專利名稱：一種耐熱紫花苜蓿的培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種耐熱紫花苜蓿的培育方法。
背景技術(shù)：
苜蓿因其高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、利用年限長、根系發(fā)達(dá)，可改良土壤結(jié)構(gòu)，增加土 壤肥力，被譽(yù)為"牧草之王"。在我國，隨著農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)和畜牧業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整， 節(jié)糧型畜牧業(yè)，特別是草食動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)，呈現(xiàn)良好的發(fā)展態(tài)勢(shì)，因?yàn)檐俎Ｔ谔?高奶牛、肉羊的單產(chǎn)中發(fā)揮決定性的作用，己成為我國"三元"種植結(jié)構(gòu)調(diào)整
的首選詞料作物，苜蓿產(chǎn)業(yè)作為新興的朝陽產(chǎn)業(yè)，存在著廣闊的發(fā)展空間。
優(yōu)良品種是獲得高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)苜蓿的內(nèi)在原因，也是產(chǎn)業(yè)化的基礎(chǔ)，但目前我 國優(yōu)良苜蓿品種較少，加之原種數(shù)量少，良種產(chǎn)量低，遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了生產(chǎn)和生 態(tài)建設(shè)的需求。同時(shí)，由于夏季高溫的原因?qū)е伦匣ㄜ俎Ｔ谖覈戏诫y以種植， 南方的苜蓿干草基本是從北方調(diào)運(yùn)，運(yùn)輸成本極高，既提高了詞養(yǎng)成本，而且 質(zhì)量難以保證，極大阻礙了南方草食畜禽的發(fā)展。
正是在該背景下，本發(fā)明提出一種耐熱紫花苜蓿的培育方法，旨在培育適 合南方種植的耐熱紫花苜蓿新品種，推動(dòng)南方紫花苜蓿苜蓿產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，增加 優(yōu)質(zhì)飼草的供應(yīng)，促進(jìn)我國草食動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，增進(jìn)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)發(fā)展和農(nóng)民 收入。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種耐熱紫花苜蓿的培育方法，以獲得適合南方種 植的耐熱紫花苜蓿新品種。
耐熱紫花苜蓿的培育方法，其特征在于包括以下步驟
1) 取主栽紫花苜蓿品種的子葉為外植體，接種至誘導(dǎo)培養(yǎng)基，于25士rc下
誘導(dǎo)愈傷組織；
2) 選取誘導(dǎo)形成1周的愈傷組織，轉(zhuǎn)移至添加1%(1-胡蘿卜素的誘導(dǎo)培養(yǎng)基， 培養(yǎng)至愈傷組織進(jìn)入快速增殖期；
3) 挑取新增生的愈傷組織，置于溫度35'C和光照3000Lux下篩選1周，爾 后移至繼代培養(yǎng)基，繼代培養(yǎng)2周，重新置于35'C和3000Lux下篩選l周；
4) 選取仍存活的愈傷組織，轉(zhuǎn)移至分化培養(yǎng)基，誘導(dǎo)分化成苗，單株編號(hào) 種植；
5) 摘取頂端的2張新生葉，測(cè)定葉黃素含量，保留葉黃素含量高于0.1%的 紫花苜蓿植株，進(jìn)行種子繁育；6)繼續(xù)種植步驟5)篩選的紫花苜蓿株系，室內(nèi)外評(píng)價(jià)驗(yàn)證葉黃素含量和 耐熱性的表達(dá)穩(wěn)定性，對(duì)穩(wěn)定的優(yōu)良株系進(jìn)行種子繁殖，培育能正常越夏的耐 熱紫花苜蓿。
上述的穩(wěn)定性是指入選紫花苜蓿的葉黃素含量和耐熱性可在不同年份間(2 年及以上)、季節(jié)間(2季及以上)以及地點(diǎn)間(2個(gè)地點(diǎn)及以上)表達(dá)一致， 特性不受年份、季節(jié)以及地點(diǎn)的顯著影響。
本發(fā)明中，所說的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基添加NAA5mg、 BA0.5mg、 蔗糖30g、瓊脂粉6.8g， pH滅菌前5.8。
本發(fā)明中，所說的繼代培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基添加NAA0.5mg、 BA2mg、 蔗糖30g、瓊脂粉6.8g， pH滅菌前5.8。
本發(fā)明中，所說的分化培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基添加KTlmg、蔗糖30g、 瓊脂粉6.8g ， pH滅菌前5.8。
本發(fā)明具有以下幾方面的有益效果
