專利名稱：一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法
技術領域：
本發(fā)明屬于生物技術領域中的植物組織培養(yǎng)技術，具體涉及到一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法。
背景技術：
植物組織培養(yǎng)是本世紀初開始，以植物生理學為基礎發(fā)展起來的一項植物繁殖技術。經過近一個世紀的發(fā)展，植物組培技術以其獨特的優(yōu)勢，已在科學研究和生產上得到廣泛應用，發(fā)展至今，它的理論研究已相當精深。植物組織培養(yǎng)技術是一項技術性很強的工作、技術易傳性差，基礎設施投入大，無菌條件要求高，煉苗周期長，該技術很難普及推廣應用。同時，它的技術環(huán)節(jié)還存在不少問題。傳統(tǒng)組培過程繁雜的技術環(huán)節(jié)，都是圍繞防止污染而制定的，控制污染成了組培中的首要技術，不能把污染率降低到可以接受的范圍，也就意味著這項工藝不能進行下去。而影響污染的因素多種多樣，因此，使得污染問題十分復雜，也很難防治，成為限制組培產業(yè)化的重要原因之一。“植物開放式組織培養(yǎng)”是一項可以在自然、有菌環(huán)境中，接種、培養(yǎng)各類植物組織的高新技術。它是針對目前廣泛使用的、必須在密閉無菌環(huán)境下，接種、培養(yǎng)植物組織的組織培養(yǎng)而設計、發(fā)明的。開放式組織培養(yǎng)可使植物組織培養(yǎng)育苗過程脫離嚴格無菌的操作環(huán)境，在開放的有菌環(huán)境中進行植物組織培養(yǎng)育苗，這從根本上簡化了植物組織培養(yǎng)育苗環(huán)節(jié)，提高了工作效率，大大降低了育苗成本。申請?zhí)枮?0041002 4035.5的“一種非無菌條件下的植物組織培養(yǎng)方法”，該技術主要是在培養(yǎng)基里添加消毒殺菌劑，制備抑菌培養(yǎng)基，在非無菌自然環(huán)境下接種，并按常規(guī)進行管理培養(yǎng)。該技術省略了消毒滅菌設備、工具、材料以及繁瑣的操作環(huán)節(jié)，從而形成一種簡單、易行、投資少而且在非無菌自然環(huán)境下和條件下的植物組織培養(yǎng)方法。但該技術所述的殺菌劑是以化學試劑為主，配方中組成起來的殺菌劑種類繁多，生產成本也會由此而提高，抑菌劑配制也相對很繁瑣。申請?zhí)枮?00910060484.8的“一種開放式植物組織培養(yǎng)育苗方法”，該技術是在培養(yǎng)基中添加的抑菌劑是以植物提取物為主。以植物為原料提取抑菌劑，生產成本確實很低，但從該工藝體現(xiàn)出的植物提取物的制備工藝卻很復雜，而且需要昂貴的設施設備才能實現(xiàn)植物提取抑菌劑的制備，這樣的工藝僅限于有一定經濟實力的企業(yè)、科研單位才能運作，很難普及推廣應用。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是克服上述技術的不足而提供一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法。主要體現(xiàn)于:本發(fā)明的配方中主要凱松為主，成分組成簡單，原料易找且使用成本低廉；抑菌劑配制過程工藝簡單。利用常規(guī)培養(yǎng)基中添加抑菌劑制備成抑菌培養(yǎng)基，用普通塑料杯作為培養(yǎng)容器，在非無菌自然環(huán)境下將植物組織接入抑菌培養(yǎng)基中，在自然環(huán)境條件下進行培養(yǎng)管理。組織培養(yǎng)育苗過程脫離嚴格無菌的操作環(huán)境，在開放的有菌環(huán)境中進行植物組織培養(yǎng)育苗，這從根本上簡化了植物組織培養(yǎng)育苗環(huán)節(jié)。凱松是英文KATONH的音譯，有效成分是異噻唑啉酮CIT和MIT的混合物。CAS:26172-55-4，2682-20-4 ;分子式:C4H4C1N0S+C4H5N0S ;分子量:149.56+115.06。凱松殺菌廣譜高效、無毒、持效性長，能有效的抑制和滅除菌類和各種微生物；凱松安全方便，性質穩(wěn)定，加入量少，在PH值3-9.5的范圍內均適用；凱松綠色環(huán)保，對環(huán)境友好，不含甲醛重金屬等有害物質。本發(fā)明是通過以下技術方案來實現(xiàn)的:1、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，是通過制備抑菌劑，利用常規(guī)培養(yǎng)基中添加抑菌劑制備成抑菌培養(yǎng)基，用普通塑料杯作為培養(yǎng)容器，在非無菌自然環(huán)境下將植物組織接入抑菌培養(yǎng)基中，在自然環(huán)境條件下進行培養(yǎng)管理。