本發(fā)明涉及一種用于治療腦震蕩的藥物，本發(fā)明還涉及所述藥物的制備方法。
背景技術(shù)：
：腦震蕩是因外界暴力打擊，或從高處墜下，或跌撲等使頭部受傷、腦干網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)功能降低，并影響脊髓功能，出現(xiàn)意識、肌張力、腦反射降低的綜合征象。它是最輕的一種腦損傷，經(jīng)治療后大多可以治愈，其可以單獨發(fā)生，也可以與其他顱腦損傷如顱內(nèi)血腫合并存在。臨床表現(xiàn)為意識障礙：程度較輕而時間短暫，可以短至數(shù)秒鐘或數(shù)分鐘，但不超過半小時；近事遺忘：清醒后對受傷當時情況及受傷經(jīng)過不能回憶，但對受傷前的事情能清楚地回憶；此外，還常伴有頭痛、頭暈、惡心、厭食、嘔吐、耳鳴、失眠、畏光、注意力不集中以及反應遲鈍等癥狀，神經(jīng)系統(tǒng)檢查無陽性體征。大多數(shù)腦震蕩表現(xiàn)出為一過性神經(jīng)功能改變，但是如果不及時有效的治療，反復、長期腦震蕩，其腦組織的病理變化尤為顯著，可引起嚴重的后遺癥，存在一些因腦震蕩死亡的病例和拳擊手反復受到腦部撞擊后發(fā)生慢性腦萎縮甚至一些嚴重的神經(jīng)系統(tǒng)疾?。宦殬I(yè)拳師發(fā)生慢性腦萎縮損害甚至癡呆，以及業(yè)余拳擊者亦有腦功能輕度障礙。目前臨床上治療腦震蕩，通常多選用口服腦復康、顱通定、谷維素、安定，靜脈滴注atp，輔酶a等，雖然它們對改善和治療腦震蕩有一定的幫助效果和療效，但仍不盡人意，腦康復效果不佳。因此，存在對于研發(fā)更多具有腦震蕩治療作用的藥物的需求。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的，在于提供一種能夠用于治療腦震蕩的藥物，具體地，本發(fā)明涉及一種能夠用于治療腦震蕩的式i化合物或其藥學上可接受的鹽、前藥、溶劑合物：其中，r1、r2獨立地選自由以下組成的組：氫原子、(c1-4)烷基、(c1-4)鹵代烷基、(c1-4)烷氧基、(c1-4)烷硫基、鹵素、氰基、硝基、氨基、(c1-4)烷基氨基、二((c1-4)烷基)氨基、(c1-4)烷氧基羰基、(c1-4)烷基磺?；?、任選具有取代基的(c6-10)芳基或任選具有取代基的3至8元雜環(huán)基；r3、r4獨立地選自由以下組成的組：氫原子、(c1-4)烷基、(c1-4)鹵代烷基、(c1-4)烷氧基、(c1-4)烷硫基、鹵素、氰基、硝基、氨基、(c1-4)烷基氨基、二((c1-4)烷基)氨基、(c1-4)烷氧基羰基、(c1-4)烷基磺?；?；r5選自由以下組成的組：氫原子、(c1-4)烷基、(c1-4)鹵代烷基。在一實施方案中本發(fā)明涉及式i化合物，其中r1和r2表示(c1-4)烷基。在一實施方案中本發(fā)明涉及式i化合物，其中r1表示氫原子且r2表示(c1-4)鹵代烷基。在一實施方案中本發(fā)明涉及式i化合物，其中r5表示(c1-4)烷基。在一實施方案中本發(fā)明涉及式i化合物，其中r2選自由以下組成的組：(c1-4)鹵代烷基、氰基、3至8元雜環(huán)基。在一實施方案中本發(fā)明涉及式i化合物，其中在任選具有取代基的(c6-10)芳基或任選具有取代基的3至8元雜環(huán)基中，所述取代基選自由以下組成的組：鹵素、羥基、硝基、氰基、羧基、氨甲?；?、(c1-4)烷基、(c1-4)鹵代烷基、(c1-4)烷氧基、(c1-4)烷硫基、氨基、(c1-4)烷基氨基、二((c1-4)烷基)氨基。在一實施方案中本發(fā)明涉及式i化合物，選自由以下組成的組：在另一方面中，本發(fā)明涉及一種藥物組合物，其包含至少一種作為治療活性成分的根據(jù)式i化合物或其藥學上可接受的鹽、前藥、溶劑合物和藥學上可接受的載體或媒介物。在另一方面中，本發(fā)明涉及所述式i化合物或其藥學上可接受的鹽、前藥、溶劑合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療腦震蕩。有益效果本發(fā)明化合物能夠極大地降低腦震蕩大鼠的eba含量，提高其血腦屏障完整性，能夠減少其受損神經(jīng)元個數(shù)，降低腦組織含水量，因此本發(fā)明化合物對于腦震蕩具有十分優(yōu)異的治療作用，可用于腦震蕩的治療中。