專利名稱：一種液體復合微生物肥及其制備方法
一種液體復合微生物肥及其制備方法駄領域本發(fā)明涉及一種液體復合微生物肥及其制備方法，屬于微生物肥料技術領域。 背景駄1891年貝杰林克首次完成了根瘤菌和固氮菌的純培養(yǎng)，開始了微生物肥料的生產(chǎn)與應用，1895 年商品化的根瘤菌接種劑面市(商品名為Nitrogen)。本世紀30 40年代，美國、澳大利亞和英國 等都有了接種劑生產(chǎn)企業(yè)，1930年美國根瘤菌接種劑的銷售額達到100萬美元。50年代以后世界上 70多個國家包括中國在內(nèi)，開始研究、生產(chǎn)和使用根瘤菌接種劑，并且面積不斷擴大。70年代國際 上開始對固氮菌、解磷細菌和解鉀細菌等有益微生物進行了一系列的研究工作，大量的田間試驗表 明，固氮菌、解磷細菌和解鉀細菌能夠增產(chǎn)和培月巴地力，并且有了一定面積的應用。我國是世界上 在農(nóng)業(yè)應用微生物最早的國家，古代人們就有在新辟田種植豆科植物時，施用老田(豆科植物田) 客土的嫩去。現(xiàn)代我國研究應用微生物肥料已有近50年的歷史，開始應用的^科植物根瘤菌擬中 劑，據(jù)統(tǒng)計1949-1955年間，全國應用花生根瘤菌的面積達1000萬畝，1956-1985年累計3425力' 畝。50年代，從蘇聯(lián)引進自生固氮菌、磷細菌和硅酸鹽細菌，1958年細菌肥料的應用曾列為《農(nóng)業(yè) 發(fā)展綱要》中的一項技術措施。60年代我國開展了 "5406"的廣泛研究和應用，取得了一定的效果。 70年代開始一些禾4^開單位進行了VA菌根、固氮菌、磷細菌和硅酸鹽細菌的研究。進入90年代，微生物肥料的研究與應用li^了又一個高潮。微生物肥料被定義為含有活微生物的特定制劑，現(xiàn)有的產(chǎn)品大多是單一功能的微生物肥料， 比如固氮菌、解磷菌劍軍鉀菌，其功能分別為固定空氣中的氮素、分解土壤中的難溶磷或分解土壤中的含鉀化合物。這些微生物單獨使用均能發(fā)揮各自作用，部分滿足作物^m、磷、鉀等營養(yǎng)元素的需求，使用上述微生物肥料還可生產(chǎn)綠色食品，保護環(huán)境，是一種環(huán)境友好型肥料。但其不足在于單獨使用上t類肥料只能解決植物所需營養(yǎng)的一個方面。研究人員也注意到了該問題，在微生物肥料生產(chǎn)中也研究、應用了不同的技術來生產(chǎn)復合微生物肥料，也就是將多個微生物菌種復合在一起。已有的中國專利文件CN1134408A(95104927. 5)， CN1191854 A (98100645. 0) ， CN1587218 A (200410052666.8) ， CN1600751A (200410050683.8) ， CN1654435A (200410065948.1)， CN1911870A (200610068499. 5)都是采用不同的微生物菌種，通過分別培養(yǎng)、發(fā)酵后，將產(chǎn)物按比 例組合而成復合微生物肥料，采用現(xiàn)有的工藝生產(chǎn)微生物肥料存在的主要問題是各菌種單獨發(fā)酵的 設備投資大、生產(chǎn)周期長，從而生產(chǎn)成本高，生產(chǎn)工藝較復雜。 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對現(xiàn)有技術的不足，掛共一種液體復合微生物肥及其制備方法。 