專利名稱：一種沼蝦類人工種間雜交方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及蝦類育種技術(shù)，更確切地說是一種應用精莢移植進行沼蝦類種間雜交的方法。
魚類受精卵離體發(fā)育，完全不依賴母體，人工授精時，只需將成熟的卵和精子分別擠出，然后混合在一起即可，因此雜交較方便。
蝦類中的對蝦不抱卵，卵子受精后即分散于水中自行發(fā)育，其繁殖方式與魚類有類似之處；另一方面，雌雄對蝦在繁殖時間方面不需要嚴格配合，可提前數(shù)月將雄蝦精莢植入雌蝦納精囊中。正因為如此，在蝦類中，對蝦的種間雜交率先取得突破。
沼蝦類為抱卵蝦，其繁殖方式非常特殊(1)沼蝦類雄蝦必須在雌蝦出現(xiàn)生殖蛻皮幾小時內(nèi)與其交配，時間上要求雌雄嚴格配合；(2)對蝦雌性腹部有納精囊，便于精莢的儲存，而沼蝦類無納精囊，精莢必須粘在腹部體表；(3)沼蝦類受精卵粘于母蝦腹部，整個發(fā)育過程都不能離開母體，即具有抱卵現(xiàn)象。Sandifer&Smith(1979)曾嘗試沼蝦類的種間雜交，但未取得成功。Grazianid等(2002)也探索了沼蝦類的人工種間雜交，同樣未取得成功。長期以來，沼蝦類的人工種間雜交一直是一個未能攻克的難題。
我國大多數(shù)淡水經(jīng)濟蝦類都屬于沼蝦，如青蝦、羅氏沼蝦、海南沼蝦等，近年來，隨著養(yǎng)殖業(yè)的高速發(fā)展，生產(chǎn)規(guī)模和養(yǎng)殖產(chǎn)量急劇增加，集約化程度不斷提高，青蝦等淡水養(yǎng)殖蝦類出現(xiàn)嚴重的品種退化，養(yǎng)殖效益急劇下降，嚴重威脅淡水蝦類養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。要實現(xiàn)淡水蝦類養(yǎng)殖的可持續(xù)發(fā)展，必須從品種改良著手。
實現(xiàn)本發(fā)明目的的主要技術(shù)方案將不同種的雌雄親蝦配對養(yǎng)殖，性激素催情，雌蝦出現(xiàn)生殖脫皮時，將雄蝦的精莢取出，粘貼在雌蝦腹部第四對步足與第五對步足之間，然后雌蝦單獨養(yǎng)殖，待其產(chǎn)卵，完成抱卵后轉(zhuǎn)入孵化缸飼養(yǎng)，直至孵出雜交蝦苗。
本發(fā)明的沼蝦類人工種間雜交方法包括以下步驟(1)挑選親本挑選出個體大而健壯、無病害、無傷殘、體表無寄生物、營養(yǎng)狀況良好的成蝦作親本，雌蝦頭部背面應部分或全部充滿生殖腺，雄蝦頭部兩側(cè)應可見白色生殖腺團；(2)催情將雌雄親蝦按1∶3-5配對放入水深為25-35cm的水族箱中飼養(yǎng)，在青蝦配合飼料中添加30-90ppm的魚用激素LH-RH-A，并按青蝦配合飼料∶豬肝∶豬腎∶螺絲肉∶土豆絲＝2∶0.5∶0.5∶1∶1的比例投喂，每天上午800、下午400和晚上900各喂一次，每次投喂量為蝦總重的5-8％，每次投餌前先吸污并補充新鮮的曝氣水，維持水溫22-29℃，水體溶氧量保持在5毫克/升以上，并放置一些樹枝作為隱蔽物，所述的水族箱的尺寸為長×寬×高＝100×50×60cm，并靠南窗擺放，每天照射2-3小時陽光；(3)人工授精即精莢移植當發(fā)現(xiàn)雌蝦生殖蛻皮時，待其完成生殖蛻皮后，將雌蝦撈出，用濾紙吸干體表水份，然后選出發(fā)育成熟的雄蝦，同樣用濾紙吸干其體表水份，用鑷子將雄蝦的精莢擠出，并將精莢粘貼到雌蝦腹