專利名稱：增殖的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物殺蟲劑及其制備方法和應(yīng)用，特別是涉及一種通過增殖的蜀柏毒蛾核型多角體病毒而制成的生物殺蟲劑及其該殺蟲劑在防治蜀柏毒蛾病蟲危害方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
蜀柏毒蛾俗稱柏毛蟲，是柏木林區(qū)危害十分嚴(yán)重的食葉害蟲，尤其是我省川中、川北的柏木林區(qū)。1989年我們在四川省金堂縣采集到一批自然病死蟲，經(jīng)分離、鑒定、室內(nèi)毒力生物測定和林間初步應(yīng)用表明該病毒是一株蜀柏毒蛾新毒株，經(jīng)中國科學(xué)院武漢病毒所鑒定為蜀柏毒蛾核型多角體病毒(paroceneria orient Nuclear PolyedrosisVirus，簡稱PoNPV)，有關(guān)論文已刊登在《中國病毒學(xué)》1991年(第6卷)第4期，且該毒株也被中國科學(xué)院武漢病毒保貯中心收藏。
該毒株具有以下生物學(xué)特征1、核型多角體的形態(tài)及大小在光學(xué)顯微鏡下低倍觀察，可見很多折光性強(qiáng)的顆粒，高倍鏡下，可見其四邊形、五邊形的輪廓。將提純的多角體用電鏡觀察，多角體呈明顯的四邊形和五邊形，邊角鈍圓，有的呈圓形，其大小為1.06-3.3u；2、應(yīng)用5種限制性內(nèi)切酶對蜀柏毒蛾核型多角體病毒基因組DNA進(jìn)行的酶切分析該株病毒經(jīng)熱處理的多角體蛋白僅有一條，分子量為31.5KD，不經(jīng)熱處理的多角體蛋白有三條帶，分子量分別為31.5KD、29.1KD、28.6KD。病毒粒子包含有25種結(jié)構(gòu)的多肽，分子量范圍在17.6-114.6KD之間。多角體DNA經(jīng)Bam HI、EcoRI、HindIII、PstI、XhoI酶切分析產(chǎn)生9、12、12、12和14條片段?；蚪M大小平均為124.6Kb；3、病毒粒子的形態(tài)大小將提純的多角體用0.05mol/L Na2CO3-O.1mol/L NaCl堿解液在常溫下堿解，分別在堿解30分鐘、40分鐘、50分鐘和60分鐘時(shí)取樣，用2％PTA負(fù)染，JEM-100C電鏡觀察。多角體在30分鐘被部分堿解，60分鐘時(shí)，病毒粒子基本上被釋放出來。電鏡下病毒粒子呈桿狀，兩端鈍圓，大小為385×40nm；4、蜀柏毒蛾核型多角體病毒毒力將提純的多角體，制成多角體含量分別為為1.67×108/ml、1.67×10710/ml、1.67×10610/ml、1.67×10510/ml、1.67×104/ml濃度病毒懸液進(jìn)行生物測定，用2-3齡健康屬柏毒蛾幼蟲在室內(nèi)饑餓12小時(shí)后，以小型電動噴霧器將病毒液均勻噴灑在新鮮干凈枝椏，晾干后，插入盛水瓶內(nèi)，飼喂蜀柏毒蛾供試幼蟲，72小時(shí)后更換新鮮無毒枝椏，并進(jìn)行觀察記載。飼毒3-4天后幼蟲取食量減少，開始呈現(xiàn)感病癥狀，在室溫29℃條件下，12天后死亡率可達(dá)90.50％、78.00％、60.70％、45.40％、46.10％，以中間三個(gè)濃度計(jì)算該病毒對2-3齡蜀柏毒蛾幼蟲的半致死時(shí)間分別為7.66天、9.70天核12.41天，致死中濃度為7.15×104包涵體/摩爾；5、蜀柏毒蛾核型多角體病毒種類鑒定根據(jù)人工感染該病毒后幼蟲所表現(xiàn)的病狀、多角體和病毒粒子的形態(tài)及大小，根據(jù)國際病毒分類與命名系統(tǒng)，即所分離的是一種核型多角體病毒，屬桿狀病毒科(Baculoviridae)，桿狀病毒屬(Baculovirus)，取名蜀柏毒蛾核型多角體病毒(paroceneria orient Nuclear Polyedrosis Virus，簡稱PoNPV)。
