專利名稱：一種西洋參復(fù)合底肥的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物用肥料，具體地說，涉及一種西洋參復(fù)合底肥。
背景技術(shù)：
西洋參Panax quinquefolium L，又名花旗參，五加科人參屬多年生草本藥用植物。西洋參屬于宿根植物，生長過程中消耗大量土壤營養(yǎng)，并且種植參后病原微生物增多， 根系菌群發(fā)生變化，以及自身分泌物的影響導(dǎo)致了西洋參忌重茬、忌連作?；谝陨显颍?現(xiàn)在的西洋參栽培仍沿用伐林栽參和新農(nóng)田栽參的原始生產(chǎn)方式。對于西洋參或人參等藥用植物產(chǎn)地可持續(xù)利用的研究，國內(nèi)外從上個世紀(jì)五、六十年代開始就做了大量細(xì)致的工作，初步探明了連作障礙的主要原因1、土壤中病原微生物增多。官澤洋一和小林考平(1967)報(bào)道人參忌連作的原因是根腐病致病菌增多；邢云章等(198 報(bào)道銹腐病病菌對人參的致病力較強(qiáng)。2、土壤理化性狀發(fā)生了變化，如營養(yǎng)不足，營養(yǎng)元素比例失調(diào)，土壤比重、容重增大，空隙度變小，物理性粘粒增多，土壤吸收性能降低，PH值偏酸等。張辰露Q005)觀察了 1-4年不同連作年限地塊丹參生長發(fā)育情況，發(fā)現(xiàn)連作嚴(yán)重危害丹參生長，同時土壤PH降低，推測丹參連作障礙可能與土壤酸度增加有關(guān)。王韻秋等(1979)指出，同新林地相比，老參地的比重、容重更大，總孔隙度減小，并隨栽參年限的增長物理粘粒有增多的趨勢；賈書剛等(199 報(bào)道栽參后土壤有機(jī)質(zhì)含量、養(yǎng)分含量降低，鹽基飽和度、pH值、交換性鉀、鈣下降，而交換性氫、鋁上升，并指出土壤酸化問題是老參地改良利用的關(guān)鍵。3、土壤微生物群系發(fā)生改變，有害微生物增多，有益微生物減少。李世昌等(1982) 報(bào)道，土壤栽參后引起的生態(tài)環(huán)境的改變不利于細(xì)菌和放線菌的生長，有利于真菌和線蟲的增長，致使土壤微生物對人參根腐病菌的拮抗作用降低；張夢昌等(1990)還提出，老參地不僅微生物下降，生理類群活性也明顯下降，土壤中以青霉菌和曲霉菌為主，木霉很少。4、植物化感作用，Rice (1984)將“植物分泌物對環(huán)境中其他植物和微生物產(chǎn)生有利或不利作用”定義為化感作用。由于藥用植物含有豐富的次生物質(zhì)，往往具有較強(qiáng)的化感作用，其中有些會對植物自身產(chǎn)生自毒作用?；形镔|(zhì)通過揮發(fā)、淋溶、直接分泌和植株降解進(jìn)入土壤，并在土壤中積累，對生長環(huán)境中的其他物質(zhì)或者自身以及土壤中微生物種群產(chǎn)生了較強(qiáng)的生物活性，進(jìn)而影響后茬作物的生長。針對藥用植物忌重茬、忌連作的原因國內(nèi)外開展了一系列的產(chǎn)地改造、再利用的研究，并取得了一定的成績。曹志強(qiáng)等O005)用溴甲烷等殺菌劑處理老參地土壤，并施加土壤改良菌劑、復(fù)合微生物菌劑等作為補(bǔ)充，在改良的老參地移栽人參取得了較好的效果。 郭春景等Q004)采用生物有機(jī)肥、抗重茬劑(生物制劑)對老參地進(jìn)行處理，可以改善土壤的營養(yǎng)條件和微生物構(gòu)成。李剛等O004)利用EM處理老參地，結(jié)果表明能顯著提高土壤多酚氧化酶、過氧化酶、過氧化物酶的活性，最終表現(xiàn)為對老參地改良有促進(jìn)作用。國外報(bào)道稱在土壤中添加氮、磷、鉀和其他微量元素對西洋參的生長是有益的，可以改善參地土壤環(huán)境。馮家等利用腐熟的作物秸稈和滅菌劑處理老參地，進(jìn)行老參地栽參試驗(yàn)取得了較好的效果。目前世界上比較成功的可持續(xù)農(nóng)業(yè)技術(shù)體系包括作物多樣化，作物輪作，病蟲害綜合治理，養(yǎng)分管理，水土保持等。