專(zhuān)利名稱(chēng)：一種顯微受精用移卵針的制備方法及其制備的移卵針的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種顯微受精用操作工具，尤其涉及一種顯微受精用移卵針的制備方法及其制備的移卵針。
背景技術(shù)：
在目前，顯微操作系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用于生物工程領(lǐng)域，而在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中制作出符合要求的顯微操作針對(duì)于實(shí)驗(yàn)的正確操作尤其重要。顯微操作工具尤其是移卵針的質(zhì)量是影響胚胎質(zhì)量的重要因素。選擇合適的移卵針，可將胚胎的損傷降到最低限度。避免對(duì)卵子造成損傷。因此，有必要提供一種簡(jiǎn)單易行且質(zhì)量穩(wěn)定的移卵針的制備方法，以制備耐用、高質(zhì)量的移卵針。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種顯微受精用移卵針的制備方法，其主要包含步驟1)將玻璃管在清潔液中浸泡，取出后用自來(lái)水反復(fù)沖洗；2)用Milli-Q水浸洗，放入烘箱，56°C 60°C烘干；3)將烘干的玻璃管在加熱燈上加熱，當(dāng)加熱部分顏色發(fā)紅并變得很柔軟后，移出火焰并向兩端牽拉，拉制成為φ200 300μπι的微管；4)將步驟3)制備的微管在合適的部位斷開(kāi)，并將斷口在加熱燈上燒平滑，制得所述移卵針。所述的方法，步驟1)所述玻璃管的直徑為0. 25 0. 35cm。所述清潔液含有重鉻酸鉀63g、濃硫酸1000ml、蒸餾水200ml。所述的方法，步驟1)中，將玻璃管在清潔液中浸泡M小時(shí)。本發(fā)明還提供根據(jù)上述方法制備的移卵針。其孔徑為φ200 300μπι。本發(fā)明提供的顯微受精用移卵針的制備方法簡(jiǎn)單、成本低且制備的該移卵針質(zhì)量穩(wěn)定。為讓本發(fā)明的上述和其它目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能更明顯易懂，下文特舉較佳實(shí)施例， 作詳細(xì)說(shuō)明如下。
具體實(shí)施例方式取直徑為0. 25 0. 35cm將玻璃管在清潔液中浸泡M小時(shí)，清潔液含有重鉻酸鉀 63g、濃硫酸1000ml、蒸餾水200ml，取出后用自來(lái)水反復(fù)沖洗；然后用Milli-Q水浸洗，放入烘箱，56°C 60°C烘干；烘干后，取出放入干凈的錐形瓶中，用錫箔紙蓋上，避免落入灰塵。將烘干的玻璃管在加熱燈上加熱，當(dāng)加熱部分顏色發(fā)紅并變得很柔軟后，移出火焰并迅速向兩端牽拉，拉制成為φ200 300μπι的微管。根據(jù)實(shí)際操作的需要，將制備的微管在合適的部位斷開(kāi)，并將斷口在加熱燈上燒平滑，管口光滑平整以減輕插入輸卵管時(shí)對(duì)輸卵管的損傷，同時(shí)必須注意移卵管頭在火焰上時(shí)間不可太長(zhǎng)，防止融化堵塞。管口要平且鈍化。根據(jù)上述方法制備的顯微受精用移卵針，其孔徑為φ200 300μπι。在顯微注射前，可以應(yīng)用移卵針移動(dòng)卵母細(xì)胞，將5-10枚卵母細(xì)胞移入操作液滴中，然后用注射針抓取一個(gè)精子放入液滴中，用針尖在精子尾部迅速劃過(guò)進(jìn)行制動(dòng)，隨后從尾部吸入注射針內(nèi)。在用移卵針將注射后受精卵轉(zhuǎn)移到假孕母體內(nèi)時(shí)，從孵箱中取出受精卵，用移卵針吸出受精卵并用Μ2溶液洗滌2-3次，調(diào)整實(shí)驗(yàn)用量，將其置于凹玻片的Μ2溶液中，調(diào)焦使在低倍鏡下清楚地看到受精卵的輪廓，并且保證受精卵有足夠空間自由移動(dòng)，用持卵器將卵匯聚到一起，移卵時(shí)注意不要將氣泡移入，影響操作視野。