傳統(tǒng)的蜀柏毒蛾防治主要以大量使用化學(xué)農(nóng)藥為主，化學(xué)防治雖然對抗災(zāi)有較大的作用，但卻存在著一些不可避免的矛盾和缺陷，如污染環(huán)境、易使目標(biāo)害蟲產(chǎn)生抗性、殺傷天敵，特別是影響桑蠶業(yè)的發(fā)展，因此急需一種毒力強(qiáng)、持續(xù)效果好、對人畜及家蠶絕對安全的特種生物殺蟲劑。通過蜀柏毒蛾活體增殖技術(shù)制成的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑及其該殺蟲劑在防治蜀柏毒蛾病蟲危害方面的應(yīng)用到目前為止尚未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種增殖的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑及其制備方法和該殺蟲劑在防治蜀柏毒蛾病蟲危害方面的應(yīng)用。該生物殺蟲劑毒力強(qiáng)、持續(xù)效果好、對人畜及家蠶無害，不污染環(huán)境、成本低廉。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下本發(fā)明殺蟲劑的主要組成為活性殺蟲成分蜀柏毒蛾核型多角體病毒(PoNPV)，此外為5％以下的其他惰性成分。
本發(fā)明所述的殺蟲劑為復(fù)合制劑，包括水劑和可濕性粉劑，該復(fù)合制劑每100毫升中蜀柏毒蛾核型多角體病毒的含量不低于1000億包涵體(PIB)，惰性成分吐溫80為0.01克、雙抗為1000萬單位、羧甲基纖維素10克、熒光素鈉鈉1克、甘油10克。
本發(fā)明所述的殺蟲劑為綠色，顆粒大小大于150目，靜置48小時(shí)有一定的分層現(xiàn)象。
本發(fā)明所述的蜀柏毒蛾核型多角體病毒是通過對蜀柏毒蛾進(jìn)行活體增殖所得，包括以下三種增殖方法A、圍欄增殖法a、增殖林地選擇選擇地勢平坦，交通方便的柏木林地，要求林木高2～4米，枝葉繁茂。鏟除林下雜叢，在樹間空隙中將17～18個(gè)/米2空酒瓶埋于土中，瓶內(nèi)灌水，再剪枝葉繁茂的約1米長枝條插入盛水瓶內(nèi)。按1.0米左右寬度分行釘樁，再圍以塑料薄膜成欄。
b、蟲源收集采集4～5齡活幼蟲，放于柏木枝丫上，批量集運(yùn)到增殖點(diǎn)，集運(yùn)工具用籮筐，再底部支墊粗柏亞，粗柏丫上放細(xì)柏枝，柏枝上放蟲，一層蟲隔一層粗柏丫，每筐蟲量不超過5千克，筐口用布圍蓋扎緊，以盡量減少活蟲死亡。
c、噴毒以病毒增殖用藥在無雨、無露水時(shí)用噴霧器以1×107PIB/ml濃度均勻噴灑，直到鱗葉潤濕，如遇下雨則補(bǔ)噴第二次，待鱗葉干后放蟲。
d、放蟲取活幼蟲均勻釋放于欄內(nèi)樹木和枝條上，放蟲密度盡可能大，以增加栽蟲量，以5×10米范圍放5千克蟲或單株放0.5千克蟲計(jì)。
e、收蟲噴毒放蟲后，視溫度和降水情況，在日最高氣溫25～29℃無雨天氣條件下，3～5天幼蟲開始出現(xiàn)癥狀。待大多數(shù)蟲體縮短、身體變色，不食不動，中腸液體變褐，少數(shù)開始死亡，5～7％幼蟲倒懸時(shí)，集中收集所有帶毒幼蟲，以50千克塑料桶盛裝、貯藏。
f、保存按每公斤幼蟲加480和800萬單位獸用青、鏈霉素，置于陰涼處或冰柜內(nèi)。
B、林間投蟲增殖法選擇交通方便，地勢較平坦，樹高不超過3米、成片的柏木林，株數(shù)按每株0.5千克蟲來計(jì)量，按上述圍欄增殖法收集健康蜀柏毒蛾，收集的健康的5齡幼蟲按每株柏木載蟲0.5千克計(jì)量，將蟲體投放在柏木上，用工農(nóng)-16型將濃度為107PIB/ml的蜀柏毒蛾核型多角體病毒液均勻地噴灑在投放有蟲體的樹株上，噴灑程度以鱗液濕潤為止，如噴藥后下雨，應(yīng)補(bǔ)噴1次，按上述圍欄增殖法人工采收柏木枝上的感病蟲體。