本發(fā)明針對目前復合微生物肥料妒中存在的問題，采用混合發(fā)酵技術，并且復合了化學肥料， 在復合微生物爿戰(zhàn)斗發(fā)酵原料、微生物菌種和整體生產(chǎn)工藝上進行了改進。發(fā)明,本發(fā)明以枯草芽孢桿菌(Soc說usSMMfo)、巨大芽孢桿菌(fea7/us Megaten'ww)、硅酸鹽細菌(Soc,7toMo7《g/"0 tf)和涇陽鏈霉菌(5!fre;7to/^cay力'"g^"gm^ ) 4種微生物混合發(fā)酵并且復合了可溶性氮 磷鉀肥制得液體復合微生物肥料，該肥料可以用于所有的土壤類型和農(nóng)作物，在蔬菜、水果上應用 效果最佳，其能夠改善土壤結構、提高土壤保水保肥性能，具有較好增產(chǎn)和改善作物品質(zhì)的效果。 發(fā)明詳述一種液體復合微生物肥料，其特征在于，由以下原料混合而得，均為重量份10 20份四種微生物的混合發(fā)酵液，所述四種微生物的混合發(fā)酵液是由枯草芽 包桿菌，巨大芽孢桿菌，硅酸鹽細菌、涇陽鏈霉菌混合發(fā)酵而成的；40 90份水；10 20份可溶性氮磷鉀肥。其中枯草芽孢桿菌(&ci77"s5^^7^)，中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心菌種保藏號為枯 -3;巨大芽孢桿菌(few77"s Jfe辟te/7'鵬)，中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心菌種保藏號為 ACCC10011;硅酸鹽細菌(&ci"M Myc^s^"o iA ),中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心菌種保藏 號為ACCC10013;涇陽鏈霉菌(5"tr印to/^ces力';7g7朋ge/^ys )，中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中 心菌種保藏號為ACCC40021;上述菌種均可購自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心。優(yōu)選的，所述四種微生物的混合發(fā)酵液中活菌量分別為枯草芽孢桿菌50 70億 毫升—'、巨大 芽 包桿菌50 80億 毫升—'、硅酸鹽細菌30 50億 毫升—\涇陽鏈霉菌10 20億 毫升—'，混合 發(fā)酵液中四種菌種總的活菌量不低于150億'毫升—1。所述凈水符合生活飲用水標準。所述可溶性氮磷鉀肥中的氮肥、磷肥、鉀肥的重量比為(1 2) : (0.5 1) : (1 2); 所述可溶性氮磷鉀肥中，氮肥選自尿素、硫酸銨之一或組合，磷肥選自磷酸一銨、磷酸二銨 或組合，鉀肥選自氯化鉀、硫酸鉀之一或組合。 一種液體復合微生物肥料的制備方法，步驟如下 1.混合發(fā)酵液的制備(1) 將枯草芽 包桿菌、巨大芽孢桿菌、硅酸鹽細菌和涇陽鏈霉菌4種微生物菌種分別進行搖瓶 培養(yǎng)，得枯草芽孢桿菌菌液、巨大芽 包桿菌菌液、硅酸鹽細菌菌液和涇陽鏈霉菌菌液四種菌液，(2) 將步驟(1)的枯草芽孢桿菌菌液、巨大芽孢桿菌菌液各按3%的接種量進入種子罐混合 發(fā)酵培養(yǎng)，得發(fā)酵菌液I;(3) 將步驟(1)的硅酸鹽細菌菌液、涇陽鏈霉菌菌液各按3X的接種量aA種子罐后混合發(fā) 酵培養(yǎng)，得發(fā)酵菌液II;(4) 將步驟(2)的發(fā)酵菌液I和步驟(3)的發(fā)酵菌液11各按10% 20%的接種量進入發(fā)酵 罐，同時混合培養(yǎng)，培f^^3(TC，培養(yǎng)織180 200轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)通風l: 1 (v: v/min)，培養(yǎng) 時間48小時，檢菌，出罐得到混合發(fā)酵液；2. 