已有研究表明可以對藥用植物產(chǎn)地進(jìn)行改造以達(dá)到可持續(xù)利用的目的，但現(xiàn)有的研究多針對某一因素進(jìn)行單一處理或少量綜合處理，而連作造成藥用植物產(chǎn)地環(huán)境惡化， 通常是由多個因素引起的，而非某個因素單獨(dú)作用的結(jié)果。如養(yǎng)分脅迫對植物造成生理傷害，導(dǎo)致植物生理代謝的異變和根系原生質(zhì)膜透性的增加，從而促進(jìn)了分泌物的大量分泌。 這些根系分泌物的大量增加又可能引起植物的自毒作用，同時改變土壤微生物群落結(jié)構(gòu)及土壤PH值，引起土壤物理化學(xué)性質(zhì)的改變。對人參連作障礙的綜合分析表明，土壤病害占 35 %，線蟲病害占16 %，營養(yǎng)缺乏占12 %，土壤酸化占7 %，土壤物理性狀變壞占5 %，鹽分積累占5%，其他占2%，不明原因占18% (黃泰康，1993)。因此，單一處理的產(chǎn)地改造并未達(dá)到最理想的目標(biāo)，且有些處理還帶來了一些負(fù)面作用，如在土壤滅菌時把有益菌也殺死。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在填補(bǔ)傳統(tǒng)肥料的不足，針對西洋參連作障礙中的關(guān)鍵問題，提供微生物平衡和補(bǔ)充肥力的方法，根據(jù)以菌治菌的原理選擇了不同功效的優(yōu)良菌種組合，對照參田中的肥力缺失情況補(bǔ)充氮、磷、鉀等大量元素和硒、鍺等微量元素，進(jìn)而提供一種微生物、 大量元素、微量元素復(fù)合的底肥粉劑，開發(fā)出具有抗西洋參連作障礙功能的復(fù)合底肥。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明的一種西洋參復(fù)合底肥，其含有以下重量份的原料N P K重量比為2 3 4的復(fù)合肥30-35份、草炭40-50份、釀酒酵母菌 (Saccharomyces cerevisiae) ^Ll 1-4^^(1 ' (Lactobacillus acidophilus)齊[J 1—4 份、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)劑 2 份、長雙歧桿菌(Bifidobacterium longum) 劑1份、綠色木霉菌(Trichoderma viride)劑3份、亞硒酸鈉0. 6份和氧化鍺0. 4份。前述的復(fù)合底肥，其中所述N P K重量比為2 3 4的復(fù)合肥是用尿素、過磷酸鈣和氯化鉀配制得到的。前述的復(fù)合底肥，其中所述草炭的有機(jī)質(zhì)含量在60%以上，所述釀酒酵母菌劑、嗜酸乳酸菌劑、枯草芽孢桿菌劑、長雙歧桿菌劑和綠色木霉菌劑的活菌數(shù)分別> 107CFU/g。本發(fā)明還提供上述西洋參復(fù)合底肥的制備方法，包括以下步驟1)將釀酒酵母菌劑、嗜酸乳酸菌劑、枯草芽孢桿菌劑、長雙歧桿菌劑和綠色木霉菌劑按44213的重量比混勻；2)將1)得到的混合菌劑與草炭按7 25的重量比混勻，在30°C烘干，得到復(fù)合菌劑；3)將亞硒酸鈉、氧化鍺和N P K重量比為2 3 4的復(fù)合肥按 0.6 0.4 35的重量比混勻，得到混合肥料；4)將2)中得到的復(fù)合菌劑和3)中得到的混合肥料按16 9的重量比混均，粉碎后過20目篩，即得復(fù)合底肥成品。前述的制備方法，其中所述釀酒酵母菌劑的制備方法為1)斜面培養(yǎng)挑取釀酒酵母菌體接種于新鮮的斜面上，于培養(yǎng)Mh ；2)三角瓶搖床培養(yǎng)將1)中培養(yǎng)好的菌體接入三角瓶液體培養(yǎng)基中J8°C， 200rpm 振蕩培養(yǎng) 15_20h ；