C、林間增殖法選擇交通方便，林木相對集中成片，林木均高4～5米，蟲口基數(shù)特大的林分(最好蟲量200頭以上/株)，于晴天以機(jī)動噴霧器用2.0×107～3.0×107PIB/ml濃度病毒用藥對增殖林木進(jìn)行全面施藥，噴藥方式為低量噴霧，第一次噴藥后在蟲量特大、收蟲方便或第一次噴藥質(zhì)量不高的重點(diǎn)地段進(jìn)行第二次重點(diǎn)噴藥，同時(shí)可用手動噴霧器對低矮林進(jìn)行選擇性噴藥，待大多數(shù)幼蟲蟲體開始收縮，體毛變伸，身體變色，取食活動降低，中腸變褐，少數(shù)幼蟲死亡(3～5％倒掛)時(shí)，開始收蟲。
本發(fā)明所述的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑的制備方法包括原料貯存、磨漿、粗濾、精濾、含量檢測、復(fù)合制劑的配制、產(chǎn)品貯存，其具體工藝步驟如下A、在原料貯存工序中，是指將收集的帶毒蜀柏毒蛾幼蟲以存放于冷凍冰柜中為最好，冷凍條件不夠時(shí)，也可將原料放在塑料桶或鐵桶內(nèi)密閉，其容量為容器的2/3，置于室內(nèi)陰涼處，存放一年后，經(jīng)鏡檢多角體含量，數(shù)量和質(zhì)量均無明顯變化。
B、在磨漿工序中，是指將增殖的原料蟲尸解凍，以高速磨漿機(jī)磨漿，磨漿時(shí)按蟲尸重量的2倍加水，并充分?jǐn)嚢璐蚰ァ?br> C、在粗濾工序中，是指以40目的尼龍網(wǎng)過濾，濾渣加其重量一倍水充分?jǐn)嚢韬笤龠^濾，反復(fù)2～3次。
D、在精濾工序中，是指將粗濾液以100目尼龍網(wǎng)再次過濾成基本液。
E、在含量檢測工序中，是指取基本液樣品稀釋10倍后將其滴于血球計(jì)數(shù)板上，靜止1分鐘后置于顯微鏡下計(jì)數(shù)，以每小格4～5個(gè)多角體為宜，按對角線方位取左上、右下、右上、左下、中部100個(gè)小格計(jì)數(shù)，重復(fù)三次求平均。
F、在復(fù)合制劑的配制工序中，其中水劑的配制工序是指在經(jīng)含量檢測后的基本液中，按其重量的1.2‰加表面活性劑十二烷基苯磺酸鈉，1％的熒光素鈉鈉作防光劑，10％的羧甲纖維素作粘著劑，10％的精甘油作保護(hù)劑，再加400萬單位/10升雙抗作防腐劑，經(jīng)充分加工攪勻后制成。
可濕性粉劑的配制工序是指將含水量盡可能少的基本液以500rpm、3000rpm差速離心濃縮多角體或加活性炭自然沉降后，用噴霧器在滑石粉或活性炭上，以50℃左右干燥后磨細(xì)過100目篩網(wǎng)制得。
G、在產(chǎn)品貯存工序中，是指將生產(chǎn)加工的產(chǎn)品成品置于室內(nèi)陰涼干燥處，半年內(nèi)無明顯變化，存放一年后，多角體含量仍可保持在原右的75～80％水平。
本發(fā)明所述的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑經(jīng)林間應(yīng)用濃度、林間施藥方式、林間應(yīng)用條件及安全試驗(yàn)，證實(shí)該殺蟲劑對蜀柏毒蛾病蟲危害具有有效的防治作用。
本發(fā)明所述的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑的使用方法為每畝使用24毫升該病毒殺蟲劑，按300倍稀釋，對1～3齡幼蟲進(jìn)行低量噴霧。
在蜀柏毒蛾4～6齡期，選擇蜀柏毒蛾嚴(yán)重危害的林分，用機(jī)動噴霧器，將濃度為1×106～1×107PIB/ml的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑噴灑上述林分，噴灑后第5天開始收集蟲體。