具體實施方式下文將詳細的描述本發(fā)明。除非另外定義，本申請使用的所有技術(shù)和科學術(shù)語具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人員通常所理解相同的含義。將本申請?zhí)峒暗乃袑＠统霭嫖锿ㄟ^引用的方式并入本文。術(shù)語“(c1-4)烷基”旨在表示當從烴除去一個氫原子時獲得的基團。所述烷基可以為支鏈或直鏈且可以包含1-4個、諸如1-3個碳原子、諸如1-2個碳原子、諸如2-3個碳原子。術(shù)語包括子類正烷基、仲烷基和叔烷基，諸如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。術(shù)語“芳基”旨在表示包含6-10個碳原子、諸如6個碳原子的芳族碳環(huán)的基團。芳基的代表性實例包括但不限于苯基和萘基。術(shù)語“鹵素”旨在表示來自周期表第7主族的取代基，諸如氟、氯、溴和碘。術(shù)語“(c1-4)鹵代烷基”旨在表示如上文定義的烷基，其中所述烷基由1-4個碳原子組成且其中所述烷基被一個或多個鹵素原子取代，例如三氟甲基、二氟甲基、氟甲基或三氟乙基。術(shù)語“3至8元雜環(huán)基”旨在表示包含1-5個碳原子和1-4個選自氧、硫和氮的雜原子的3至8元的單環(huán)或雙環(huán)的飽和、部分不飽和以及芳香族環(huán)基，例如氮雜環(huán)丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌嗪基、高哌嗪基、吡唑啉基、氧雜環(huán)丙烷基、四氫呋喃基、噁唑烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等。本發(fā)明式i化合物的藥學上可接受的鹽，是指式i化合物與藥學上可接受的酸形成的加成鹽。所述的酸包括：無機酸如鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸、高氯酸以及磷酸；或者有機酸例如檸檬酸、乙酸、乳酸、馬來酸、富馬酸、甲磺酸、琥珀酸、酒石酸、帕莫酸、谷氨酸、天冬氨酸、草酸、甲磺酸、乙磺酸、4-甲苯磺酸、水楊酸、檸檬酸、苯甲酸以及丙二酸。本發(fā)明式i化合物的前藥，是指作為在體內(nèi)與酶、胃酸等反應的結(jié)果而轉(zhuǎn)變成式i化合物的化合物。作為前藥，已知有許多類型的前體藥物，并且適合的前體藥物可以從已知文獻選擇并通過已知方法合成。本發(fā)明式i化合物溶劑合物，是指通過與溶劑分子配位而形成呈固態(tài)或液態(tài)的復合物的化合物形式。本發(fā)明的實施方案為藥物組合物，包含至少一種作為治療活性成分的根據(jù)式i化合物或其藥學上可接受的鹽、前藥、溶劑合物和藥學上可接受的載體或媒介物。呈劑量單位形式的化合物可以每天以適當間隔施用一次或多次，但是，總是取決于患者疾患，以及根據(jù)醫(yī)師給出的處方。方便地，劑量單位的制劑含有0.1mg至1000mg，優(yōu)選1mg至100mg，如5-50mg的式i化合物。本發(fā)明化合物的適合劑量將尤其取決于患者的年齡和疾患、待治療疾病的嚴重性和其它執(zhí)業(yè)醫(yī)師所熟知的因素。該化合物可以根據(jù)不同給藥方案例如每天或每周間隔口服、胃腸外或局部施用。所述制劑包括例如呈適用于口服(包括持續(xù)釋放或定時釋放)、直腸、胃腸外(包括皮下、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)和靜脈內(nèi))、經(jīng)皮、眼部、局部、皮膚、鼻部、頰部或皮內(nèi)施用的制劑。制備方法本發(fā)明化合物可以用合成領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的許多方法來制備。式i化合物可以例如使用下面列出的反應和技術(shù)連同合成有機化學領(lǐng)域已知的方法或本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的其變體來制備。優(yōu)選的方法包括但不限于下面描述的那些方法。