3)發(fā)酵培養(yǎng)將幻中得到的菌液按2 3v/v%的接種量接入發(fā)酵液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，于培養(yǎng)Mh，發(fā)酵通氣率為0. 1 1 ；4)菌體分離及菌劑制備對3)中得到的發(fā)酵液進(jìn)行離心，將離心得到的菌體用水洗滌2 3次，最后得到活菌數(shù)> 107CFU/g的菌劑；其中，1)中斜面培養(yǎng)使用10°麥芽汁固體斜面，pH 5.0 ；2)中所述三角瓶液體培養(yǎng)基為10°麥芽汁，PH5.0或葡萄糖10%、玉米漿和尿素0. 2%，pH5.0;3)中所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基為葡萄糖10%、玉米漿和硫酸銨0. 4%,pH 5. 5。前述的制備方法，其中所述嗜酸乳酸菌劑的制備方法為1)活化培養(yǎng)將保存于_20°C甘油中的嗜酸乳酸菌接種于活化培養(yǎng)基斜面上，放入干燥器中，除氧，于37°C培養(yǎng)2d后轉(zhuǎn)接于三角瓶液體活化培養(yǎng)基中，于37°C培養(yǎng)30h ；2)發(fā)酵培養(yǎng)將1)中得到的菌液按10v/v%的接種量接入發(fā)酵液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，通入氮?dú)馐谷苎蹙S持在0，于37°C培養(yǎng)M小時，得到活菌數(shù)> 107CFU/g的菌劑；其中，1)中所述活化培養(yǎng)基為10g/L蛋白胨、10g/L牛肉膏、5g/L酵母提取物、2g/ L K2HPO4,2g/L 檸檬酸二銨、5g/L 乙酸鈉、lmL/L 吐溫 80,0. 58g/L MgSO4 · 7H20 和 0. 25g/L MnSO4 · 4H20 ；2)中所述發(fā)酵培養(yǎng)基為10g/L蛋白胨、10g/L牛肉膏、5g/L酵母提取物、2g/ L K2HP04、2g/L 檸檬酸二銨、5g/L 乙酸鈉、lmL/L 吐溫 80,0. 58g/LMgS04 · 7H 20、0· 25g/L MnSO4 · 4H20 和 20g/L 葡萄糖，pH 6· 3。前述的制備方法，其中所述枯草芽孢桿菌劑的制備方法為1)斜面培養(yǎng)挑取枯草芽孢桿菌體接種于新鮮的斜面上，于37°C培養(yǎng)Mh ；2)活化培養(yǎng)將1)中培養(yǎng)好的菌體接入三角瓶液體活化培養(yǎng)基中，37°C，180r/ min振蕩培養(yǎng)20h ；3)發(fā)酵培養(yǎng)將幻中得到的菌液轉(zhuǎn)接入發(fā)酵液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，于38°C培養(yǎng) 24小時，得到活菌數(shù)> 107CFU/g的菌劑；其中，1)和2)中使用的培養(yǎng)基為蛋白胨2g/L、酵母膏0.3g/L和葡萄糖，pH 7.2; 3)中所述發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖3g/L、酵母膏l(xiāng)g/L、蛋白胨lg/L、CaS04lg/L和MgCl22g/L。前述的制備方法，其中所述長雙歧桿菌劑的制備方法為1)活化培養(yǎng)將長雙歧桿菌按5v/v%的接種量接入PTYG培養(yǎng)基中，于37°C厭氧培養(yǎng)36h ；2)發(fā)酵培養(yǎng)將1)中活化后的菌種按3v/v%的接種量接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，控制 PH值為6. 8，于40°C厭氧培養(yǎng)32小時，得到活菌數(shù)彡107CFU/g的菌劑；其中，1)中所述PTYG培養(yǎng)基為葡萄糖10g、酵母提取物10g、大豆蛋白胨5g、胰蛋白胨5g、0. lw/v%刃天青溶液lmL、吐溫-801mL、L-半胱氨酸鹽酸0. 15g，蒸餾水1000mL，pH 6. 8 7. 0 ；2)中所述發(fā)酵培養(yǎng)基為番茄汁80mL/L、低聚果糖15g/L、廢糖蜜20mL/L及玉米漿 110mL/L,以水配制。其中，番茄汁為番茄榨汁后得到，玉米漿為鮮玉米粒榨汁后得到，低聚果糖和廢糖蜜為市售商品。前述的制備方法，其中所述綠色木霉菌劑的制備方法為1)斜面培養(yǎng)挑取綠色木霉菌體接種于新鮮的斜面上，于37°C培養(yǎng)Mh ；
