專利名稱：一種雌性鯉魚性逆轉(zhuǎn)為雄性鯉魚的培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及水產(chǎn)動物遺傳育種技術(shù)領(lǐng)域，更具體涉及一種將鯉魚由雌性逆轉(zhuǎn)為雄性鯉魚的培育方法，采用該方法培育出的遺傳型為雌性但生理上為雄性的鯉魚可以作為親本，用它產(chǎn)生的精液與普通雌性鯉魚產(chǎn)生的卵子雜交，就可以生產(chǎn)出后代全部為雌性的鯉魚應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖。
背景技術(shù)：
魚類是蛋白食品的主要來源之一，我國人民約1/3的動物蛋白消費來自魚類等水產(chǎn)品，其中約70%的水產(chǎn)品來源于水產(chǎn)養(yǎng)殖。我國是世界上唯一一個水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量超過捕撈量的國家。優(yōu)良品種是水產(chǎn)養(yǎng)殖可持續(xù)健康發(fā)展的基礎(chǔ)，培育優(yōu)良性狀的養(yǎng)殖魚類新品種具有非常重要的意義。鯉魚是我國淡水養(yǎng)殖的主導(dǎo)性品種之一，據(jù)農(nóng)業(yè)部統(tǒng)計，我國2008年鯉魚養(yǎng)殖總產(chǎn)量超過235萬噸，約占淡水養(yǎng)殖總產(chǎn)量的11.4%。在生產(chǎn)實踐中發(fā)現(xiàn)，鯉魚具有雌性比雄性生長速度明顯快的特點，2齡雌性鯉魚比同齡雄性鯉魚的平均體重約高30%，因此，養(yǎng)殖全雌的鯉魚將縮短養(yǎng)殖周期，節(jié)約成本，具有明顯的經(jīng)濟效益。鯉魚的性別決定方式為雌性同型(XX)、雄性異型(XY)。采用雌核發(fā)育可以直接培育出全雌的鯉魚，但是雌核發(fā)育操作復(fù)雜，生產(chǎn)效率較低，無法滿足大規(guī)模水產(chǎn)養(yǎng)殖需求。 將雌核發(fā)育技術(shù)與性逆轉(zhuǎn)技術(shù)相結(jié)合，先通過雌核發(fā)育技術(shù)獲得雌性鯉魚，再將雌性個體性逆轉(zhuǎn)為生理雄性鯉魚，一旦獲得少量的生理雄性鯉魚，則可以通過有性雜交大規(guī)模生產(chǎn)全雌鯉魚(Wu C, Chen R, Ye Y, Huang W, Production of all-female carp and its application in fish cultivation. Aquaculture, 1990, 85:327)。將雌性鯉魚性逆轉(zhuǎn)為生理雄性的鯉魚是大規(guī)模培育全雌鯉魚的關(guān)鍵。魚類屬于低等的脊椎動物，性激素在魚類性別分化過程中起重要作用，在外源激素的作用下，可以改變魚類原有的性別分化方向，使基因型為雌性(雄性)的個體轉(zhuǎn)變成為生理雄性(雌性)，從而使性別發(fā)生逆轉(zhuǎn)。一般認為，激素處理的起始時期應(yīng)在性腺形態(tài)分化之前，即在性腺分化方向的可變期進行，當(dāng)魚類性別分化已經(jīng)完成后再進行激素處理，魚類發(fā)生性逆轉(zhuǎn)的難度非常大。由于鯉魚幼魚階段無法區(qū)別雌雄，因此在進行性逆轉(zhuǎn)之前，需要先通過雌核發(fā)育獲得雌性幼鯉，然后再采用雄性激素處理約20天齡的雌性幼鯉來進行鯉魚的性逆轉(zhuǎn)(吳清江， 葉玉珍，陳榮德，童金茍，紅鯉8305純系的產(chǎn)生及其生物學(xué)特性。海洋與湖沼，1991，22(4): 四5-四9)，從而獲得性別遺傳型仍然是雌性(XX)，但表型上具有正常發(fā)育的精巢，且能產(chǎn)生具有正常功能的精子的生理雄性鯉魚。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是在于提供了一種將雌性鯉魚性逆轉(zhuǎn)為雄性鯉魚的培育方法，方法易行，操作簡便，不需要進行復(fù)雜的人工雌核發(fā)育操作，可以直接將遺傳型為雌性的鯉魚性逆轉(zhuǎn)為生理雄性的鯉魚。一旦獲得性逆轉(zhuǎn)的生理雄性鯉魚，就可以作為親本，將它產(chǎn)生的精液與普通鯉魚產(chǎn)生的卵子雜交，從而大規(guī)模生產(chǎn)子代全部為雌性的鯉魚。雌性鯉魚的生長速度比雄性鯉魚的生長速度快，養(yǎng)殖全雌的鯉魚將縮短養(yǎng)殖周期，節(jié)約成本，具有明顯的經(jīng)濟效益。為了達到上述的目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)措施