反應在適用于所用試劑和材料且適用于要實現(xiàn)的轉(zhuǎn)化的溶劑中進行。此外，在下面描述的合成方法中，應理解所有建議的反應條件(包括溶劑、反應氣氛、反應溫度、實驗持續(xù)時間和后處理程序的選擇)都選擇為該反應的標準條件，這應該被有機合成領(lǐng)域技術(shù)人員容易確認。并非所有落入給定類別的化合物可以與某些所述方法中需要的某些反應條件相容。對與反應條件相容的取代基的這些限制將對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的，并且可使用替代方法。具體地，式i化合物可由以下包含以下步驟的方法制備：步驟一：式ii化合物與式iii化合物反應以制備由式iv化合物；其中，x表示鹵素原子，優(yōu)選氯原子或溴原子；所述反應在鈀催化劑和堿的存在下進行，所述鈀催化劑包括四(三苯基膦)鈀、醋酸鈀，優(yōu)選四(三苯基膦)鈀，所述堿包括碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫。步驟二：式iv化合物與式v化合物反應以制備由式i化合物；所述反應在三光氣和堿的存在下進行，所述堿包括4-二甲氨基吡啶、三乙胺、吡啶或哌啶。上述步驟中，r1-r5如前文所定義。本發(fā)明實用的且目前優(yōu)選的實施方式如以下方實施例說明。然而，應當理解，本領(lǐng)域技術(shù)人員考慮本公開后可在本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)做出修飾和改進。實施例實施例1：n-(5,6-二甲基-2-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-3h-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1,6-二氧代六氫吡咯[1,2-a]吡嗪-2(1h)-甲酰胺(化合物1)步驟一：在氮氣保護下將碳酸鉀(2.74g，20mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環(huán)戊硼烷-2-基)-1h-吡唑(2.23g，11mmol)加入圓底燒瓶中。將2-氯-5,6-二甲基-3h-咪唑[4,5-b]吡啶-7-胺(1.96g，10mmol)溶解在1,4-二氧雜環(huán)己烷(40ml)和水(2ml)中并一等份加入。將氮氣鼓過所得懸浮液約2分鐘。然后一次性加入四(三苯基膦)鈀(1.17g，1mmol)，加熱至回流，攪拌下反應10小時。將該反應液在水(200毫升)和乙酸乙酯(200ml)之間分配。水層用乙酸乙酯(2×100ml)進一步萃取，合并的有機物用鹽水(100ml)洗滌，用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑后得到中間體5,6-二甲基-2-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-3h-咪唑[4,5-b]吡啶-7-胺，然后溶于乙酸乙酯(100ml)中備用。步驟二：在0℃向步驟一獲得的溶液中加入三光氣(2.96g，10mmol)和三乙胺(2ml)。將混合物在室溫攪拌1.5小時，之后添加于乙酸乙酯(20ml)中的四氫吡咯[1,2-a]吡嗪-1,6(2h,7h)-二酮(1.54g，10mmol)。將反應物在45℃攪拌24h并用nh4cl水溶液猝滅。將所得混合物用乙酸乙酯萃取(2×100ml)；將合并的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，然后在高真空中濃縮。殘余物通過硅膠色譜(乙醚/乙酸乙酯＝2/1至1/1)純化以得到標題化合物1.31g，收率31.2％，含量99.1％。esi-ms：423.18[m+h]+元素分析：理論值/實測值，c(56.86/56.69)，h(5.25/5.20)，n(26.53/26.68)，o(11.36/11.43)1hnmr(400mhz,cdcl3)δ13.45(s,1h),8.93(s,1h),7.94(s,1h),7.51(s,1h),4.14(t,1h),3.96(s,3h),3.46(t,2h),3.31(t,2h),2.52(s,3h),2.36(t,2h),2.29(t,2h),2.16(s,3h)。