2)三角瓶搖床培養(yǎng)將1)中培養(yǎng)好的菌體接入三角瓶液體培養(yǎng)基中，37°C振蕩培養(yǎng) 24h ；3)發(fā)酵培養(yǎng)將2~)中得到的菌液轉(zhuǎn)接入發(fā)酵液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，37°C，培養(yǎng) 48小時，得到活菌數(shù)> 107CFU/g的菌劑；其中，1)和2)中使用的培養(yǎng)基為土豆淀粉200g/L和葡萄糖20g/L ；3)中所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基為糠皮 30%、秸稈粉 70%、KH2PO4O. 5%, (NH4)2SO4O. 5%和 CaCl2O. 2%。本發(fā)明進(jìn)一步提供上述西洋參復(fù)合底肥在種植西洋參中的應(yīng)用，其是將所述復(fù)合底肥按4-6g/m2的量施用于西洋參種植田中。本發(fā)明由多種微生物、大量營養(yǎng)元素和微量營養(yǎng)元素復(fù)配而成的抗西洋連作障礙底肥，具有“抗病”和“培肥”和雙重效果，其中生防型微生物可以抑制有害細(xì)菌的滋生，營養(yǎng)型微生物為西洋參提供良好的土壤環(huán)境，大量營養(yǎng)元素補(bǔ)充了老參地的營養(yǎng)虧缺，微量元素提供西洋參生長必須的硒和鍺。本發(fā)明通過田間試驗(yàn)表明，可明顯改善老參地種植西洋參的生長狀況，減少病害發(fā)生，提高西洋參產(chǎn)量。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1釀酒酵母菌劑的制備釀酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)購自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心，菌種編號ACCC 20040。1)斜面培養(yǎng)挑取釀酒酵母菌體接種于新鮮的斜面上，于培養(yǎng)Mh ；2)三角瓶搖床培養(yǎng)將1)中培養(yǎng)好的菌體接入三角瓶液體培養(yǎng)基中J8°C， 200rpm 振蕩培養(yǎng) 15_20h ；3)發(fā)酵培養(yǎng)將2~)中得到的菌液按2 3v/v%的接種量接入發(fā)酵液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，于培養(yǎng)Mh，發(fā)酵通氣率為0. 1 1 ；4)菌體分離及菌劑制備對3)中得到的發(fā)酵液進(jìn)行離心，將離心得到的菌體用水洗滌2 3次，最后得到活菌數(shù)> 107CFU/g的菌劑1 ；其中，1)中斜面培養(yǎng)使用10°麥芽汁固體斜面，pH 5.0 ；2)中所述三角瓶液體培養(yǎng)基為10°麥芽汁，PH5.0或葡萄糖10%、玉米漿和尿素0. 2%，pH5.0;3)中所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基為葡萄糖10%、玉米漿和硫酸銨0. 4%,pH 5. 5。實(shí)施例2嗜酸乳酸菌劑的制備嗜酸乳酸菌(LactcAacillus acidophilus)購自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心，菌種編號ACCC 10637。