專利名稱：刺參級(jí)進(jìn)雜交育種方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種刺參的育種方法，尤其是以中國(guó)刺參、中俄雜交刺參為親 本進(jìn)行級(jí)進(jìn)雜交育種方法。
背景技術(shù)：
刺參是一種名貴的海產(chǎn)品，含有豐富的蛋白質(zhì)和粘性多糖，具有很高的營(yíng) 養(yǎng)保健和藥用價(jià)值，頗受消費(fèi)者喜愛，價(jià)格較高，市場(chǎng)容量很大。近年來，隨 著海參消費(fèi)需求的逐步擴(kuò)大，刺參的人工養(yǎng)殖規(guī)模越來越大，養(yǎng)殖方式多種多 樣。以往，刺參的增養(yǎng)殖苗種主要通過采捕野生苗或人工育苗獲得，其中人工 育苗為主要來源，親參經(jīng)自然成熟或人工促熟以后開展人工受精、孵化，培育 幼體和稚、幼參。以往，都是用海域較近、遺傳基因相似的同種刺參進(jìn)行自交， 因長(zhǎng)期近親繁殖育苗、累代養(yǎng)殖，導(dǎo)致了種質(zhì)逐年下降，表現(xiàn)為生長(zhǎng)緩慢、經(jīng) 濟(jì)性狀下降、抗逆性降低、幼參的成活率低等等。為了解決這一問題，中國(guó)專利號(hào)為200410020787.4的發(fā)明專利公開了一種 "刺參雜交育苗方法"，是使海域相離較遠(yuǎn)、遺傳差異大的中國(guó)刺參和俄羅斯 遠(yuǎn)東海域剌參性腺同時(shí)發(fā)育成熟，用人工催產(chǎn)的方法分別獲得中國(guó)剌參和俄羅 斯刺參的卵子和精子，對(duì)其進(jìn)行人工授精，培育受精卵直至生成浮游幼體，即 培育出抗逆性強(qiáng)、活力強(qiáng)、質(zhì)量好的中俄雜交刺參苗種。但是，中俄雜交刺參苗種優(yōu)勢(shì)一般只表現(xiàn)在F1代，從其自交F2代開始則 發(fā)生性狀分離，F(xiàn)2代群體內(nèi)的個(gè)體間差異很大，生長(zhǎng)不整齊，在生長(zhǎng)勢(shì)、抗逆 性和產(chǎn)量等方面均比F1代顯著下降，從而出現(xiàn)優(yōu)勢(shì)逐代衰退現(xiàn)象；同時(shí)F1代 的自交也必然導(dǎo)致等位基因的純合而使隱性有害的性狀表現(xiàn)出來，因此中俄雜 交刺參自交F2代及以后各代在生產(chǎn)上一般不再利用。盡管遺傳育種的理論與實(shí)踐都己經(jīng)證明級(jí)進(jìn)雜交(又稱改造雜交、吸收雜 交)育種，具有提高養(yǎng)殖對(duì)象的抗逆性和活力的優(yōu)點(diǎn)，但是由于中國(guó)剌參與改 良剌參的性腺發(fā)育不同步，加之刺參為雌雄異體，從外形上很難區(qū)分，因此目 前的級(jí)進(jìn)雜交只限于哺乳動(dòng)物(肉犬、羊、牛等)，現(xiàn)有的公開出版物上還沒
有關(guān)于刺參級(jí)進(jìn)雜交的任何報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有技術(shù)的刺參雜交所存在的上述技術(shù)問題，提供一種 所育苗種及子代均具有中俄雜交刺參的優(yōu)點(diǎn)且抗逆性、活力更強(qiáng)的刺參級(jí)進(jìn)雜 交育苗方法。本發(fā)明的技術(shù)解決方案是 一種刺參級(jí)進(jìn)雜交育種方法，其步驟如下a. 取中俄雜交刺參，于當(dāng)年11月份入室內(nèi)養(yǎng)殖池中，水溫10 12'C恒溫培 養(yǎng)，次年四月份開始升溫，每天升溫rC，升溫至14"C;將中俄雜交刺參放入 室外池塘中的網(wǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，密度1~2頭/012;五月中旬開始，取樣解剖性腺，當(dāng)卵徑達(dá)到120iim時(shí)，將中俄雜交刺參重新入室內(nèi)養(yǎng)殖池中，水溫16 17t:恒溫 培養(yǎng)；在中俄雜交刺參重新入室內(nèi)養(yǎng)殖池時(shí)，取中國(guó)刺參入室內(nèi)另一養(yǎng)殖池中， 水溫16 17T:恒溫培養(yǎng)；b. 