培育的耐熱紫花苜蓿新品種適合我國南方種植，推動(dòng)紫花苜蓿苜蓿在我國 南方的產(chǎn)業(yè)開發(fā)，增加優(yōu)質(zhì)飼草的供應(yīng)，促進(jìn)我國草食動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，尤 其有利于增進(jìn)南方丘陵山區(qū)的農(nóng)村經(jīng)濟(jì)發(fā)展和農(nóng)民收入。
具體實(shí)施例方式
以下通過具體實(shí)例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實(shí)施例1:
以紫花苜蓿品種"維多利亞"的子葉為外植體，接種至誘導(dǎo)培養(yǎng)基，于25土rc
下誘導(dǎo)形成愈傷組織，選擇誘導(dǎo)形成l周的愈傷組織，轉(zhuǎn)移至含添加1%01-胡蘿
卜素的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，培養(yǎng)至2周后愈傷組織進(jìn)入快速增殖期，挑取新增生的愈 傷組織，置于35。C和3000Lux下篩選l周，然后轉(zhuǎn)移至繼代培養(yǎng)基，繼代培養(yǎng) 2周，重新置于35'C和3000Lux下篩選l周，選擇存活的愈傷組織，轉(zhuǎn)移至分 化培養(yǎng)基，誘導(dǎo)分化成苗，單株編號(hào)種植幼苗976多株。摘取頂端的2張新生 葉，采用高效液相色譜法[色譜柱為C18柱(4.6mmxi50mm; 5pm)，流動(dòng)相為 乙腈-甲醇(95: 5);流速0.7mL/min，檢測(cè)波長446nm;柱溫室溫。結(jié)果葉 黃素在7.686~17.93pg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好]測(cè)定葉黃素含量，入選葉黃素含 量高于0.1%的紫花苜蓿植株5株，進(jìn)行種子繁育，經(jīng)室內(nèi)外模擬評(píng)價(jià)葉黃素含 量和耐熱性的表達(dá)穩(wěn)定性，獲得葉黃素含量0.13%和耐熱性穩(wěn)定的優(yōu)良紫花苜 蓿新材料HT-Alfal。種植培育出的HT-Alfal，可正常越夏，即盛夏炎熱季節(jié)葉 片保持綠色，能正常生長，可提供穩(wěn)定提供優(yōu)質(zhì)營養(yǎng)的飼料，而普通紫花苜蓿 材料由于不耐熱，休眠停滯生產(chǎn)，葉片枯黃。
權(quán)利要求
1. 一種耐熱紫花苜蓿的培育方法，其特征在于包括以下步驟1)取主栽紫花苜蓿品種的子葉為外植體，接種至誘導(dǎo)培養(yǎng)基，于25±1℃下誘導(dǎo)愈傷組織；2)選取誘導(dǎo)形成1周的愈傷組織，轉(zhuǎn)移至添加1％α-胡蘿卜素的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，培養(yǎng)至愈傷組織進(jìn)入快速增殖期；3)挑取新增生的愈傷組織，置于溫度35℃和光照3000Lux下篩選1周，爾后移至繼代培養(yǎng)基，繼代培養(yǎng)2周，重新置于35℃和3000Lux下篩選1周；4)選取仍存活的愈傷組織，轉(zhuǎn)移至分化培養(yǎng)基，誘導(dǎo)分化成苗，單株編號(hào)種植；5)摘取頂端的2張新生葉，測(cè)定葉黃素含量，保留葉黃素含量高于0.1％的紫花苜蓿植株，進(jìn)行種子繁育；6)繼續(xù)種植步驟5)篩選的紫花苜蓿株系，室內(nèi)外評(píng)價(jià)驗(yàn)證葉黃素含量和耐熱性的表達(dá)穩(wěn)定性，對(duì)穩(wěn)定的優(yōu)良株系進(jìn)行種子繁殖，培育能正常越夏的耐熱紫花苜蓿。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種耐熱紫花苜蓿的培育方法，其特征在于包括以下步驟取主栽紫花苜蓿品種的子葉為外植體，在25±1℃下誘導(dǎo)形成愈傷組織，選擇1周的愈傷組織轉(zhuǎn)移至含添加1％α-胡蘿卜素的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，培養(yǎng)至愈傷組織快速增殖期，挑取新增生的愈傷組織，置于高溫和強(qiáng)光下篩選2次，取存活的愈傷組織轉(zhuǎn)移至分化培養(yǎng)基分化成苗，按單株編號(hào)種植，摘取頂端的2張新生葉，測(cè)定并保留葉黃素含量高于0.1％的紫花苜蓿植株，進(jìn)行種子繁育，繼續(xù)種植室內(nèi)外評(píng)價(jià)驗(yàn)證葉黃素含量和耐熱性的表達(dá)穩(wěn)定性，對(duì)穩(wěn)定的優(yōu)良株系進(jìn)行種子繁殖，培育能正常越夏的耐熱紫花苜蓿。本發(fā)明的耐熱紫花苜蓿，適合在我國南方種植，增加優(yōu)質(zhì)飼草的供應(yīng)，促進(jìn)我國草食動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。
文檔編號(hào)A01H1/04GK101283673SQ20081006181
公開日2008年10月15日 申請(qǐng)日期2008年5月12日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月12日
發(fā)明者吳殿星, 王忠華, 舒小麗, 新 黃 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)