本發(fā)明所述的生物殺蟲劑毒力強(qiáng)、持續(xù)效果好、對人畜及家蠶無害，能滿足柏木林區(qū)蜀柏毒蛾生物防治生產(chǎn)的需要，且不污染環(huán)境、成本低廉。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1圍欄增殖法a、材料和設(shè)備塑料薄膜(數(shù)量按5×10米面積圍欄需要用50米計(jì)算)、工農(nóng)-16型噴霧器1臺、編織繩(直徑4～5厘米)兩包、長1～1.5米木樁(數(shù)量按每個(gè)5×10米大小圍欄30根計(jì)量)、獸用青霉素80萬單位(數(shù)量按每千克640萬單位計(jì)量)、獸用硫酸鏈霉素(數(shù)量按每千克800萬單位計(jì)量)、漏斗2個(gè)。
b、增殖場地的選擇和圍欄的制作選擇地面平坦、避風(fēng)狀況良好、蔭涼的場地，每個(gè)圍欄投放5千克蟲。在所定的場地，每個(gè)圍欄面積為5×10米，沿長、寬邊釘木樁，每隔1米釘1根，木樁內(nèi)側(cè)圍以高0.38米塑料薄膜，薄膜同木樁接觸處用編織繩扎緊，塑料薄膜拉直、拉緊，與地面接觸處用細(xì)泥土鋪壓，圍欄內(nèi)的地面用塑料薄膜鋪滿。用剪刀剪成啤酒或白酒瓶底大小的孔，數(shù)量為每平方米17～18個(gè)。瓶子深埋入土中，直至瓶口低于地面0.5～1厘米為宜。用漏斗將清水注入瓶中，用枝剪剪去長1米、鱗枝較嫩、椏枝和鱗葉較多、主枝稍細(xì)于瓶口的柏椏，小心插入瓶底。
c、蜀柏毒蛾核型多角體病毒液的噴灑早晨無雨天氣，用工農(nóng)-16型噴霧器均勻地向圍欄中的鱗葉噴灑濃度為107PIB/ml的蜀柏毒蛾核型多角體病毒液，噴灑到鱗葉濕潤為止；如遇隔天下雨，應(yīng)補(bǔ)噴1次。待鱗葉干后，投放蟲體。
d、健康蜀柏毒蛾幼蟲的收集和投放在高蟲口地區(qū)，發(fā)動群眾采收5齡幼蟲。收集運(yùn)輸時(shí)用籮筐，底部支墊用粗的柏枝；每個(gè)籮筐蟲量不超過5千克。筐口用布圍蓋，用繩扎緊。將健康的五齡幼蟲按5米×10米的面積投放5千克計(jì)。
e、病(死)蟲的收集蟲體取食4、5天后，可適量再放些新鮮柏椏。五齡幼蟲取食4～5天后便有死亡現(xiàn)象，當(dāng)有5～7％的蟲體死亡呈倒懸或“V”字型時(shí)，便可收蟲。蟲體取食帶有蜀柏毒蛾核型多角體病毒的鱗葉后，其取食量減少，活動性減弱，蟲體的“手感”很軟，無正常蟲體的“膨脹感”。
f、蟲尸的保存收集的蟲尸應(yīng)馬上集中裝入塑料桶中，每千克蟲尸加入480萬單位獸用青霉素和800萬單位獸用硫酸鏈霉素。塑料桶內(nèi)的蟲尸不宜裝得過滿，桶口用薄膜封蓋并用繩扎緊。
實(shí)施例2林間投蟲增殖法選擇交通方便，地勢較平坦，樹高不超過3米、成片的柏木林，每株投放0.5千克蟲。按上述圍欄增殖法收集健康蜀柏毒蛾，將收集的健康的5齡幼蟲按每株柏木載蟲0.5千克將蟲體投放在柏木上。用工農(nóng)-16型將濃度為107PIB/ml的蜀柏毒蛾核型多角體病毒液均勻地噴灑在投放有蟲體的樹株上，噴灑程度以鱗液濕潤為止；如噴藥后下雨，再補(bǔ)噴1次。最后人工采收柏木枝上的感病蟲體并封裝入容器。
實(shí)施例3林間增殖法選擇蟲口平均密度在200頭以上、蟲齡以五齡為主，0.2公頃、樹株較低的成片的林地。在下午5點(diǎn)以后，用3MF-4型噴霧器向樹株噴灑濃度為107PIB/m的1藥液。對于較高的林間樹株，用3MF-4型超低量噴灑敵馬油劑，使蟲體觸毒掉下來收集感病蟲體。