取樣解剖性腺，當(dāng)卵徑達(dá)到160|im時(shí)，將中俄雜交剌參、中國(guó)刺參分 別在暫養(yǎng)池中陰干15分鐘，選體重不小于250g，體長(zhǎng)不小于20 cm且性腺飽 滿的刺參作為親本；c. 迅速將挑選出來的中俄雜交刺參、中國(guó)刺參親本分別放入水槽中暫養(yǎng)并 充氣，水槽中海水是經(jīng)過300目網(wǎng)袋和棉袋過濾的新鮮沙濾水，溫度16 17"C; 于當(dāng)日下午五時(shí)開始放水，陰干2個(gè)小時(shí)，直接加入21 22t:的新鮮沙濾海水， 停氣；觀察剌參，分別收集中國(guó)刺參的精子及中俄雜交刺參卵子；d. 在親本產(chǎn)卵兩個(gè)小時(shí)內(nèi)進(jìn)行受精，用滴管取10ml精液，滴到卵子槽中， 迅速攪勻，邊觀察邊滴加精液，使精子量適宜；e. 受精結(jié)束后，開始進(jìn)行人工孵化，受精卵密度最多為30個(gè)/ml，采用多 個(gè)氣泡石微充氣的方法培育，孵化至浮游階段；f. 選育耳狀幼體的培育密度為0.2-0.3個(gè)/ml，投喂量為胃區(qū)的一半；g. 附著后按常規(guī)方法培育；h. 再取g步驟所得刺參為種參，用a步驟方法促使其性腺與中國(guó)刺參同步 成熟，重復(fù)b g步驟，得到苗種。 -所述a步驟中第一次室內(nèi)培育期間投喂鼠尾藻磨碎液和海泥的混合液，鼠 尾藻磨碎液與海泥的重量百分比分別是33%、 67%。在所述混合液中還可以加入脫脂魚粉和蝦料，脫脂魚粉和蝦料的重量不超 過混合液的10%。
所述a步驟的第二次室內(nèi)恒溫培養(yǎng)以及中國(guó)刺參的室內(nèi)恒溫培養(yǎng)投喂雞蛋 黃和螺旋藻的混合物并用200目網(wǎng)過濾，雞蛋黃和螺旋藻的重量百分比分別是 90%、 10°/。，每天按親參體重的5%投喂。本發(fā)明是用特殊的方法使中國(guó)刺參和中俄雜交刺參性腺同時(shí)發(fā)育成熟，用 陰干催產(chǎn)的方法分別獲得中國(guó)刺參親參的精子和中俄雜交剌參的卵子，人工授 精并培育受精卵直至生成浮游幼體，附著后按常規(guī)方法培育成中國(guó)剌參與中俄 雜交刺參的F1代剌參，再取此F1代刺參為種參，促使其性腺與中國(guó)刺參同步 成熟、人工受精、培育得到苗種。中國(guó)剌參與俄羅斯遠(yuǎn)東海域刺參的結(jié)合是強(qiáng) 優(yōu)勢(shì)的雜交組合，所培育的中俄刺參Fl代個(gè)體生長(zhǎng)速度快、抗逆性強(qiáng)、成活 率高，同時(shí)具有體壁厚、肉刺(疣足)長(zhǎng)、刺多、刺排多、出肉率高、營(yíng)養(yǎng)價(jià) 值高的優(yōu)點(diǎn)，本發(fā)明所培育的苗種及子代均能夠傳承中俄刺參Fl代所具有的 優(yōu)點(diǎn)，而且抗逆性、活性更強(qiáng)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:a. 取中俄雜交刺參，于當(dāng)年11月份入室內(nèi)養(yǎng)殖池中，水溫10 12'C恒溫培 養(yǎng)，進(jìn)行室內(nèi)促熟，次年四月份開始升溫，每天升溫rC，升溫至14'C;然后， 將中俄雜交刺參放入在室外池塘中預(yù)先設(shè)置的網(wǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，密度1~2頭/1112;五 月中旬開始，取樣解剖性腺，當(dāng)卵徑達(dá)到120pm時(shí)，將中俄雜交刺參重新入室 內(nèi)養(yǎng)殖池中，水溫16 17"C恒溫培養(yǎng)；在中俄雜交刺參重新入室內(nèi)養(yǎng)殖池時(shí)， 取中國(guó)刺參入室內(nèi)另一養(yǎng)殖池中，水溫16 17'C恒溫培養(yǎng)；培育期間按常規(guī)方 式投喂餌料；b. 