2、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其抑菌劑母液配制使用的原料是:(I)凱松(異噻唑啉酮)。(2)氯化鎂。(3)硝酸鎂。(4)山梨酸鉀。 (5)苯鉀酸鈉。(6)蒸餾水。3、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其抑菌劑母液配制方法如下:(I)原料配比:凱松(異噻唑啉酮)3克、氯化鎂23克、硝酸鎂23克、山梨酸鉀20克、苯鉀酸鈉20克、蒸餾水1000ml。(2)母液配制:先用200ml蒸餾水稀釋凱松，再用400ml蒸餾水稀釋氯化鎂、硝酸鎂，接著用400ml蒸餾水稀釋山梨酸鉀、苯鉀酸鈉，最后將上述液體混合起來即制備成母液，并裝瓶避光保存。4、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其是用透明無毒的普通塑料杯作為培養(yǎng)容器。5、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其抑菌培養(yǎng)基的配制方法如下:(I)按常規(guī)培配制培養(yǎng)基質，并根據各種植物培養(yǎng)所需添加無機鹽、糖、激素。(2)每IOOOml的培養(yǎng)基中添加抑菌劑母液按50 90ml。(3)上述混合液配制好后，每IOOOml混合液添加20克瓊脂，并將其加熱至瓊脂完全溶解后，分裝到無毒的普通塑料杯作為培養(yǎng)容器。6、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其接種方法如下:(I)按常規(guī)采取植物組織。(2)在非無菌自然環(huán)境下將植物組織接入裝有抑菌培養(yǎng)基培養(yǎng)容器中。(3)用保鮮膜將培養(yǎng)容器口封住。7、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其接入植物組織種的培養(yǎng)容放置在自然環(huán)境條件下進行培養(yǎng)管理。本發(fā)明既有如下優(yōu)點:1、本發(fā)明配方中成分組成簡單，原料易找且使用成本低廉；抑菌劑配制過程工藝簡單，但應用效果顯著。2、本發(fā)明無需高壓滅菌、無菌接種和無菌培養(yǎng)，昂貴的高壓滅菌鍋和超凈工作臺被省去。3、本發(fā)明用普通塑料杯作為培養(yǎng)容器，更換了操作困難、易損的玻璃器皿。4、本發(fā)明是在非無菌自然環(huán)境下將植物組織接入抑菌培養(yǎng)基中，在自然環(huán)境條件下進行培養(yǎng)管理，省略了照價昂貴的接種室、培養(yǎng)室。5、本發(fā)明是在自然有菌環(huán)境接種、自然陽光培養(yǎng)環(huán)境，組培苗生長勢強，常見的玻璃化、褐化、黃化等影響正常生長問題大為緩解；組培苗向商品苗過度期的煉苗、緩苗時間短，成活率高達95%以上。
具體實施例方式下面結合實施例對本發(fā)明的方法進一步說明。1、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，是通過制備抑菌劑，利用常規(guī)培養(yǎng)基中添加抑菌劑制備成抑菌培養(yǎng)基，用普通塑料杯作為培養(yǎng)容器，在非無菌自然環(huán)境下將植物組織接入抑菌培養(yǎng)基 中，在自然環(huán)境條件下進行培養(yǎng)管理。2、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其抑菌劑母液配制使用的原料是:(I)凱松(異噻唑啉酮)。(2)氯化鎂。(3)硝酸鎂。(4)山梨酸鉀。(5)苯鉀酸鈉。(6)蒸餾水。3、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其抑菌劑母液配制方法如下:(I)原料配比:凱松(異噻唑啉酮)3克、氯化鎂23克、硝酸鎂23克、山梨酸鉀20克、苯鉀酸鈉20克、蒸餾水1000ml。(2)母液配制:先用200ml蒸餾水稀釋凱松，再用400ml蒸餾水稀釋氯化鎂、硝酸鎂，接著用400ml蒸餾水稀釋山梨酸鉀、苯鉀酸鈉，最后將上述液體混合起來即制備成母液，并裝瓶避光保存。4、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其是用透明無毒的普通塑料杯作為培養(yǎng)容器。5、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其抑菌培養(yǎng)基的配制方法如下:(I)按常規(guī)培配制培養(yǎng)基質，并根據各種植物培養(yǎng)所需添加無機鹽、糖、激素。(2)每IOOOml的培養(yǎng)基中添加抑菌劑母液按50 90ml。(3)上述混合液配制好后，每IOOOml混合液添加20克瓊脂，并將其加熱至瓊脂完全溶解后，分裝到無毒的普通塑料杯作為培養(yǎng)容器。6、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其接種方法如下:(I)按常規(guī)采取植物組織。(2)在非無菌自然環(huán)境下將植物組織接入裝有抑菌培養(yǎng)基培養(yǎng)容器中。(3)用保鮮膜將培養(yǎng)容器口封住。