1)活化培養(yǎng)將保存于_20°C甘油中的嗜酸乳酸菌接種于活化培養(yǎng)基斜面上，放入干燥器中，用焦性沒食子酸及氫氧化鈉反應(yīng)去除氧氣后，于37°C培養(yǎng)2d后轉(zhuǎn)接于三角瓶液體活化培養(yǎng)基中，于37°C培養(yǎng)30h ；2)發(fā)酵培養(yǎng)將1)中得到的菌液按10v/v%的接種量接入發(fā)酵液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，通入氮?dú)馐谷苎蹙S持在0，于37°C培養(yǎng)M小時，得到活菌數(shù)> 107CFU/g的菌劑2 ；其中，1)中所述活化培養(yǎng)基為10g/L蛋白胨、10g/L牛肉膏、5g/L酵母提取物、2g/ L K2HPO4,2g/L 檸檬酸二銨、5g/L 乙酸鈉、lmL/L 吐溫 80,0. 58g/L MgSO4 · 7H20 和 0. 25g/LMnSO4 · 4H20 ；2)中所述發(fā)酵培養(yǎng)基為10g/L蛋白胨、10g/L牛肉膏、5g/L酵母提取物、2g/ L K2HP04、2g/L 檸檬酸二銨、5g/L 乙酸鈉、lmL/L 吐溫 80,0. 58g/LMgS04 · 7H 20、0· 25g/L MnSO4 · 4H20 和 20g/L 葡萄糖，pH 6· 3。實(shí)施例3枯草芽孢桿菌劑的制備枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)購自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心，菌種編號 ACCC 02973。1)斜面培養(yǎng)挑取枯草芽孢桿菌體接種于新鮮的斜面上，于37°C培養(yǎng)Mh ；2)活化培養(yǎng)將1)中培養(yǎng)好的菌體接入三角瓶液體活化培養(yǎng)基中，37°C，180r/ min振蕩培養(yǎng)20h ；3)發(fā)酵培養(yǎng)將幻中得到的菌液轉(zhuǎn)接入發(fā)酵液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，于38°C培養(yǎng) 24小時，得到活菌數(shù)> 107CFU/g的菌劑3 ；其中，1)和2)中使用的培養(yǎng)基為蛋白胨2g/L、酵母膏0.3g/L和葡萄糖，pH 7.2; 3)中所述發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖3g/L、酵母膏l(xiāng)g/L、蛋白胨lg/L、CaS04lg/L和MgCl22g/L。實(shí)施例4長雙歧桿菌劑的制備長雙歧桿菌(Bifidobacterium longum)購自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心， 菌種編號ACCC 00103。1)活化培養(yǎng)將長雙歧桿菌按5v/v%的接種量接入PTYG培養(yǎng)基中，于37°C厭氧培養(yǎng)36h ；2)發(fā)酵培養(yǎng)將1)中活化后的菌種按3v/v%的接種量接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，控制 PH值為6. 8，于40°C厭氧培養(yǎng)32小時，得到活菌數(shù)彡107CFU/g的菌劑4 ；其中，1)中所述PTYG培養(yǎng)基為葡萄糖10g、酵母提取物10g、大豆蛋白胨5g、胰蛋白胨5g、0. lw/v%刃天青溶液lmL、吐溫-801mL、L-半胱氨酸鹽酸0. 15g，蒸餾水1000mL，pH 6. 8 7. 0，113°C濕熱滅菌 30min ；2)中所述發(fā)酵培養(yǎng)基為番茄汁80mL/L、低聚果糖15g/L、廢糖蜜20mL/L及玉米漿 110mL/L,以水配制。其中，番茄汁為番茄榨汁后得到，玉米漿為鮮玉米粒榨汁后得到，低聚果糖和廢糖蜜為市售商品。實(shí)施例5釀酒酵母菌劑的制備綠色木霉菌(Trichoderma viride)購自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心，菌種編號 ACCC 30136。