取樣解剖性腺，當(dāng)卵徑達(dá)到160拜時(shí)，分別將中俄雜交刺參、中國(guó)刺 參在暫養(yǎng)池中陰干15分鐘，選身體無傷殘、無排臟，體重不小于250g，體長(zhǎng) 不小于20 cm且性腺飽滿的刺參作為親本；c. 迅速將挑選出來的中俄雜交刺參、中國(guó)刺參親本分別放入140升水槽中 暫養(yǎng)并充氣，水槽中海水是經(jīng)過300目網(wǎng)袋和棉袋過濾的新鮮沙濾水，溫度 16~17°C;于當(dāng)日下午五時(shí)開始放水，陰干2個(gè)小時(shí)，直接加入21 22'C的新鮮 沙濾海水，停氣；為使刺參親本保持黑暗和安靜的環(huán)境，在不開燈的前提下， 每隔半小時(shí)，用手電筒査看一次，動(dòng)作要輕以不驚動(dòng)刺參，如發(fā)現(xiàn)排精或產(chǎn)卵， 分別收集中國(guó)刺參的精子及中俄雜交刺參卵子；d. 在親本產(chǎn)卵兩個(gè)小時(shí)內(nèi)進(jìn)行受精，用滴管取10ml精液，滴到卵子槽中，
迅速攪勻，取樣用顯微鏡觀察受精情況，如果有未受精卵，就再滴加精液，再 査看，這樣就可以做到精子量適宜，不會(huì)因精子過多而產(chǎn)生畸形卵，更不必洗卵，減少了對(duì)受精卵的損傷，有利于受精卵的發(fā)育；e. 受精結(jié)束后，開始進(jìn)行人工孵化，受精卵密度最多為30個(gè)/ml，采用多 個(gè)氣泡石微充氣的方法培育，孵化至浮游階段，在不影響孵化率的基礎(chǔ)上節(jié)省 了人力、財(cái)力f. 選育耳狀幼體的培育密度為0.2-0.3個(gè)/ml，適口餌料包括鹽藻、牟氏角 毛藻、三角褐指藻和新月菱形藻等，其中用三角褐指藻和鹽藻混合投喂效果較 好。投餌要堅(jiān)持少投、勤投的原則，投得太多，會(huì)引起幼體消化不良，主要通 過鏡檢幼體胃的飽滿程度調(diào)節(jié)投喂量， 一般胃區(qū)內(nèi)餌料保持一半即可。g. 附著后按常規(guī)方法培育；h. 再取g步驟所得刺參為種參，用a步驟方法促使其性腺與中國(guó)刺參同步 成熟，重復(fù)b g步驟，得到苗種，既中國(guó)刺參與中俄雜交刺參級(jí)進(jìn)雜交F2代。實(shí)施例2:基本步驟同實(shí)施例l，只是a步驟中第一次室內(nèi)培育期間最好投喂鼠尾藻 磨碎液和海泥的混合液，鼠尾藻磨碎液與海泥的重量百分比分別是33%、 67%, 海泥即網(wǎng)泥，是指漁船掛網(wǎng)上的浮泥，此泥有機(jī)質(zhì)含量豐富，非常利于海參生 長(zhǎng)。亦可在混合液中加入脫脂魚粉和蝦料，脫脂魚粉和蝦料的重量不超過混合 液的10%。實(shí)施例3:基本步驟同實(shí)施例2，只是a步驟的第二次室內(nèi)恒溫培養(yǎng)以及中國(guó)刺參的 室內(nèi)恒溫培養(yǎng)投喂雞蛋黃和螺旋藻的混合物并用200目網(wǎng)過濾，雞蛋黃和螺旋 藻的重量百分比分別是90%、 10%，每天按親參體重的5%投喂。
權(quán)利要求
1.一種刺參級(jí)進(jìn)雜交育種方法，其步驟如下a.取中俄雜交刺參，于當(dāng)年11月份入室內(nèi)養(yǎng)殖池中，水溫10～12℃恒溫培養(yǎng)，次年四月份開始升溫，每天升溫1℃，升溫至14℃；將中俄雜交刺參放入室外池塘中的網(wǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，密度1～2頭/m2；五月中旬開始，取樣解剖性腺，當(dāng)卵徑達(dá)到120μm時(shí)，將中俄雜交刺參重新入室內(nèi)養(yǎng)殖池中，水溫16～17℃恒溫培養(yǎng)；在中俄雜交刺參重新入室內(nèi)養(yǎng)殖池時(shí)，取中國(guó)刺參入室內(nèi)另一養(yǎng)殖池中，水溫16～17℃恒溫培養(yǎng)；b.