實(shí)施例4林間應(yīng)用濃度試驗(yàn)按多角體用量為50、80、110、140、160、180、240、300、360億PIB/畝濃度梯度分別在四川遂寧射洪和四川南充蓬安進(jìn)行不同濃度病毒殺蟲劑對蜀柏毒蛾的林間防治效果試驗(yàn)，蓬安作低量噴霧，射洪作常量噴霧，結(jié)果表明不同濃度的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑的殺蟲效果(校正死亡率)分別為28.30％、52.05％、65.70％、69.72％、74.95％(越冬代30天后)和81.05％、81.23％、83.52％、84.29％(第一代30天后)?？梢?，隨著使用濃度的增高，該殺蟲劑的殺蟲效果迅速增高，但多角體用量在108億PIB/畝以上時(shí)，殺蟲效果隨濃度增長變化緩慢，且用量在100億PIB/畝以上即可達(dá)到較好的防治效果，而多角體用量為180億PIB/畝時(shí)的效果已非常理想，因此生產(chǎn)防治濃度以1 80億PIB/畝即可，但考慮到柏木林區(qū)林木疏散，藥劑施用有一定浪費(fèi)，有的地方又常用于防治較高蟲口林區(qū)，因此將生產(chǎn)銷售藥劑標(biāo)準(zhǔn)用量定在240億PIB/畝。
實(shí)施例5林間施藥方式試驗(yàn)以240億PIB/畝用量分別作常量噴霧(用水量100千克/畝)和低量噴霧(用水量2.4千克/畝)對比試驗(yàn)，結(jié)果表明將每畝用水量從100千克降到2.4千克，每臺機(jī)組人員從4人降到2人，施藥效率每臺機(jī)組20畝/天上升到50畝/天，殺蟲效果仍然相當(dāng)(P＜0.05)。因此確定采用人工投入少，功效高，操作方便的低量噴霧方式進(jìn)行生產(chǎn)防治。
實(shí)施例6林間應(yīng)用條件試驗(yàn)由于蜀柏毒蛾從第4齡幼蟲開始大量取食，而蜀柏毒蛾核型多角體病毒感染發(fā)病潛伏期一般要5天左右，因此確定2～3齡幼蟲為蜀柏毒蛾核型多角體病毒生產(chǎn)防治的最適蟲齡。加之該蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑配有粘著劑，因此防治后除遇大雨外，中小雨天氣沒有明顯影響，最好是無雨陰天或晴天；同時(shí)，該殺蟲劑還配有防光劑，可吸收紫外線，因此盆地內(nèi)任何光照均不會造成影響。
實(shí)施例7蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑對小白鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)(LD50)按四川省衛(wèi)生殺蟲藥劑安全性地方標(biāo)準(zhǔn)DB51/78-91，用實(shí)際無毒級10000mg/Kg計(jì)量，用濃度為9.6×106PIB/ml(林間防治使用濃度)蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑對16只雄性小白鼠進(jìn)行灌胃，另選10只作對照組，連續(xù)觀察17天后，處理組生長發(fā)育正常，沒有死亡和任何異?，F(xiàn)象。證明該殺蟲劑急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)是安全的，屬實(shí)際無毒級。