將水按配比加入到上述的混合發(fā)M中，混和均勻，得混合發(fā)酔液的7K溶液；3. 將可溶性的氮肥、磷肥、鉀肥按重量比為(1 2) : (0.5 1) : (1 2)混合得可溶 性氮磷鉀肥，粉碎，過80目篩；4. 將步驟3的可溶性氮磷鉀肥與歩驟2的混合發(fā)酵液的水溶液按比例均勻混合，全部溶解后 即得液體復合微生物肥料。該產(chǎn)品可包裝檢測出廠。上述步驟l中(I)的搖瓶培養(yǎng)和(2)種子罐發(fā)酵培養(yǎng)的工藝條件可按本領i或現(xiàn)有技術。本發(fā) 明優(yōu)選如下條件(1) 搖瓶培養(yǎng)注入150ml培養(yǎng)基到50(M三角瓶中；用5ml無菌7K將斜面上菌種轉(zhuǎn)入相應 的搖瓶中，在28 3(TC、 200轉(zhuǎn)/分^f牛下培養(yǎng)24h。(2) 種子罐發(fā)酵培養(yǎng)溫度30。C、培養(yǎng)轉(zhuǎn)速180 200轉(zhuǎn)/分、培養(yǎng)通風l: 1 (v: v/min); 培養(yǎng)時間36小時，35小時檢菌。ttit的各類培養(yǎng)基如下，其中的百分比均為重量百分比 枯草芽 包桿菌、巨大芽 包桿菌種子罐發(fā)酵培養(yǎng)培養(yǎng)基硫^!安 0.2%葡萄糖 0.286%土豆淀粉 0.714%磷酸氫二鉀 0.030%氯化鈉 0.020%氯化鉀 0.020%硫MI美 0.080%硫酸錳 0.003%硫酸亞鐵 0.003%酵母粉 0.300%蒸餾水 98.00%硅酸鹽細菌、涇陽鏈霉菌種子罐發(fā)酵培養(yǎng) 培養(yǎng)基豆餅粉0.5%蔗糖0.5%酵母粉0.5%硫酸銨0.01%硫酸鎂0.08%磷隨二鉀0.1%氯化鈉0.01%碳酸轉(zhuǎn)0.1%硫酸亞鐵0. 001%蒸餾水98.2% 四種菌(混合)生產(chǎn)罐發(fā)酵培養(yǎng) 培養(yǎng)基淀粉 3%豆餅粉1%磷酸氫二鉀0.03%硫,0.1%硫酸鎂0.05%氯化鐵0.001。/0碳,丐0.01% 酵母粉 0.02% 蒸餾7K 95.柳本發(fā)明方法制備的發(fā)酵液中,活菌駄到150億 毫升—'以上其中巨大芽孢桿菌50 70億 毫 升—'、枯草芽孢桿菌50 80億.毫升—'、硅酸鹽細菌30 50億 毫升—'、徑陽鏈霉菌10~20億.毫升—'。本發(fā)明的液體復合微生物肥料，可以用于所有的土壤類型和農(nóng)作物，在蔬菜、水果上應用效果 最佳，其能夠改善土壤結構、提高土壤保7W呆肥性能，具有較好增產(chǎn)和改善作物品質(zhì)的效果。本發(fā)明的優(yōu)良皿如下入發(fā)明液體復合微生物肥料菌種混合連同發(fā)酵，生產(chǎn)設備少，成本低，易于實現(xiàn)； 么本發(fā)明將多種微生物的結合在一起，增強了微生物肥料的功效，顯著提高肥料的利用率，有 效防治環(huán)境污染；&本發(fā)明的肥料能夠顯著提高作物產(chǎn)量，改善農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)；4.本發(fā)明的肥料具有顯著改良土壤的作用，能夠提高土壤可持續(xù)利用能力。具M施力式下面結合實施例對本發(fā)明進一步描述,但不限于此。