部的第四對步足與第五對步足之間，靜置，放入抱卵缸；(4)抱卵將人工授精的雌蝦在水深15-25cm的抱卵缸中單獨飼養(yǎng)，一蝦一缸，不得與雄蝦混養(yǎng)，保持水質(zhì)清爽，增氧泵24小時增氧，投喂青蝦配合飼料、螺絲肉和土豆絲，其配比為2∶2∶1(重量)，每天上午800和晚上600各喂一次，每次投喂量為母蝦體重的5-8％，每次投餌前先吸污并補充新鮮的曝氣水，水溫維持22-29℃，12-72小時移植精莢的雌蝦產(chǎn)卵并抱卵，所述的抱卵缸尺寸為長×寬×高＝50×30×35cm；(5)孵化將抱卵的雌蝦轉(zhuǎn)水深15-25cm的孵化缸單獨飼養(yǎng)并進行孵化，維持水溫22-29℃，溶氧量保持在5毫克/升以上，投喂青蝦配合飼料、螺絲肉和土豆絲，其配比為1∶1∶1(重量)，每天上午800、下午400和晚上900各喂一次，每次投喂量為母蝦體重的5-8％，每次投餌前先吸污并補充新鮮的曝氣水，10-20天孵出雜交蝦苗，所述的孵化缸尺寸為長×寬×高＝60×30×35cm。
所述的LH-RH-A，中文名為促黃體釋放激素，D-丙氨酸類似物，是上海麗珠東風生物科技股份有限公司生產(chǎn)。
所述的青蝦配合飼料為寧波天邦飼料科技股份有限公司生產(chǎn)。
本發(fā)明的優(yōu)點和效果本發(fā)明是沼蝦類人工種間雜交的首次突破，不僅具有巨大的理論意義，而且為淡水蝦類的雜交育種奠定了基礎(chǔ)，可望由此培養(yǎng)出優(yōu)良的蝦類新品種，提高蝦類養(yǎng)殖的經(jīng)濟效益，促進我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康、穩(wěn)定、持續(xù)的發(fā)展。
具體實施例方式
下面通過具體實例進一步對本發(fā)明作詳細說明。
實例1雌性親蝦為青蝦，體長5.5-7cm，頭部背面充滿生殖腺，顏色發(fā)綠，雄性親蝦為海南沼蝦，體長5-7cm，頭部兩側(cè)可見白色生殖腺團；LH-RH-A催情劑量為60ppm，水溫控制在22-29℃，7天后雌蝦出現(xiàn)生殖蛻皮；雌蝦生殖蛻皮后約6小時完成精莢移植，放回水中飼養(yǎng)；在26-27℃水溫下，精莢移植后45小時，雌蝦產(chǎn)卵并抱卵；抱卵雌蝦在22-29℃水溫下孵化，13天后孵出雜交蝦苗約500尾。
實例2雌性親蝦為青蝦，體長5.5-7cm，頭部背面充滿生殖腺，顏色發(fā)綠，雄性親蝦為海南沼蝦，體長5-7cm，頭部兩側(cè)可見白色生殖腺團；LH-RH-A催情劑量為40ppm，水溫控制在22-29℃，10天后雌蝦出現(xiàn)生殖蛻皮；雌蝦生殖蛻皮后約8小時完成精莢移植，放回水中飼養(yǎng)；在27-29℃水溫下，精莢移植后36小時，雌蝦產(chǎn)卵并抱卵；抱卵雌蝦在22-29℃水溫下孵化，15天后孵出雜交蝦苗約1200尾。
實例3雌性親蝦為青蝦，體長6-7.5cm，頭部背面充滿生殖腺，顏色發(fā)綠，雄性親蝦為海南沼蝦，體長6-7cm，頭部兩側(cè)可見白色生殖腺團；LH-RH-A催情劑量為80ppm，水溫控制在22-29℃，5天后雌蝦出現(xiàn)生殖蛻皮；雌蝦生殖蛻皮后約5小時完成精莢移植，放回水中飼養(yǎng)；在27-28℃水溫下，精莢移植后28小時，雌蝦產(chǎn)卵并抱卵；抱卵雌蝦在22-29℃水溫下孵化，10天后孵出雜交蝦苗約2300尾，雜種一代已發(fā)育至成體，其形態(tài)介于雙親之間，同工酶電泳分析表明雜種蝦中有雙親基因的表達。