一種雌性鯉魚性逆轉(zhuǎn)為雄性鯉魚的培育方法，其步驟是
A、將開口攝食1-3天后的鯉魚幼苗按常規(guī)方法在池塘中養(yǎng)殖10-11個月；(黃河鯉安全高效健康養(yǎng)殖模式，科學(xué)養(yǎng)魚，2010，11 42)
B、將10-11月齡鯉魚從池塘中取出，暫養(yǎng)在室外水泥池(長X寬X水深 =3. 5mX2. 3mXl. 5m)中，逐條輕輕擠壓鯉魚腹部，將具有精液流出的雄性鯉魚與沒有精液流出的鯉魚分開；
C、將銅質(zhì)挖卵器(挖卵器柄長10cm，前端具有長1.5cm，寬0. 3cm的凹槽)輕輕插入不能擠出精液的鯉魚生殖孔中，然后偏向左側(cè)或右側(cè)，旋轉(zhuǎn)3-5圈抽出，如果可以得到少量卵粒，就將該雌魚挑選出，作為性逆轉(zhuǎn)處理的對象；
D、將挑選出的準(zhǔn)備用于性逆轉(zhuǎn)處理的鯉魚在室外水泥池(長X寬X水深 =3. 5mX 2. 3mX 1. 5m)中養(yǎng)殖1個星期后開始實驗。養(yǎng)殖密度為每口水泥池不超過20條魚；
E、在每天上午8點、中午12點和下午4點，按照鯉魚體重的5%-7%投喂三次含有17 α -甲基睪酮(17 α -Methyltestosterone, MT) 50ugMT/g的鯉魚飼料(武漢正大有限公司產(chǎn)品)。同時，分別根據(jù)每條鯉魚體重，每隔5天在鯉魚胸腔混合注射地歐酮 (Domperidone， DOM) 2mg/kg 禾口促黃體素釋放激素 A2 (Luteinizing Hormone Releasing Hormone A2, LHRH-A2) 5 μ g/kg,以及鯉魚垂體 2mg/kg ；
F、按步驟E連續(xù)處理試驗鯉魚2個月后，輕輕擠壓鯉魚腹部，有乳白色精液流出的試驗魚就是遺傳型為雌性，而生理上是雄性的性逆轉(zhuǎn)鯉魚；
G、用這種性逆轉(zhuǎn)的鯉魚產(chǎn)生的精液與普通雌性鯉魚產(chǎn)生的卵子雜交，就可以大量生產(chǎn)后代全部為雌性的鯉魚用于水產(chǎn)養(yǎng)殖。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點和效果
采用該方法不需要進行復(fù)雜的人工雌核發(fā)育操作，可以直接將遺傳型為雌性的鯉魚性逆轉(zhuǎn)為生理雄性的鯉魚，并且可以將性逆轉(zhuǎn)的鯉魚直接作為親本，通過與普通雌性鯉魚雜交，大規(guī)模生產(chǎn)子代全部為雌性的鯉魚，應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖實踐。由于雌性鯉魚的生長速度比雄性鯉魚的生長速度快，因此養(yǎng)殖全雌的鯉魚將縮短養(yǎng)殖周期，節(jié)約成本，具有明顯的經(jīng)濟效益。
具體實施例方式實施例1
一種雌性鯉魚性逆轉(zhuǎn)為雄性鯉魚的培育方法，其步驟是
A、將開口攝食1-3天后的鯉魚幼苗按常規(guī)方法在池塘中養(yǎng)殖10-11個月；(黃河鯉安全高效健康養(yǎng)殖模式，科學(xué)養(yǎng)魚，2010，11 42)
B、將10-11月齡鯉魚從池塘中取出，暫養(yǎng)在室外水泥池(長X寬X水深 =3. 5mX2. 3mXl. 5m)中，逐條輕輕擠壓鯉魚腹部，將具有精液流出的雄性鯉魚與沒有精液流出的鯉魚分開；C、將銅質(zhì)挖卵器(挖卵器柄長10cm，前端具有長1.5cm,寬0. 3cm的凹槽)輕輕插入不能擠出精液的鯉魚生殖孔中，然后偏向左側(cè)或右側(cè)，旋轉(zhuǎn)3-5圈抽出，如果可以得到少量卵粒，就將該雌魚挑選出，作為性逆轉(zhuǎn)處理的對象；