在對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行冷凍處理時(shí)，也可以應(yīng)用本發(fā)明的移卵針來(lái)移動(dòng)卵母細(xì)胞用吸管按順序吸入0. 5mol蔗糖溶液(5. 5cm)—空氣(1. 5cm)—玻璃化溶液(0. 5cm)—空氣 (0. 5cm)—玻璃化溶液(1.5cm)，平行放置于操作臺(tái)上，將卵母細(xì)胞用移卵針移入玻璃化溶液中洗一次，然后將10枚卵母細(xì)胞置于細(xì)管中的玻璃化溶液中，卵母細(xì)胞導(dǎo)入后依次再吸入空氣(0. 5cm)—玻璃化溶液(0. 5cm)—空氣(0. 5cm)，最后吸0. 5mol蔗糖溶液(Icm)。用封口機(jī)將塑料細(xì)管封口。將含有卵母細(xì)胞的細(xì)管一端直接投入液氮，另一半用液氮?dú)庋衾鋬?，待蔗糖部分凍結(jié)后轉(zhuǎn)入液氮罐中長(zhǎng)期保存。應(yīng)用該移卵針時(shí)，還能插入輸卵管壺腹部靠進(jìn)傘部開(kāi)口的彎曲部位，吹入含有胚胎的操作液，大幅縮短了操作周期，且對(duì)輸卵管的損傷小。本發(fā)明提供的顯微受精用移卵針的制備方法簡(jiǎn)單、成本低且制備的該移卵針質(zhì)量穩(wěn)定。雖然本發(fā)明已以較佳實(shí)施例披露如上，然其并非用以限定本發(fā)明，任何所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，當(dāng)可作些許的更動(dòng)與改進(jìn)，因此本發(fā)明的保護(hù)范圍當(dāng)視權(quán)利要求所界定者為準(zhǔn)。
權(quán)利要求
1.一種顯微受精用移卵針的制備方法，其特征在于，包含步驟1)將玻璃管在清潔液中浸泡，取出后用自來(lái)水反復(fù)沖洗；2)用Milli-Q水浸洗，放入烘箱，56°C 60°C烘干；3)將烘干的玻璃管在加熱燈上加熱，當(dāng)加熱部分顏色發(fā)紅并變得很柔軟后，移出火焰并向兩端牽拉，拉制成為φ200 300μπι的微管；4)將步驟3)制備的微管在合適的部位斷開(kāi)，并將斷口在加熱燈上燒平滑，制得所述移卵針。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)所述玻璃管的直徑為0.25 0. 35cm0
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)所述清潔液含有重鉻酸鉀63g、濃硫酸1000ml、蒸餾水200ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)所述玻璃管在清潔液中浸泡M小時(shí)。
5.權(quán)利要求1所述的方法制備的顯微受精用移卵針。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的移卵針，其特征在于，其孔徑為φ200 300μπι。
全文摘要
本發(fā)明提供一種顯微受精用移卵針的制備方法及其制備的移卵針。其方法主要包含步驟將玻璃管在清潔液中浸泡，取出后用自來(lái)水反復(fù)沖洗；用Milli-Q水浸洗，放入烘箱，56℃～60℃烘干；將烘干的玻璃管在加熱燈上加熱，當(dāng)加熱部分顏色發(fā)紅并變得很柔軟后，移出火焰并向兩端牽拉，拉制成為孔徑的微管；將制備的微管在合適的部位斷開(kāi)，并將斷口在加熱燈上燒平滑，制得所述顯微受精用移卵針。根據(jù)上述的方法制備的移卵針，其孔徑為本發(fā)明提供的顯微受精用移卵針的制備方法簡(jiǎn)單、成本低且制備的該移卵針質(zhì)量穩(wěn)定。
文檔編號(hào)A61D19/02GK102451047SQ20101051810
公開(kāi)日2012年5月16日 申請(qǐng)日期2010年10月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月25日
發(fā)明者陳浩杰 申請(qǐng)人:陳浩杰