7、一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其接入植物組織種的培養(yǎng)容放置在自然環(huán)境條件下進行培 養(yǎng)管理。
權利要求
1.一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其特征是該方法是通過制備抑菌劑，利用常規(guī)培養(yǎng)基中添加抑菌劑制備成抑菌培養(yǎng)基，用普通塑料杯作為培養(yǎng)容器，在非無菌自然環(huán)境下將植物組織接入抑菌培養(yǎng)基中，在自然環(huán)境條件下進行培養(yǎng)管理。
2.根據權利要求書I所述的一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其特征是抑菌劑母液配制使用的原料是: (1)凱松(異噻唑啉酮)。
(2)氯化鎂。
(3)硝酸鎂。
(4)山梨酸鉀。
(5)苯鉀酸鈉。
(6)蒸餾水。
3.根據權利要求書I所述的一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其特征是抑菌劑母液配制方法如下: (1)原料配比:凱松(異噻唑啉酮)3克、氯化鎂23克、硝酸鎂23克、山梨酸鉀20克、苯鉀酸鈉20克、蒸餾水1000ml。
(2)母液配制:先用200ml蒸餾水稀釋凱松，再用400ml蒸餾水稀釋氯化鎂、硝酸鎂，接著用400ml蒸餾水稀釋山梨酸鉀、苯鉀酸鈉，最后將上述液體混合起來即制備成母液，并裝瓶避光保存。
4.根據權利要求書I所述的一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其特征是用透明無毒的普通塑料杯作為培養(yǎng)容器。
5.根據權利要求書I所述的一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其特征是抑菌培養(yǎng)基的配制方法如下: (1)按常規(guī)培配制培養(yǎng)基質，并根據各種植物培養(yǎng)所需添加無機鹽、糖、激素； (2)每IOOOml的培養(yǎng)基中添加抑菌劑母液按50 90ml。
(3)上述混合液配制好后，每1000ml混合液添加20克瓊脂，并將其加熱至瓊脂完全溶解后，分裝到無毒的普通塑料杯作為培養(yǎng)容器。
6.根據權利要求書I所述的一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其特征是接種方法如下: (1)按常規(guī)采取植物組織。
(2)在非無菌自然環(huán)境下將植物組織接入裝有抑菌培養(yǎng)基培養(yǎng)容器中。
(3)用保鮮膜將培養(yǎng)容器口封住。
7.根據權利要求書I所述的一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法，其特征是接入植物組織種的培養(yǎng)容放置在自然環(huán)境條件下進行培養(yǎng)管理。
全文摘要
本發(fā)明屬于生物技術領域中的植物組織培養(yǎng)技術，具體涉及到一種植物開放式組織培養(yǎng)育苗的方法。具體步驟是通過制備抑菌劑，利用常規(guī)培養(yǎng)基中添加抑菌劑制備成抑菌培養(yǎng)基，用普通塑料杯作為培養(yǎng)容器，在非無菌自然環(huán)境下將植物組織接入抑菌培養(yǎng)基中，在自然環(huán)境條件下進行培養(yǎng)管理。本發(fā)明的配方中成分組成簡單，原料易找且使用成本低廉；抑菌劑配制過程工藝簡單，但應用效果顯著。組織培養(yǎng)育苗過程脫離嚴格無菌的操作環(huán)境，在開放的有菌環(huán)境中進行植物組織培養(yǎng)育苗，這從根本上簡化了植物組織培養(yǎng)育苗環(huán)節(jié)。
文檔編號A01H4/00GK103155861SQ20111041030
公開日2013年6月19日 申請日期2011年12月10日 優(yōu)先權日2011年12月10日
發(fā)明者何寒 申請人:何寒