如無特殊說明，原料中的百分比均為重量百 分比。所述原料為市售產(chǎn)品，豆餅粉過80目篩，可溶性的氮肥、磷肥、鉀肥過80目篩。 ^!例1:四種微生物的混合發(fā)酵液的制備(1) 枯草魏贈液的歸培養(yǎng)基馬鈴薯(去皮、煮熟)200克蔗糖(白糖或葡萄糖)20克 蒸餾水 1000毫升pH 6. 0 6. 5劍旨 15 20克注入150ml培養(yǎng)基到500ml三角瓶中；用5ml無菌水將斜面上菌種轉(zhuǎn)入相應的搖瓶中，在28 3(TC、 200轉(zhuǎn)/分^#下培養(yǎng)2處。(2) g^^m液的歸培養(yǎng)基牛肉膏 5.0克蛋白胨 5.0克 氯化鈉 5. 0克pH 7. 2 7. 4蒸餾水 1000毫升瓊脂 15 18克注入150ml培養(yǎng)基到500ml三角瓶中；用5ml無菌水將斜面上菌種轉(zhuǎn)入相應的搖瓶中，在28 3(TC、 200轉(zhuǎn)/分^f牛下培養(yǎng)24h。(3) 枯草^F菌、歐魏蹄種子罐發(fā)酵培養(yǎng)培養(yǎng)基硫MI安 0.2%葡萄糖0. 286%土豆淀粉0. 714%磷酸氫二鉀0. 030%氯化鈉0. 020%氯化鉀0. 020%硫酸鎂0. 080%硫酸錳0. 003%硫酸亞鐵0. 003%酵母粉0. 300%蒸餾水98. 00%按枯草芽 包桿菌液、巨大芽孢桿菌液各為3%的接種量進入種子罐后混合發(fā)酵;溫度3(TC、 培養(yǎng),180 200轉(zhuǎn)/分、培養(yǎng)通風h 1 (v: v/min);培養(yǎng)時間36小時，35小時檢菌。10克 0.5克 0.2克 l克0. 005克 0.4克 廳毫升 7. 0 7. 2 15 18克 36h，轉(zhuǎn)速為200轉(zhuǎn)/分)5克0.8克O.l克0.8克 l克 O.l克 l克7. 0 7. 2注入150ml培養(yǎng)基到500ml三角瓶中；用5ml無菌7jC將斜面上菌種轉(zhuǎn)入相應的搖瓶中，在28 30°C、 200轉(zhuǎn)/分^f牛下培養(yǎng)36h。(5)涇陽^ir的^^基8蔗糖 K典 MgS(V 7H20 CaC03 FeCl3 酵母粉 蒸餾水 pH 劍旨搖瓶J^S (28 30°C,蔗糖酵母膏硫麟硫酸鎂 K2HP04 氯化鈉 碳酸轉(zhuǎn)可溶性淀粉20克跳1.0K異0.5克MgS(V 7H200.5克NaCl0.5克FeS04 '7恥0. 01克蒸餾水誦毫升pH7. 2 7. 4瓊脂15 18克注入150ml培養(yǎng)基到500ml三角瓶中；用5ml無菌水將斜面上菌種轉(zhuǎn)入相應的搖瓶中，在25 28"、 200轉(zhuǎn)/分劍牛下培養(yǎng)48h。(6) a^a^菌、涇陽^M^^B^ 培養(yǎng)基豆餅粉0.5%蓆糖0.5% 酵娜0.5% 硫酸銨0.01% 硫酸鎂0.08% 磷酸氫二鉀0.1% 氯化鈉0.01% 碳,丐0.1% 硫酸亞鐵0. 001% 蒸餾水98.2%按硅酸鹽細菌液、涇陽鏈霉菌液各為3%的接種量進入種子罐后混合發(fā)酵；溫度3(TC、培養(yǎng)轉(zhuǎn) 速190轉(zhuǎn)/分、培養(yǎng)通風l: 1 (v: v/min);培養(yǎng)時間36小時，35小時檢菌。(7) 四種菌(混合)培養(yǎng)基淀粉 3%豆餅粉1%磷酸氫二鉀0.03% 硫酸銨0.1% 硫酸鎂0.05% 氯化鐵0.001% 碳酸,丐0.01% 酵母粉0.02% 蒸餾水95.8%將步驟(3)和(6)的菌液按各為10% 20%的接種量使4類菌進入發(fā)酵罐同時培養(yǎng)，培織 度30。