實(shí)施例8蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑對小白鼠的微核測定試驗(yàn)根據(jù)成都市衛(wèi)生防疫站依據(jù)的衛(wèi)生殺蟲藥劑安全性國家標(biāo)準(zhǔn)GB15193.5-94和該殺蟲劑的LD50，將林間使用濃度9.6×106PIB/ml的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑設(shè)為937.5mg/Kg、1875mg/Kg、3750mg/Kg和7500mg/Kg四種劑量作處理組，同時(shí)用0.85％生理鹽水作陰性對照，30mg/Kg環(huán)磷酰胺作陽性對照，分別對10只昆明種小白鼠進(jìn)行骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率的測定。結(jié)果表明四種處理劑量的微核率依次為1.40‰、1.60‰、1.7‰和1.50‰。與陰性對照微核率1.65‰比較，無顯著性差異(P＞0.05)；而與陽性對照的微核率16.36‰比較則有極顯著差異(P＜0.01)，說明該殺蟲劑不能引起昆明種小白鼠骨髓細(xì)胞染色體損傷，從遺傳角度說明該殺蟲劑對哺乳動物是安全的。
實(shí)施例9蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑對家蠶的安全性試驗(yàn)選健康4齡家蠶，設(shè)三個(gè)重復(fù)處理，一個(gè)對照，各100條。以林間使用濃度9.6×106PIB/ml蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑殺蟲劑浸濕桑葉，晾干后喂養(yǎng)處理家蠶，清水作對照。觀察家蠶取食、脫皮、死亡和結(jié)繭情況，并在喂食的第14天和繭期，取樣作消化道、絲腺，脂肪體解剖觀察、抽取血液作顯微觀察和脂肪體的組織切片觀察。結(jié)果表明處理組幼蟲的平均死亡率為7.66‰，對照為8.00％，處理組平均結(jié)繭率79.66％，對照結(jié)繭率82.00％，兩者無顯著性差異。解剖處理幼蟲內(nèi)臟各器官均未發(fā)現(xiàn)任何病變和病灶，血液中也無蜀柏毒蛾核型多角體病毒，其脂肪組織切片細(xì)胞正常，沒有任何損壞，細(xì)胞內(nèi)也無蜀柏毒蛾核型多角體病毒存在。可見，蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑對家蠶絕對安全。
權(quán)利要求
1.一種增殖的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑，其特征在于主要組成為活性殺蟲成分蜀柏毒蛾核型多角體病毒(PoNPV)，此外為5％以下的其他惰性成分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的增殖的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑，其特征在于所述的殺蟲劑為復(fù)合制劑，包括水劑和可濕性粉劑，該復(fù)合制劑每100毫升中蜀柏毒蛾核型多角體病毒的含量不低于1000億包涵體(PIB)，惰性成分吐溫80為0.01克、雙抗為1000萬單位、羧甲基纖維素10克、熒光素鈉鈉1克、甘油10克。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的增殖的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑，其特征在于所述的殺蟲劑為綠色，顆粒大小大于150目，靜置48小時(shí)有一定的分層現(xiàn)象。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的增殖的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑，其特征在于所述的蜀柏毒蛾核型多角體病毒是通過對蜀柏毒蛾進(jìn)行活體增殖所得，包括以下三種增殖方法A、圍欄增殖法B、林間投蟲增殖法C、林間增殖法