D、將挑選出的準(zhǔn)備用于性逆轉(zhuǎn)處理的鯉魚養(yǎng)殖在室外水泥池(長X寬X水深 =3. 5mX 2. 3mX 1. 5m)中1個星期后開始實驗。養(yǎng)殖密度為每口水泥池不超過20條魚；
E、在每天上午8點、中午12點和下午4點，按照鯉魚體重的5%-7%投喂三次含有17 α -甲基睪酮(17 α -Methyltestosterone, MT) 50ugMT/g的鯉魚飼料(武漢正大有限公司產(chǎn)品)。同時，分別根據(jù)每條鯉魚體重，每隔5天在鯉魚胸腔混合注射地歐酮 (Domperidone，DOM) 2mg/kg 禾口促黃體素釋放激素 A2 (Luteinizing Hormone Releasing Hormone A2, LHRH-A2) 5 μ g/kg,以及鯉魚垂體 2mg/kg ；
F、按步驟E連續(xù)處理試驗鯉魚2個月后，輕輕擠壓鯉魚腹部，有乳白色精液流出的試驗魚就是遺傳型為雌性，而生理上是雄性的性逆轉(zhuǎn)鯉魚。 實施例2:
這種性逆轉(zhuǎn)的鯉魚在培育子代全部為雌性的鯉魚中的應(yīng)用其過程是按照常規(guī)方法對普通雌性鯉魚進行人工催產(chǎn)(汪學(xué)杰胡隱昌牟希東羅建仁，優(yōu)質(zhì)錦鯉的繁殖和培育技術(shù)，水產(chǎn)科技情報，2008，35 (5) 241-244.)，將普通鯉魚產(chǎn)生的卵子與性逆轉(zhuǎn)的鯉魚產(chǎn)生的精液雜交，就可以大量生產(chǎn)后代全部為雌性的鯉魚用于水產(chǎn)養(yǎng)殖。
權(quán)利要求
1. 一種雌性鯉魚性逆轉(zhuǎn)為雄性鯉魚的培育方法，其步驟是A、將開口攝食1-3天后的鯉魚幼苗按常規(guī)方法在池塘中養(yǎng)殖10-11個月；B、將10-11月齡鯉魚從池塘中取出，暫養(yǎng)在室外水泥池中，逐條擠壓鯉魚腹部，將精液流出的雄性鯉魚與沒有精液流出的鯉魚分開；C、將銅質(zhì)挖卵器插入不能擠出精液的鯉魚生殖孔中，然后偏向左側(cè)或右側(cè)，旋轉(zhuǎn)3-5 圈抽出，得到卵粒，就將該雌魚挑選出，為性逆轉(zhuǎn)處理的對象；D、將挑選出的準(zhǔn)備用于性逆轉(zhuǎn)處理的鯉魚養(yǎng)殖在室外水泥池中，養(yǎng)殖密度為每口水泥池不超過20條魚；E、在每天上午8點、中午12點和下午4點，按照鯉魚體重的5%-7%投喂三次含有 17 α-甲基睪酮50ugMT/g的鯉魚飼料，同時，分別根據(jù)每條鯉魚體重，每隔5天在鯉魚胸腔混合注射地歐酮ang/kg和促黃體素釋放激素A2 5 μ g/kg，以及鯉魚垂體ang/kg ；F、按步驟E連續(xù)處理試驗鯉魚2個月后，擠壓鯉魚腹部，有乳白色精液流出的試驗魚就是遺傳型為雌性，而生理上是雄性的性逆轉(zhuǎn)鯉魚。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種將雌性鯉魚性逆轉(zhuǎn)為雄性鯉魚的培育方法，其步驟A、擠壓10-11月齡鯉魚腹部，將精液流出的雄性鯉魚與沒有精液流出的鯉魚分開；B、將銅質(zhì)挖卵器插入不能擠出精液的鯉魚生殖孔，挑選可以得到卵粒的鯉魚養(yǎng)殖在水泥池中；C、根據(jù)鯉魚體重，每天投喂含有17α-甲基睪酮的飼料，每5天在鯉魚胸腔混合注射地歐酮、促黃體素釋放激素和鯉魚垂體；D、連續(xù)處理試驗鯉魚2個月后，擠壓鯉魚腹部，有乳白色精液流出的試驗魚就是遺傳型為雌性，而生理上是雄性的性逆轉(zhuǎn)鯉魚。方法易行，操作簡便，直接將遺傳型為雌性的鯉魚性逆轉(zhuǎn)為生理雄性的鯉魚。該性逆轉(zhuǎn)的鯉魚與普通鯉魚雜交的子代生長速度快，具有明顯的經(jīng)濟效益。
文檔編號A23K1/18GK102283149SQ201110186519
公開日2011年12月21日 申請日期2011年7月5日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月5日
發(fā)明者朱作言, 湯斌, 汪亞平, 胡煒 申請人:中國科學(xué)院水生生物研究所