專利名稱：千日紅試管花及其培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種組培花卉及其培養(yǎng)方法，具體涉及千日紅試管花及其培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
千日紅WoAiosa)別名火球花、紅光球、千年紅,是覓科千日紅屬一年生草木花卉，原產(chǎn)亞洲熱帶，現(xiàn)我國及世界各地廣為栽培。千日紅花期可由6月直到11月霜前，且花色艷麗具光澤。其球狀花序主要由膜質(zhì)苞片組成，花干后不凋，經(jīng)久不變，故得名千日紅。千日紅植株低矮，花繁色濃，是配置秋季花壇、種植缽和花鏡的好材料，干后花朵群集一株，宛如繁星點(diǎn)點(diǎn)燦爛多姿。因其花期長，花色與花形經(jīng)久不變，所以又是作鮮切花的良好材料。此外，其花序及全草皆可入藥，具有清肝、散結(jié)、止咳和定喘之效。千日紅多用種子繁殖，由于其種子體積太小，采收不易，即使采收到的種子再進(jìn)行播種繁殖也很難保證其具有母株原有的優(yōu)良性狀。因此，利用組培技術(shù)對(duì)千日紅進(jìn)行快繁，不僅可在短期內(nèi)大量繁殖，加速推廣應(yīng)用，還可對(duì)其進(jìn)行種質(zhì)保存，是行之有效的途徑。鑒于千日紅花色艷麗、花期長且其花序觀賞及應(yīng)用價(jià)值均較高，可作為試管開花研究及應(yīng)用開發(fā)的優(yōu)良植物材料，且目前尚未有對(duì)其進(jìn)行試管開花研究的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。為此，研究探討千日紅種子離體快繁和成花誘導(dǎo)的適宜條件，為千日紅的大量繁殖推廣及其試管開花提供培養(yǎng)技術(shù)，具有較高的商業(yè)開發(fā)價(jià)值。在自然條件下，植物必須達(dá)到某種成熟階段時(shí)才能開花。雖然對(duì)于花芽的煥醒及開花誘導(dǎo)已進(jìn)行了不少研究，但至今其機(jī)理還不是很清楚。自從1946年羅士韋首次報(bào)道田野菟絲子在試管中開花以來，植物組織培養(yǎng)技術(shù)已用于植物離體開花研究。利用現(xiàn)代植物離體培養(yǎng)技術(shù)，使植物開花過程在密閉的培養(yǎng)容器內(nèi)完成，這就叫植物試管開花。目前國內(nèi)外已報(bào)道了約30多個(gè)科的近百種植物可誘導(dǎo)試管開花，研究對(duì)象包括藥用植物和田間雜草等，其中以花卉研究得最多。試管開花由于具有生長條件相對(duì)可控、重復(fù)性強(qiáng)、組織培養(yǎng)的周期短等特點(diǎn)，可為研究植物由營養(yǎng)生長向生殖發(fā)育的轉(zhuǎn)變以及開花生理機(jī)制研究，提供更精準(zhǔn)的研究手段和良好的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。由于試管開花不受季節(jié)限制，可以隨時(shí)誘導(dǎo)并且能縮短從瓶苗到成花的時(shí)間，因而可以大大降低栽培設(shè)施的投入和生產(chǎn)管理費(fèi)用。此外，植物試管開花還是促使植物生物技術(shù)與育種結(jié)合的另一條途徑，通過該途徑，打破了植物在自然條件下的生活周期，縮短植物營養(yǎng)生長時(shí)間，使植物開花提前，從而縮短育種年限，更加有利于雜交選育出新的品系，加快品種改良進(jìn)程。另外，將開花的試管苗接種到裝有色彩艷麗的果凍狀營養(yǎng)液的密封玻璃瓶中，只要給予一定的光照和溫度，就能正常生長，因而可開發(fā)成時(shí)尚禮品直接進(jìn)入消費(fèi)市場，豐富試管花卉種類，為這一產(chǎn)業(yè)注入新鮮血液，并為人們?nèi)找嬖鲩L的鮮花需求開辟廣闊的市場前景。目前，在國內(nèi)外，試管花卉很流行，并且已形成一定產(chǎn)業(yè)，但可以大量穩(wěn)定開花的試管花卉商品還很少。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種千日紅試管花及其培養(yǎng)方法。利用植物組織培養(yǎng)方法，通過對(duì)培養(yǎng)基成分的調(diào)控，提供一種培育千日紅試管花的培養(yǎng)基及組培苗試管內(nèi)開花的培養(yǎng)方法。本發(fā)明的目的是通過以下方法實(shí)現(xiàn)的
本發(fā)明的千日紅試管花的培養(yǎng)方法，包括無菌苗培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、瓶苗開花培養(yǎng)，其特征在于
(1)無菌苗培養(yǎng)將千日紅的種子用體積比為75%的酒精表面消毒30S，再用重量比為
O.1%的升汞消毒lOmin，無菌水沖洗3 5次后，接種到無菌苗培養(yǎng)基上；所述無菌苗培養(yǎng)基為改良 MS+0. 5 I. 5 mg/L 6-BA +0. I O. 4 mg/L NAA +5-20 mg/L PP333 +20 g/L 蔗 糖+ 6 g/L瓊脂粉；MS培養(yǎng)基為1962年，Murashige和Skoog公開的MS培養(yǎng)基；所述改良MS培養(yǎng)基在MS培養(yǎng)基中，將KNO3的用量改為950mg/L、NH4NO3的用量改為500mg/L，其余成分及用量不變；改良MS培養(yǎng)基的全部成分及用量如表I所示；所述6-BA，指6 —芐氨基嘌吟；所述KT，指6 —糠氨基嘌吟；所述PP333指重量比為15%的多效唑；
(2)增殖培養(yǎng)取步驟(I)無菌苗切成帶芽莖段，接種到增殖培養(yǎng)基中增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為23 27 °C，光照強(qiáng)度為1000 1500 LX，光照時(shí)間為12 16 h/d ;所述增殖培養(yǎng)基為 MS+0. I I. O mg/L 6-BA +0. I O. 8 mg/L NAA +20 g/L 蔗糖+ 6 g/L 瓊脂粉；