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的增殖的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑的制備方法，其特征在于包括原料貯存、磨漿、粗濾、精濾、含量檢測、復(fù)合制劑的配制、產(chǎn)品貯存，其具體工藝步驟如下A、在原料貯存工序中，是指將收集的帶毒蜀柏毒蛾幼蟲存放于冷凍冰柜中或?qū)⒃戏旁谒芰贤盎蜩F桶內(nèi)密閉。B、在磨漿工序中，是指將增殖的原料蟲尸解凍，按蟲尸重量的2倍加水后快速磨漿。C、在粗濾工序中，是指以40目的尼龍網(wǎng)過濾后的濾渣，加其重量一倍水充分?jǐn)嚢韬笤龠^濾，反復(fù)2～3次。D、在精濾工序中，是指將粗濾液以100目尼龍網(wǎng)再次過濾成基本液。E、在含量檢測工序中，是指取基本液樣品稀釋10倍后于顯微鏡下計(jì)數(shù)。F、在復(fù)合制劑的配制工序中，其中水劑的配制工序是指在經(jīng)含量檢測后的基本液中，按其重量的1.2‰加表面活性劑十二烷基苯磺酸鈉，1％的熒光素鈉鈉作防光劑，10％的羧甲纖維素作粘著劑，10％的精甘油作保護(hù)劑，再加400萬單位/10升雙抗作防腐劑，經(jīng)充分加工攪勻后制成?？蓾裥苑蹌┑呐渲乒ば蚴侵笇⒑勘M可能少的基本液以500rpm、3000rpm差速離心濃縮多角體或加活性炭自然沉降后，用噴霧器在滑石粉或活性炭上，以50℃左右干燥后磨細(xì)過100目篩網(wǎng)制得。G、在產(chǎn)品貯存工序中，是指將生產(chǎn)加工的產(chǎn)品成品置于室內(nèi)陰涼干燥處。
6.權(quán)利要求1或2所述的增殖的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑在防治蜀柏毒蛾病蟲危害方面的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的增殖的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑，其特征在于所述的殺蟲劑的使用方法為每畝使用24毫升該病毒殺蟲劑，按300倍稀釋，對1～3齡幼蟲進(jìn)行低量噴霧。在蜀柏毒蛾4～6齡期，選擇蜀柏毒蛾嚴(yán)重危害的林分，用機(jī)動噴霧器，將濃度為1×106～1×107PIB/ml的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑噴灑上述林分，噴灑后第5天開始收集蟲體。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種通過增殖的蜀柏毒蛾核型多角體病毒而制成的生物殺蟲劑及其該殺蟲劑在防治蜀柏毒蛾病蟲危害方面的應(yīng)用，其主要組成為活性殺蟲成分蜀柏毒蛾核型多角體病毒(PoNPV)，此外為5％以下的其他惰性成分，該殺蟲劑為復(fù)合制劑，包括水劑和可濕性粉劑；本發(fā)明所述的蜀柏毒蛾核型多角體病毒是通過對蜀柏毒蛾進(jìn)行活體增殖所得，包括以下三種增殖方法圍欄增殖法，林間投蟲增殖法，林間增殖法；所述的蜀柏毒蛾核型多角體病毒殺蟲劑的制備方法包括原料貯存、磨漿、粗濾、精濾、含量檢測、復(fù)合制劑的配制、產(chǎn)品貯存；本生物殺蟲劑毒力強(qiáng)、持續(xù)效果好、對人畜及家蠶無害，能滿足柏木林區(qū)蜀柏毒蛾生物防治生產(chǎn)的需要，且不污染環(huán)境、成本低廉。
文檔編號A01N63/00GK1568705SQ0313541
公開日2005年1月26日 申請日期2003年7月15日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月15日
發(fā)明者周建華, 郭亨孝 申請人:四川省林業(yè)科學(xué)研究院森林保護(hù)研究所