實施例2：n-(5-二氟甲基-2-(1-異丙基-1h-吡唑-4-基)-3h-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1,6-二氧代六氫吡咯[1,2-a]吡嗪-2(1h)-甲酰胺(化合物2)步驟一：在氮氣保護下將碳酸鉀(2.74g，20mmol)和1-異丙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環(huán)戊硼烷-2-基)-1h-吡唑(2.59g，11mmol)加入圓底燒瓶中。將2-氯-5-二氟甲基-3h-咪唑[4,5-b]吡啶-7-胺(2.18g，10mmol)溶解在1,4-二氧雜環(huán)己烷(40ml)和水(2ml)中并一等份加入。將氮氣鼓過所得懸浮液約2分鐘。然后一次性加入四(三苯基膦)鈀(1.17g，1mmol)，加熱至回流，攪拌下反應10小時。將該反應液在水(200毫升)和乙酸乙酯(200ml)之間分配。水層用乙酸乙酯(2×100ml)進一步萃取，合并的有機物用鹽水(100ml)洗滌，用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑后得到中間體5-二氟甲基-2-(1-異丙基-1h-吡唑-4-基)-3h-咪唑[4,5-b]吡啶-7-胺，然后溶于乙酸乙酯(100ml)中備用。步驟二：在0℃向步驟一獲得的溶液中加入三光氣(2.96g，10mmol)和三乙胺(2ml)。將混合物在室溫攪拌1.5小時，之后添加于乙酸乙酯(20ml)中的四氫吡咯[1,2-a]吡嗪-1,6(2h,7h)-二酮(1.54g，10mmol)。將反應物在45℃攪拌24h并用nh4cl水溶液猝滅。將所得混合物用乙酸乙酯萃取(2×100ml)；將合并的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，然后在高真空中濃縮。殘余物通過硅膠色譜(乙醚/乙酸乙酯＝2/1至1/1)純化以得到標題化合物1.68g，收率35.7％，含量98.7％。esi-ms：473.18[m+h]+元素分析：理論值/實測值，c(53.39/53.51)，h(4.69/4.60)，f(8.04/8.12)，n(23.72/23.82)，o(10.16/10.04)1hnmr(400mhz,cdcl3)δ13.42(s,1h),8.96(s,1h),7.92(s,1h),7.31(s,1h),6.58(s,1h),6.47(s,1h),4.24(m,1h),4.14(t,1h),3.46(t,2h),3.31(t,2h),2.36(t,2h),2.29(t,2h),1.67(d,6h)。按照類似的方法，合成以下化合物：化合物3：n-(5-氰基-2-(1-甲基-5-甲基磺?；?1h-吡唑-4-基)-3h-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1,6-二氧代六氫吡咯[1,2-a]吡嗪-2(1h)-甲酰胺esi-ms：498.12[m+h]+元素分析：理論值/實測值，c(48.29/48.37)，h(3.85/3.94)，n(25.34/25.27)，o(16.08/16.04)，s(6.45/6.38)1hnmr(400mhz,cdcl3)δ13.47(s,1h),8.90(s,1h),7.91(s,1h),7.51(s,1h),4.14(t,1h),3.96(s,3h),3.46(t,2h),3.31(t,2h),3.18(s,3h),2.36(t,2h),2.29(t,2h)?；衔?：n-(2-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(噻唑-2-基)-3h-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1,6-二氧代六氫吡咯[1,2-a]吡嗪-2(1h)-甲酰胺esi-ms：478.13[m+h]+元素分析：理論值/實測值，c(52.82/52.75)，h(4.01/4.09)，n(26.40/26.48)，o(10.05/10.02)，s(6.72/6.66)1hnmr(400mhz,cdcl3)δ13.45(s,1h),8.93(s,1h),7.94(s,1h),7.78(d,1h),7.64(d,1h),7.51(s,1h),6.81(s,1h),4.14(t,1h),3.96(s,3h),3.46(t,2h),3.31(t,2h),2.36(t,2h),2.29(t,2h)。