C、培養(yǎng)轉(zhuǎn)速190轉(zhuǎn)/分、培養(yǎng)通風1: 1 (v: v/min)，培養(yǎng)48小時，檢菌，出罐得到四種微生物的發(fā)酵液。該四種微生物的發(fā)酵液中活菌駄到150億 毫升—'以上，其中巨大芽 包桿菌70億 毫升—'、枯 草芽孢桿菌40億 毫升—'、硅酸鹽細菌30億 毫升—'、涇陽鏈霉菌10億 毫升-'); 實施例2 :液體復合微生物肥料實施例1制備的四種微生物的發(fā)酵液10公斤，凈水90公斤，粉碎后過80目篩的可溶性氮磷鉀 肥12.28公斤(其中，硫酸銨6.76公斤、尿素1.32公斤、磷酸二銨2.2公斤、硫酸鉀2.0公斤)。制備方法將凈水加入到四種微生物的發(fā)酵液中混合均勻，在將可溶性氮磷鉀肥溶解在四種微 生物的發(fā)酵液的水溶液中,混合均勻,即可包裝檢測出廠。該肥料適于大田作物、設施蔬菜和露地蔬菜。實施例3 :同實施例2，所不同的是可溶性氮磷鉀肥10.84公斤，可溶性氮磷鉀肥的組成為硫酸銨7.64 公斤，磷酸二銨2. 2公斤、硫酸鉀2. 0公斤。 實施例4 :同實施例2，所不同的是可溶性氮磷鉀肥7.7公斤,可溶性氮磷鉀肥的組成為:尿素3. 5公斤， 磷酸二銨2.2公斤、硫酸鉀2.0公斤。
權利要求
1、一種液體復合微生物肥料，其特征在于，由以下原料混合而得，均為重量份10～20份四種微生物的混合發(fā)酵液，所述四種微生物的混合發(fā)酵液是由枯草芽孢桿菌，巨大芽孢桿菌，硅酸鹽細菌、涇陽鏈霉菌混合發(fā)酵而成的；40～90份水；10～20份可溶性氮磷鉀肥。
2、 如權利要求1所述的一種液體復合微生物肥料，其特征在于，所述四種微生物的混合發(fā)酵液 中活菌量分別為枯草芽孢桿菌50 70億'毫升—'、巨大芽孢桿菌50 80億.毫升"、硅酸鹽細菌 30 50億 毫升-'、涇陽鏈霉菌10 20億 毫升—V混合發(fā)酵液中四種菌總的活菌量不低于150億 毫升-'。
3、 如權利要求1所述的一種液體復合微生物肥料，其特征在于，所述可溶性氮磷鉀肥中的氮 肥、磷肥、鉀肥的重量比為(1 2) : (0.5 1): (1 2)。
4、 如權利要求1所述的一種液體復合微生物肥料，其特征在于，所述可溶性氮磷鉀肥中，氮 肥選自尿素、硫酸銨之一或組合，磷肥選自磷酸一銨、磷酸二銨或組合，鉀肥選自氯化鉀、硫酸 鉀之一或組合。
5、 一種權利要求1的液體復合微生物肥料的希恪方法，步驟如下 (一)混合發(fā)酵液的制備(1) 將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、硅酸鹽細菌和涇陽鏈霉菌4種微生物菌種分別進行搖瓶培養(yǎng)，得枯草芽孢桿菌菌液、巨大芽孢桿菌菌液、硅酸鹽細菌菌液和涇陽鏈霉菌菌液四種菌液，(2) 將步驟(1)的枯草芽孢桿菌菌液、巨大芽孢桿菌菌液各按3%的接種量進入種子罐混合 發(fā)酵培養(yǎng)，得發(fā)酵菌液I;(3) 將步驟(1)的硅酸鹽細菌菌液、涇陽鏈霉菌菌液各按3X的接種量i4A種子罐后混合發(fā) 酵培養(yǎng)，得發(fā)酵菌液II;(4) 將步驟(2)的發(fā)酵菌液I和步驟(3)的發(fā)酵菌液11各按10% 20%的接種 入發(fā)酵 罐，同時混合培養(yǎng)，培im^3(TC,培養(yǎng)糊180 200轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)通風l: 1 (v: v/min)，培養(yǎng) 時間48小時，檢菌，出罐得到混合發(fā)酵液；(二) 將水按配比加入到上述的混合發(fā)酔液中，混和均勻，得混合發(fā)酵液的水溶液；(三) 將可溶性的氮肥、磷肥、鉀肥按重量比為(1 2) : (0.5~1) : (1 2)混合得可溶性 氮磷鉀肥，粉碎，過80目篩；(四) 將步驟(三)的可溶性氮磷鉀肥與歩驟(二)的混合發(fā)酵液的水溶液按比例均勻混合，全部 溶解后即得液體復合微生物肥料。