權(quán)利要求
1.一種沼蝦類人工種間雜交方法，其特征在于包括以下過程(1)挑選親本挑選出個體大而健壯、無病害、無傷殘、體表無寄生物、營養(yǎng)狀況良好的成蝦作親本，雌蝦頭部背面應部分或全部充滿生殖腺，雄蝦頭部兩側(cè)應可見白色生殖腺團；(2)催情將雌雄親蝦按1∶3-5配對放入水深為25-35cm的水族箱中飼養(yǎng)，在青蝦配合飼料中添加30-90ppm的魚用激素LH-RH-A，并按青蝦配合飼料∶豬肝∶豬腎∶螺絲肉∶土豆絲＝2∶0.5∶0.5∶1∶1的比例投喂，每天上午800、下午400和晚上900各喂一次，每次投喂量為蝦總重的5-8％，每次投餌前先吸污并補充新鮮的曝氣水，維持水溫22-29℃，水體溶氧量保持在5毫克/升以上，并放置一些樹枝作為隱蔽物，所述的水族箱的尺寸為長×寬×高＝100×50×60cm，并靠南窗擺放，每天照射2-3小時陽光；(3)人工授精即精莢移植當發(fā)現(xiàn)雌蝦生殖蛻皮時，待其完成生殖蛻皮后，將雌蝦撈出，用濾紙吸干體表水份，然后選出發(fā)育成熟的雄蝦，同樣用濾紙吸干其體表水份，用鑷子將雄蝦的精莢擠出，并將精莢粘貼到雌蝦腹部的第四對步足與第五對步足之間，靜置，放入抱卵缸；(4)抱卵將人工授精的雌蝦在水深15-25cm的抱卵缸中單獨飼養(yǎng)，一蝦一缸，不得與雄蝦混養(yǎng)，保持水質(zhì)清爽，增氧泵24小時增氧，投喂青蝦配合飼料、螺絲肉和土豆絲，其重量配比為2∶2∶1，每天上午800和晚上600各喂一次，每次投喂量為母蝦體重的5-8％，每次投餌前先吸污并補充新鮮的曝氣水，水溫維持22-29℃，12-72小時移植精莢的雌蝦產(chǎn)卵并抱卵，所述的抱卵缸尺寸為長×寬×高＝50×30×35cm；(5)孵化將抱卵的雌蝦轉(zhuǎn)水深15-25cm的孵化缸單獨飼養(yǎng)并進行孵化，維持水溫22-29℃，溶氧量保持在5毫克/升以上，投喂青蝦配合飼料、螺絲肉和土豆絲，其重量配比為1∶1∶1重量，每天上午800、下午400和晚上900各喂一次，每次投喂量為母蝦體重的5-8％，每次投餌前先吸污并補充新鮮的曝氣水，10-20天孵出雜交蝦苗，所述的孵化缸尺寸為長×寬×高＝60×30×35cm。
全文摘要
本發(fā)明是一種沼蝦類人工種間雜交方法，其特點是將不同種的雌雄親蝦配對養(yǎng)殖，性激素催情，雌蝦出現(xiàn)生殖蛻皮時，將雄蝦的精莢取出，粘貼于雌蝦腹部第四對步足與第五對步足之間，然后雌蝦單獨養(yǎng)殖，待其產(chǎn)卵，完成抱卵后，將抱卵雌蝦轉(zhuǎn)入孵化缸養(yǎng)殖，直至孵出雜交蝦苗。本發(fā)明首次攻克了沼蝦類人工種間雜交的難題，不僅具有重要的理論意義，而且為沼蝦類的雜交育種提供了一條可行的途徑，可望由此培育出優(yōu)良的蝦類新品種，提高蝦類養(yǎng)殖的經(jīng)濟效益，促進我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康、穩(wěn)定、持續(xù)的發(fā)展。
文檔編號A01K61/00GK1463596SQ0212156
公開日2003年12月31日 申請日期2002年6月26日 優(yōu)先權(quán)日2002年6月26日
發(fā)明者傅洪拓, 龔永生, 吳滟, 徐跑 申請人:中國水產(chǎn)科學研究院淡水漁業(yè)研究中心