1)斜面培養(yǎng)挑取綠色木霉菌體接種于新鮮的斜面上，于37°C培養(yǎng)Mh ；2)三角瓶搖床培養(yǎng)將1)中培養(yǎng)好的菌體接入三角瓶液體培養(yǎng)基中，37°C振蕩培養(yǎng) 24h ；3)發(fā)酵培養(yǎng)將2~)中得到的菌液轉(zhuǎn)接入發(fā)酵液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，37°C，培養(yǎng) 48小時，得到活菌數(shù)> 107CFU/g的菌劑5 ；其中，1)和2)中使用的培養(yǎng)基為土豆淀粉200g/L和葡萄糖20g/L;3)中所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基為糠皮 30%、秸稈粉 70%、KH2PO4O. 5%, (NH4)2SO4O. 5%和 CaCl2O. 2%。實(shí)施例6菌劑復(fù)配將釀酒酵母菌劑、嗜酸乳酸菌劑、枯草芽孢桿菌劑、長雙歧桿菌劑和綠色木霉菌劑按4 4 2 1 3的重量比混勻。實(shí)施例7菌劑的載體吸附將實(shí)施例6中得到的混合菌劑與草炭按7 25的重量比混勻，在30°C烘干，得到復(fù)合菌劑。實(shí)施例8復(fù)合底肥的制備1)配置大量元素混合肥料將尿素過磷酸鈣氯化鉀按照N P K = 2 3 4的重量比混合后攪拌均勻，得到混合肥料1。2)添加微量元素將亞硒酸鈉和氧化鍺加入到上述混合肥料1中，亞硒酸鈉氧化鍺混合肥料1 的重量比為0.6 0.4 35，攪拌均勻后得到混合肥料2。3)復(fù)合底肥的配制將實(shí)施例7中得到的復(fù)合菌劑和上述混合肥料2按照重量比16 9的比例混合均勻，粉碎后過20目篩，得到復(fù)合底肥成品。實(shí)施例9復(fù)合底肥在西洋參種植中的應(yīng)用西洋參受到連作障礙的影響，往往病害嚴(yán)重，產(chǎn)量嚴(yán)重下降。在北京市懷柔區(qū)湯河口鎮(zhèn)的老參地開展了田間小區(qū)試驗(yàn)。土壤類型為褐土，試驗(yàn)設(shè)兩個處理1)CK為對照組 施用N P K復(fù)合肥(N P K重量比為2 3 4)與草炭按照重量比1 1配制的混合肥料；幻處理為添加復(fù)合底肥的，按5g/m2處理。西洋參選取2年齡的種苗，小區(qū)面積 10m2，各設(shè)置3個重復(fù)。兩種處理的老參地小區(qū)都先使用石灰消毒，移栽后按照西洋參的正常管理模式進(jìn)行栽培。結(jié)果如表1所示。表1復(fù)合底肥對西洋參生長和治病的影響
權(quán)利要求
1.一種西洋參復(fù)合底肥，其特征在于，其含有以下重量份的原料N P K重量比為 2:3: 4 的復(fù)合肥 30-35 份、草炭 40-50 份、釀酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae) 劑1-4份、嗜酸乳酸菌(Lactobacillus acidophilus)劑1-4份、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)劑2份、長雙歧桿菌(Bifidobacterium longum)劑1份、綠色木霉菌 (Trichoderma viride)劑3份、亞硒酸鈉0. 6份和氧化鍺0. 4份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合底肥，其特征在于，所述草炭的有機(jī)質(zhì)含量在60%以上， 所述釀酒酵母菌劑、嗜酸乳酸菌劑、枯草芽孢桿菌劑、長雙歧桿菌劑和綠色木霉菌劑的活菌數(shù)分別彡107CFU/g。