接下來，通過實驗例具體解釋代表性化合物的藥理效應。測試實驗例1：目標化合物對大鼠腦震蕩的治療作用選擇雄性sd大鼠180只，體重200-300g；室溫下常規(guī)飼養(yǎng),自由飲食,明暗周期各半，環(huán)境適應兩周后，其中150只進行腦震蕩模型的制備，用10％水合氯醛0.4g/kg腹腔注射，使大鼠麻醉，用重量為114.6g的物體從大鼠右側(cè)頭蓋骨上方20cm處落下，大鼠的頭蓋骨受到0.224n的沖擊，產(chǎn)生嚴重的腦震蕩。另外30只作為正常對照組。將制模成功的大鼠隨機分為5組，每組30只，分別為模型組、測試化合物1-4組(統(tǒng)稱為測試化合物組)。測試化合物組在制模后8小時、12小時分別給予相應測試化合物20mg/kg灌胃，制模24小時后處死，進行檢測；模型組給予等量大豆油灌胃。1)測定大鼠血腦屏障(bbb)通透性：采用伊文思藍(eba)示蹤法，每組取10只大鼠，處死前1h經(jīng)大鼠尾靜脈注入2％的eba(0.3ml/100g)，大鼠皮膚、球結(jié)膜等變藍表示注入成功，1h后，經(jīng)心臟灌注預冷的生理鹽水，直至右心房流出清亮液體時，快速取病變側(cè)腦組織，稱濕重后，放入5ml甲酰胺溶液中，酶標儀測定其630nm處的吸光度值，測定eba的含量。2)受損神經(jīng)元個數(shù)的測定：每組取10只大鼠，切除額極，放置于2％的ttc磷酸鹽緩沖液中，避光，37℃恒溫水浴箱中染色15min，染上顏色后棄去ttc，置于4％多聚甲醛中固定24h，計算受損的神經(jīng)元個數(shù)。3)腦組織含水量測定：采用干濕法，每組取10只大鼠以水合氯醛深度麻醉后頸椎脫臼法處死，快速斷頭取腦，切除額極后，在病變側(cè)取約2mm厚的腦組織測定腦含水量。腦組織稱重(濕重)；置于烤箱內(nèi)100℃烘24h后，再次稱重(干重)。腦組織含水量(％)＝(濕重-干重)/濕重×100％。結(jié)果示于以下表1中:表1：測試化合物對于血腦屏障、受損神經(jīng)元和腦組織含水量的影響組別eba含量(mg％)受損神經(jīng)元個數(shù)腦組織含水量(％)正常對照組0.17±0.043±275.38±0.23模型組3.18±0.21*378±24*81.25±0.28*化合物1組0.81±0.07#79±21#76.34±0.26#化合物2組0.87±0.11#93±27#76.47±0.18#化合物3組0.74±0.09#67±18#76.22±0.17#化合物4組0.79±0.13#82±25#76.29±0.24#注：與正常對照組相比，*p<0.01；與模型組相比，#p<0.01上述結(jié)果表明，在血腦屏障通透性試驗中，與正常對照組比較，模型組大鼠的eba含量顯著升高(p<0.01)，受損神經(jīng)元個數(shù)極大增加(p<0.01)，腦組織含水量明顯提高(p<0.01)，這表明模型組大鼠的血腦屏障的通透性顯著提高，血腦屏障完整性降低。血腦屏障通透性增高造成了毛細血管內(nèi)血漿蛋白與水分滲出引起腦組織細胞外液含量增加，從而引起血管源性腦水腫。因此，上述結(jié)果表明腦震蕩大鼠建模成功。與模型組比較，試驗化合物能夠極大地降低腦震蕩大鼠的eba含量(p<0.01)，也就是提高了血腦屏障的完整性，能夠減少受損神經(jīng)元個數(shù)(p<0.01)，降低腦組織含水量(p<0.01)，這表明測試化合物對于腦震蕩具有十分優(yōu)異的治療作用，因此可用于腦震蕩的治療。以上描述了本發(fā)明優(yōu)選實施方式，然其并非用以限定本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員對在此公開的實施方案可進行并不偏離本發(fā)明范疇和精神的改進和變化。當前第1頁12