6、 如權利要求5所述的一種液體復合微生物肥料的制備方法，其特征在于，步驟(一)中的搖 瓶培養(yǎng)和種子罐發(fā)酵培養(yǎng)分別采用如下條件(1) 搖瓶培養(yǎng)注入150ml培養(yǎng)基到500ml三角瓶中；用5ml無菌水將斜面上菌種轉(zhuǎn)入相應的 搖瓶中，在28 30。C、 200轉(zhuǎn)/分^j牛下培養(yǎng)24h;(2) 種子罐發(fā)酵培養(yǎng)？鵬30。C、培養(yǎng)轉(zhuǎn)速180 200轉(zhuǎn)/分、培養(yǎng)通風l: 1 (v: v/min);培養(yǎng)時間36小時，35小時檢菌。
7、如權禾腰求5所述的一種液體復合微生物肥料的制備方法，其特征在于，步驟(一)(2)中 枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌種子罐發(fā)酵培養(yǎng)基如下硫勝安0. 2%葡萄糖0. 286%十豆淀粉0. 714%磷隨二鉀0.氯化鈉0. 020%氯化鉀0. 020%硫酸鎂0. 080%硫酸錳0. 003%硫酸亞鐵0. 003%酵母粉0. 300%蒸餾7K98. 00%。
8、如權利要求5所述的一種液體復合微生物肥料的制備方法，其特征在于，步驟(一)(3)中硅酸鹽細菌、涇陽鏈霉菌種子罐發(fā)酵培養(yǎng)基如下豆餅粉 0.5%蔗糖0.5% 酵母粉0.5% 硫勝安0.01% 硫酸鎂0.08% 磷酸氫二鉀0.1% 氯化鈉0.01% 碳,丐0.1% 硫酸亞鐵0. OOlo/o 蒸餾水98.2%。
9、如權利要求5所述的一種液體復合微生物月EM的制備方法，其特征在于，步驟(一)(4)中 枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、硅酸鹽細菌、徑陽鏈霉菌四種菌(混合)生產(chǎn)罐發(fā),咅養(yǎng)基如下淀粉 3%豆餅粉1%磷隨二鉀0.03%硫,安0.1%硫酸鎂0.05%氯化鐵0.001%碳酸鈣0.01%酵母粉0.02% 蒸餾水95.8%。
全文摘要
一種液體復合微生物肥及其制備方法，屬于微生物肥料技術領域。本發(fā)明以枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、硅酸鹽細菌和涇陽鏈霉菌4種微生物混合發(fā)酵并且復合了可溶性氮磷鉀肥制得液體復合微生物肥料。該肥料可以用于所有的土壤類型和農(nóng)作物，在蔬菜、水果上應用效果最佳，其能夠改善土壤結構、提高土壤保水保肥性能，具有較好增產(chǎn)和改善作物品質(zhì)的效果。
文檔編號C05F11/00GK101239847SQ20081001473
公開日2008年8月13日 申請日期2008年3月7日 優(yōu)先權日2008年3月7日
發(fā)明者劉兆輝, 宋效宗, 林海濤, 江麗華, 梅 王, 譚德水, 賈翠香, 鄭福麗, 高新昊 申請人:山東省農(nóng)業(yè)科學院土壤肥料研究所