3.權(quán)利要求1或2所述復(fù)合底肥的制備方法，包括以下步驟1)將釀酒酵母菌劑、嗜酸乳酸菌劑、枯草芽孢桿菌劑、長雙歧桿菌劑和綠色木霉菌劑按 4:4:2:1:3的重量比混勻；2)將1)得到的混合菌劑與草炭按7 25的重量比混勻，在30°C烘干，得到復(fù)合菌劑；3)將亞硒酸鈉、氧化鍺和N P K重量比為2 3 4的復(fù)合肥按0.6 0. 4 35 的重量比混勻，得到混合肥料；4)將2)中得到的復(fù)合菌劑和幻中得到的混合肥料按16 9的重量比混均，粉碎后過 20目篩，即得復(fù)合底肥成品。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述N P K重量比為2 :3:4 的復(fù)合肥是用尿素、過磷酸鈣和氯化鉀配制得到的。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，所述釀酒酵母菌劑的制備方法為1)斜面培養(yǎng)挑取釀酒酵母菌體接種于新鮮的斜面上，于培養(yǎng)Mh；2)三角瓶搖床培養(yǎng)將1)中培養(yǎng)好的菌體接入三角瓶液體培養(yǎng)基中，28°C，200rpm振蕩培養(yǎng)15-20h ；3)發(fā)酵培養(yǎng)將2、中得到的菌液按2 3v/v%的接種量接入發(fā)酵液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，于培養(yǎng)Mh，發(fā)酵通氣率為0. 1 1 ；4)菌體分離及菌劑制備對3)中得到的發(fā)酵液進(jìn)行離心，將離心得到的菌體用水洗滌 2 3次，最后得到活菌數(shù)> 107CFU/g的菌劑；其中，1)中斜面培養(yǎng)使用10°麥芽汁固體斜面，pH 5.0；2)中所述三角瓶液體培養(yǎng)基為10°麥芽汁，pH5.0或葡萄糖10%、玉米漿和尿素0.2%，pH5.0 ;3)中所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基為葡萄糖10%、玉米漿和硫酸銨0. 4%,pH 5. 5。
6.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，所述嗜酸乳酸菌劑的制備方法為1)活化培養(yǎng)將保存于-20°C甘油中的嗜酸乳酸菌接種于活化培養(yǎng)基斜面上，放入干燥器中，除氧，于37°C培養(yǎng)2d后轉(zhuǎn)接于三角瓶液體活化培養(yǎng)基中，于37°C培養(yǎng)30h ；2)發(fā)酵培養(yǎng)將1)中得到的菌液按10v/v%的接種量接入發(fā)酵液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，通入氮?dú)馐谷苎蹙S持在0，于37°C培養(yǎng)M小時，得到活菌數(shù)> 107CFU/g的菌劑；其中，1)中所述活化培養(yǎng)基為10g/L蛋白胨、10g/L牛肉膏、5g/L酵母提取物、2g/ L K2HPO4,2g/L 檸檬酸二銨、5g/L 乙酸鈉、lmL/L 吐溫 80,0. 58g/L MgSO4 · 7H20 和 0. 25g/L MnSO4 · 4H20 ；2)中所述發(fā)酵培養(yǎng)基為10g/L蛋白胨、10g/L牛肉膏、5g/L酵母提取物、2g/L K2HPO4, 2g/L 檸檬酸二銨、5g/L 乙酸鈉、lmL/L 吐溫 80、0· 58g/LMgS04 ·7Η20、0· 25g/L MnSO4 ·4Η20 和 20g/L 葡萄糖，pH 6. 3。
7.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌劑的制備方法為1)斜面培養(yǎng)挑取枯草芽孢桿菌體接種于新鮮的斜面上，于37°C培養(yǎng)Mh；2)活化培養(yǎng)將1)中培養(yǎng)好的菌體接入三角瓶液體活化培養(yǎng)基中，37°C，180r/min振蕩培養(yǎng)20h ；3)發(fā)酵培養(yǎng)將幻中得到的菌液轉(zhuǎn)接入發(fā)酵液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，于38°C培養(yǎng)M 小時，得到活菌數(shù)> 107CFU/g的菌劑；其中，1)和2)中使用的培養(yǎng)基為蛋白胨2g/L、酵母膏0.3g/L和葡萄糖，pH 7. 2 ；3)中所述發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖3g/L、酵母膏l(xiāng)g/L、蛋白胨lg/L、CaS04lg/L和MgCl22g/L。
