫后轉(zhuǎn)基因擬南芥的平均發(fā)芽率是非轉(zhuǎn)基因?qū)φ盏?.4倍，平均根長比對照增加18～90%，鮮重增加14～42%，具有明顯的抗旱耐鹽能力，是用于林木基因工程育種的優(yōu)良基因。
文檔編號A01H5/00GK102766642SQ20121023380
公開日2012年11月7日 申請日期2012年7月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月6日
發(fā)明者楊桂燕, 王玉成, 王超, 高彩球 申請人:東北林業(yè)大學(xué)