取樣解剖性腺，當(dāng)卵徑達(dá)到160μm時(shí)，將中俄雜交刺參、中國(guó)刺參分別在暫養(yǎng)池中陰干15分鐘，選體重不小于250g，體長(zhǎng)不小于20cm且性腺飽滿的刺參作為親本；c.迅速將挑選出來的中俄雜交刺參、中國(guó)刺參親本分別放入水槽中暫養(yǎng)并充氣，水槽中海水是經(jīng)過300目網(wǎng)袋和棉袋過濾的新鮮沙濾水，溫度16～17℃；于當(dāng)日下午五時(shí)開始放水，陰干2個(gè)小時(shí)，直接加入21～22℃的新鮮沙濾海水，停氣；觀察刺參，分別收集中國(guó)刺參的精子及中俄雜交刺參卵子；d.在親本產(chǎn)卵兩個(gè)小時(shí)內(nèi)進(jìn)行受精，用滴管取10ml精液，滴到卵子槽中，迅速攪勻，邊觀察邊滴加精液，使精子量適宜；e.受精結(jié)束后，開始進(jìn)行人工孵化，受精卵密度最多為30個(gè)/ml，采用多個(gè)氣泡石微充氣的方法培育，孵化至浮游階段；f.選育耳狀幼體的培育密度為0.2～0.3個(gè)/ml，投喂量為使胃區(qū)餌料保持一半；g.附著后按常規(guī)方法培育；h.再取g步驟所得刺參為種參，用a步驟方法促使其性腺與中國(guó)刺參同步成熟，重復(fù)b～g步驟，得到苗種。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的刺參級(jí)進(jìn)雜交育種方法，其特征在于所述a 步驟中第一次室內(nèi)培育期間投喂鼠尾藻磨碎液和海泥的混合液，鼠尾藻磨碎液 與海泥的重量百分比分別是33%、 67%。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的刺參級(jí)進(jìn)雜交育種方法，其特征在于在所述 混合液中加入脫脂魚粉和蟲下料，脫脂魚粉和蝦料的重量不超過混合液的10%。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的刺參級(jí)進(jìn)雜交育種方法，其特征在于所述a步驟的第二次室內(nèi)恒溫培養(yǎng)以及中國(guó)刺參的室內(nèi)恒溫培養(yǎng)投喂雞蛋黃和螺旋藻的混合物并用200目網(wǎng)過濾，雞蛋黃和螺旋藻的重量百分比分別是90%、 10%，每天按親參體重的5%投喂。
全文摘要
本發(fā)明公開一種刺參級(jí)進(jìn)雜交育種方法，使中國(guó)刺參和中俄雜交刺參性腺同時(shí)發(fā)育成熟，用陰干催產(chǎn)的方法分別獲得中國(guó)刺參親參的精子和中俄雜交刺參的卵子，人工授精并培育受精卵直至生成浮游幼體，附著后按常規(guī)方法培育成中國(guó)刺參與中俄雜交刺參的F1代刺參，再取此F1代刺參為種參，促使其性腺與中國(guó)刺參同步成熟、人工受精、培育得到苗種。中國(guó)刺參與俄羅斯遠(yuǎn)東海域刺參的結(jié)合是強(qiáng)優(yōu)勢(shì)的雜交組合，所培育的中俄刺參F1代個(gè)體生長(zhǎng)速度快、抗逆性強(qiáng)、成活率高，同時(shí)具有體壁厚、肉刺(疣足)長(zhǎng)、刺多、刺排多、出肉率高、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高的優(yōu)點(diǎn)，本發(fā)明所培育的苗種及子代均能夠傳承中俄刺參F1代所具有的優(yōu)點(diǎn)，而且抗逆性、活性更強(qiáng)。
文檔編號(hào)A01K61/00GK101147473SQ20071015791
公開日2008年3月26日 申請(qǐng)日期2007年11月5日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月5日
發(fā)明者堅(jiān) 宋, 常亞青, 張玉勇, 江曙光, 韓波堂 申請(qǐng)人:大連水產(chǎn)學(xué)院