專利名稱：繁殖觀賞水草紅蛋葉的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是一種快速繁殖觀賞水草的方法。
紅蛋葉(Echinodorus rubra-osiris)，澤瀉科，刺果澤瀉屬，名貴觀賞水草，是一種自然雜交的園藝種，屬水生植物。由于不能開花結(jié)實，所以沒有種子，無法有性繁殖，常利用母株萌發(fā)出的少量不定芽或新芽進行繁殖，繁殖系數(shù)極低(《觀賞水草》李尚志，中國林業(yè)出版社，1996.9)。種苗數(shù)量少，無性繁殖受到限制。至今未見其它繁殖方法的報道。
本發(fā)明的目的是提供一種新的繁殖觀賞水草紅蛋葉的方法，可以克服無性繁殖所受到的限制，解決了種苗大量繁殖的難題。
本發(fā)明是采用紅蛋葉莖間腋芽為外植體，在特定培養(yǎng)條件下經(jīng)離體培養(yǎng)，誘導腋間不定芽萌發(fā)，快速繁殖試管苗。
本發(fā)明的具體實施步驟詳細描述如下外植體的消毒。將由水中采集到的正常生長植株，去掉葉片、葉柄和根，保留帶腋芽的莖段。用自來水沖洗，在超凈工作臺內(nèi)先用75％酒精消毒1-2分鐘，用無菌水清洗，連續(xù)兩次。再用10％次氯酸鈣消毒8-15分鐘，最后用無菌水反復沖洗5次以上。
初始培養(yǎng)。將消毒的莖段消毒時外露的切面切去，露出新的切面，再切成0.5-1.0cm長的帶芽莖段，接入已制備好的初始培養(yǎng)基中(初始培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基附加0.7％瓊脂+2％蔗糖+6-BA 2-4mg/L+NAA 0.1-1mg/L，PH 5.8)。在室溫25-27℃的培養(yǎng)室內(nèi)補充光照8小時。15-25天莖間腋芽萌生出帶葉的幼芽。用相同的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法再連續(xù)培養(yǎng)二代(40-50天)，即得到具有3-5個不定芽的叢生芽，成為中間繁殖體。
增殖培養(yǎng)。將獲得的中間繁殖體切成2-4塊保留有1-3個不定芽的叢生芽塊，轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基(增殖培養(yǎng)基MS+0.9％瓊脂+3％蔗糖+6-BA 1-3mg/L+NAA 0.1-0.2mg/L，PH 5.8)。培養(yǎng)條件與初始培養(yǎng)相同。培養(yǎng)周期30-45天。用同一種方法在同一培養(yǎng)基上連續(xù)增殖培養(yǎng)，提高繁殖率。在增殖培養(yǎng)中，每個不定芽長成具有根、莖、葉的幼苗，并且基部還萌發(fā)出少量的不定芽。
試管苗的水培。取出具有根、莖、葉的幼苗，用清水洗去培養(yǎng)基，直接移入水中，不用緩苗即可生長。水溫保持在25-30℃，還要有適當?shù)墓庹铡?br> 由于本發(fā)明在初始培養(yǎng)基中獲得中間繁殖體后，在以后的快速繁殖中只使用一種增殖培養(yǎng)基即可獲得完整的試管苗和用于增殖培養(yǎng)的叢生不定芽。方法簡單、培養(yǎng)成本低、繁殖率高，單芽年有效繁殖率=[3(繁殖系數(shù))×80％(成苗率)]8(年繼代次數(shù))=1100。
實施例采南開大學生命科學學院水生植物培養(yǎng)箱正常生長的紅蛋葉植株，取帶腋芽的莖段，水洗，酒精消毒2分鐘，用無菌水清洗2次，用10％次氯酸鈣消毒15分鐘，最后用無菌水反復沖洗5次；接入已制備好的初始培養(yǎng)基中，初始培養(yǎng)基為MS+0.7％瓊脂+2％蔗糖+6-BA 2mg/L+NAA 0.1mg/L，在室溫27℃的培養(yǎng)室內(nèi)補充光照8小時，經(jīng)過25天即得莖間腋芽萌生出帶葉的幼芽；用相同的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法再連續(xù)培養(yǎng)二代，得到具有5個不定芽的叢生芽，成為中間繁殖體。將離體培養(yǎng)獲得無菌的中間繁殖體，接種在添加了6-BA 3mg/L、NAA 0.2mg/L、3％蔗糖、0.9％瓊脂的MS培養(yǎng)基中，每瓶6塊，在恒溫27℃的培養(yǎng)室培養(yǎng)。培養(yǎng)中每天人工光照8-10小時。培養(yǎng)45天后，在無菌條件下，切取新萌生的叢生不定芽，繼續(xù)增殖培養(yǎng)，提高繁殖率。將具有根、莖、葉的幼苗用清水洗去培養(yǎng)基，直接移入水中培養(yǎng)，繁殖新植株。繁殖新植株結(jié)果見附圖
一-圖三。圖一為具有不定芽的叢生芽增殖培養(yǎng)。圖二為具有根、莖、葉的幼苗。圖三為水培試管苗。
權(quán)利要求
1.一種繁殖觀賞水草紅蛋葉的方法，其特征包括下述步驟(1)采集正常生長植株帶腋芽的莖段，水洗，酒精消毒1-2分鐘，用無菌水清洗兩次，用10％次氯酸鈣消毒8-15分鐘，最后用無菌水反復沖洗5次以上；(2)將消毒的莖段消毒時外露的切面切去，露出新的切面，再切成0.5-1.0cm長的帶芽莖段，接入已制備好的初始培養(yǎng)基中，初始培養(yǎng)基為MS+0.7％瓊脂+2％蔗糖+2-4mg/L 6-BA+0.1-1mg/L NAA，在室溫25-27℃的培養(yǎng)室內(nèi)補充光照8小時，經(jīng)過15-25天即得莖間腋芽萌生出帶葉的幼芽；用相同的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法再連續(xù)培養(yǎng)二代，得到具有3-5個不定芽的叢生芽，成為中間繁殖體。(3)將中間繁殖體切成2-4塊保留有1-3個不定芽的叢生芽塊，轉(zhuǎn)入MS+0.9％瓊脂+3％蔗糖+1-3mg/L 6-BA+0.1-0.2mg/L NAA的增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件與初始培養(yǎng)相同，培養(yǎng)周期30-45天；用同一種方法在同一培養(yǎng)基上連續(xù)增殖培養(yǎng)。(4)取具有根、莖、葉的幼苗，用水洗去培養(yǎng)基，直接移入25-30℃水中，不用緩苗即可生長，光照。
2.按照權(quán)利要求1所說的繁殖觀賞水草紅蛋葉的方法，其特征在于所說的增殖培養(yǎng)中，每個不定芽長成具有根、莖、葉的幼苗，并且基部還萌發(fā)出少量的不定芽。
全文摘要
本發(fā)明是一種快速繁殖觀賞水草的方法。經(jīng)過外植體的消毒、莖段初始培養(yǎng)、增殖培養(yǎng),可獲得完整的試管苗和用于增殖培養(yǎng)的叢生不定芽,然后繼續(xù)試管苗的水培,繁殖新植株。本發(fā)明方法簡單、培養(yǎng)成本低、繁殖率高,單芽年有效繁殖率=[3(繁殖系數(shù))×80%(成苗率)]
文檔編號A01H4/00GK1295789SQ0013216
公開日2001年5月23日 申請日期2000年12月19日 優(yōu)先權(quán)日2000年12月19日
發(fā)明者李德森, 盛長忠, 杜榮騫 申請人:南開大學