(3)生根培養(yǎng)將步驟(2)增殖的芽苗，接到生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根。培養(yǎng)溫度為23 27 °C，光照強(qiáng)度為1000 1500 LX，光照時(shí)間為12 16h/d ;所述生根培養(yǎng)基為1/2 MS+0. 5mg/L NAA +20 g/L 蔗糖 + 6 g/L 瓊脂粉；
(4)瓶苗開花培養(yǎng)從步驟(3)培養(yǎng)的植株中，切取3cm含頂芽和/或含腋芽的莖段，接種到瓶苗開花培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為25°C 28°C，光照強(qiáng)度為1000 1500 LX,光照時(shí)間為12 16 h/d的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)不少于60d ;所述瓶苗開花培養(yǎng)基為改良MS+4 10 mg/L亞精胺+20 g/L蔗糖+6 g/L瓊脂粉。本發(fā)明還保護(hù)由上述培養(yǎng)方法得到的千日紅試管花。表I:改良MS培養(yǎng)基成分及用量
權(quán)利要求
1.一種千日紅試管花的培養(yǎng)方法，包括無菌苗培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、瓶苗開花培養(yǎng)，其特征在于 (1)無菌苗培養(yǎng)將千日紅的種子用體積比為75%的酒精表面消毒30S，再用重量比為O.1%的升汞消毒lOmin，無菌水沖洗3 5次后，接種到無菌苗培養(yǎng)基上；所述無菌苗培養(yǎng)基為改良 MS+0. 5 I. 5 mg/L 6-BA +0. I O. 4 mg/L NAA +5-20 mg/L PP333 +20 g/L 蔗糖+ 6 g/L瓊脂粉；MS培養(yǎng)基為1962年，Murashige和Skoog公開的MS培養(yǎng)基；所述改良MS培養(yǎng)基在MS培養(yǎng)基中，將KNO3的用量改為950mg/L、NH4NO3的用量改為500mg/L，其余成分及用量不變；所述6-BA，指6 —芐氨基嘌吟；所述KT，指6 —糠氨基嘌吟；所述PP333指重量比為15%的多效唑； (2)增殖培養(yǎng)取步驟(I)無菌苗切成帶芽莖段，接種到增殖培養(yǎng)基中增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為23 27 °C，光照強(qiáng)度為1000 1500 LX，光照時(shí)間為12 16 h/d ;所述增殖培養(yǎng)基為 MS+0. I I. O mg/L 6-BA +0. I O. 8 mg/L NAA +20 g/L 蔗糖+ 6 g/L 瓊脂粉； (3)生根培養(yǎng)將步驟(2)增殖的芽苗，接到生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根；培養(yǎng)溫度為23 27 V，光照強(qiáng)度為1000 1500 LX,光照時(shí)間為12 16h/d ;所述生根培養(yǎng)基為1/2 MS+0. 5mg/L NAA +20 g/L 蔗糖+ 6 g/L 瓊脂粉； (4)瓶苗開花培養(yǎng)從步驟(3)培養(yǎng)的植株中，切取3cm含頂芽和/或含腋芽的莖段，接種到瓶苗開花培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為25°C 28°C，光照強(qiáng)度為1000 1500 LX,光照時(shí)間為12 16 h/d的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)不少于60d ;所述瓶苗開花培養(yǎng)基為改良MS+4 10 mg/L亞精胺+20 g/L蔗糖+6 g/L瓊脂粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種千日紅試管花的培養(yǎng)方法，其特征在于所述瓶苗開花培養(yǎng)基為改良MS+7mg/L亞精胺+ 20 g/L蔗糖+ 6 g/L瓊脂粉。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種千日紅試管花的培養(yǎng)方法，其特征在于所述瓶苗開花培養(yǎng)中，選擇的接種材料為健壯植株的頂部，切取長度為3cm含頂芽的莖段，接種到瓶苗開花培養(yǎng)基中。
4.由權(quán)利要求1、2、3所述的方法培養(yǎng)的千日紅試管花。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種千日紅試管花及其培養(yǎng)方法。千日紅試管花的培養(yǎng)方法，包括無菌苗培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、瓶苗開花培養(yǎng)。本發(fā)明的千日紅試管花培養(yǎng)方法，由于不受季節(jié)限制，隨時(shí)可以誘導(dǎo)千日紅試管苗開花，并且能夠縮短其營養(yǎng)生長時(shí)間使之提前開花，可用于千日紅雜交育種，從而加快了千日紅品種改良進(jìn)程；本發(fā)明的千日紅試管花培養(yǎng)方法，首次解決了千日紅試管內(nèi)難開花的問題，接種到工藝瓶內(nèi)，可以制成試管花卉投放消費(fèi)市場，開花率可以達(dá)到86%，為花卉愛好者提供了一種新的試管花；操作簡單，實(shí)用性強(qiáng)、推廣性好。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102630568SQ20121012768
公開日2012年8月15日 申請(qǐng)日期2012年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月27日
發(fā)明者林慶良, 鄒娜 申請(qǐng)人:江西農(nóng)業(yè)大學(xué)