8.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，所述長雙歧桿菌劑的制備方法為1)活化培養(yǎng)將長雙歧桿菌按5v/v%的接種量接入PTYG培養(yǎng)基中，于37°C厭氧培養(yǎng)36h ；2)發(fā)酵培養(yǎng)將1)中活化后的菌種按3v/v%的接種量接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，控制pH值為6. 8，于40°C厭氧培養(yǎng)32小時，得到活菌數(shù)彡107CFU/g的菌劑；其中，1)中所述PTYG培養(yǎng)基為葡萄糖10g、酵母提取物10g、大豆蛋白胨5g、胰蛋白胨5g、0. lw/v%刃天青溶液lmL、吐溫_801mL、L-半胱氨酸鹽酸0. 15g，蒸餾水lOOOmL，pH 6. 8 7. 0 ；2)中所述發(fā)酵培養(yǎng)基為番茄汁80mL/L、低聚果糖15g/L、廢糖蜜20mL/L及玉米漿 110mL/L。
9.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，所述綠色木霉菌劑的制備方法為1)斜面培養(yǎng)挑取綠色木霉菌體接種于新鮮的斜面上，于37°C培養(yǎng)Mh；2)三角瓶搖床培養(yǎng)將1)中培養(yǎng)好的菌體接入三角瓶液體培養(yǎng)基中，37°C振蕩培養(yǎng)24h ；3)發(fā)酵培養(yǎng)將幻中得到的菌液轉(zhuǎn)接入發(fā)酵液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，37°C，培養(yǎng)48小時，得到活菌數(shù)> 107CFU/g的菌劑；其中，1)和幻中使用的培養(yǎng)基為土豆淀粉200g/L和葡萄糖20g/L;:3)中所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基為糠皮 30%、禾吉稈粉 70%, KH2PO4O. 5%, (NH4)2SO4O. 5%和 CaCl2O. 2%。
10.權(quán)利要求1或2所述的復(fù)合底肥在種植西洋參中的應(yīng)用，其是將所述復(fù)合底肥按 4-6g/m2的量施用于西洋參種植田中。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種西洋參復(fù)合底肥，其含有以下重量份的原料N∶P∶K重量比為2∶3∶4的復(fù)合肥30-35份、草炭40-50份、釀酒酵母菌劑4份、嗜酸乳酸菌劑1-4份、枯草芽孢桿菌劑2份、長雙歧桿菌劑1份、綠色木霉菌劑3份、亞硒酸鈉0.6份和氧化鍺0.4份。本發(fā)明由多種微生物、大量營養(yǎng)元素和微量營養(yǎng)元素復(fù)配而成的抗西洋連作障礙底肥，具有“抗病”和“培肥”和雙重效果，其中生防型微生物可以抑制有害細(xì)菌的滋生，營養(yǎng)型微生物為西洋參提供良好的土壤環(huán)境，大量營養(yǎng)元素補(bǔ)充了老參地的營養(yǎng)虧缺，微量元素提供西洋參生長必須的硒和鍺。本發(fā)明通過田間試驗(yàn)表明，可明顯改善老參地種植西洋參的生長狀況，減少病害發(fā)生，提高西洋參產(chǎn)量。
文檔編號C05G3/00GK102173943SQ20111003927
公開日2011年9月7日 申請日期2011年2月16日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月16日
發(fā)明者平華, 潘立剛, 王紀(jì)華, 趙柳, 陸安祥, 韓平, 馬智宏 申請人:北京市農(nóng)林科學(xué)院